乳增灵配方颗粒对实验性大鼠乳腺增生及性激素水平的影响

            作者：孟庆春 王俊玲 方少琼 蒋红兵 张黎 黄犁 刘芳 

【摘要】  目的：观察乳增灵配方颗粒对大鼠乳腺增生病的防治作用。方法：采用苯甲酸雌二醇和黄体酮分别注射大鼠20 d 和 5 d，建立乳腺增生病模型，于造模 35 d 后给予乳增灵配方颗粒，连续 60 d，测定血清中雌二醇（E2）、孕酮（P）、睾酮（T）水平，测量第 2、3 对乳头高度，镜下观察第 2 对乳腺增生的病理改变，观察各组乳腺增生程度。结果：乳增灵配方颗粒能显著降低实验性乳腺增生大鼠乳头高度，降低 E2 含量，病理组织学检查结果提示乳增灵配方颗粒可减轻乳腺增生大鼠乳腺充血与水肿，减少乳腺小叶的腺泡数量。结论：乳增灵配方颗粒具有一定防治乳腺增生病作用。

【关键词】  乳增灵；配方颗粒；乳腺增生

Effects  of  Ruzengling  Compatible  Granule  on  Cyclomastopathy  Rats

    〔Abstract〕    Objective     It  is  to  observe  the  action  of  prevention  and  treatment  of  Ruzengling  compatible granule  on c yclomastopathy.    Methods     Experimental  cyclomastopathy  rat  model  was  made  with  intramuscularinjection  of  estrogen  for  20 d  and  progestin  for  5 d  respectively.  Ruzengling  compatible  granule  was  given  after 35 d  model  making  and  lasted  for  60  days.  The  levels  of  E2,  P  and  T  in  plasma  were  determined.  The  height  of  the  second  and  third  nipples  of  rats  was  measured  after  model  making.  The  patho-change  of  hyperplasia  of  the  second  pair  of  mammary  glands  was  observed  under  micr oscope.  The  changes  of  hyperplasia  of  mammary  glands in  every  group  were  observed.    Results     Ruzengling  compatible  granule  could   remarkably  reduce  the  nipple  height  of  experimental  cyclomastopathy  rats,  reduce  the  content  of  E2.  Histopathology  examination  showed  that  Ruzengling  compatible  granule  could reduce  the  hyperemia  and  edema  of  cyclomastopathy  rats,  decrease the  number  of  alveolus  in  lobules  of  mammary  gland.    Conclusion     Ruzengling  compatible  granule  has  the function  of  prevention  and  treatment  on  cyclomastopathy.

    〔Key  Words〕    Ruzengling;  Compatible  granule;  Cyclomastopathy

     乳增灵配方颗粒为本院中医科常用配方用药，由柴胡、当归、白芍、茯苓、鹿角胶等多味中药配方颗粒组成，具有调肝补肾、化痰散瘀的功效，临床用于主治乳腺增生症。经过临床多年应用证实该方对乳腺增生症有较佳疗效，为了探讨乳增灵乳腺增生症的作用及其机制，我们进行了相关动物实验研究。

    1    材料与方法

    1.1    材料

    1.1.1    药物和试剂    乳增灵配方颗粒由广东一方药业有限公司生产提供，批号：06040009；特茉芬，德国 Roltendorf Pharma. GmbH 产品，批号： 42249A。

    苯甲酸雌二醇注射液，天津金耀氨基酸有限公司，0507241；黄体酮注射液，上海通用药业股份有限公司，051003。

    1.1.2    动物    SPF 级 SD 大鼠，48 只，雌性，体重 180~220 g，由广东省医学实验动物中心提供。动物合格证和实验设施合格证号分别为 SCXK（粤）2003-0002 和粤监证字 2005A010。

    1.1.3    仪器    游标卡尺，上海汇一尺业有限公司；Sartorius BS224S 万分之一天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；奥林巴斯 BH 荧光显微镜，奥林巴斯公司。

    1.2    方法

    取 SD 雌性未孕大鼠 48 只，随机分为 6 组，分别为空白对照组，模型对照组，特茉芬 1.8 mg/kg 组，乳增灵配方颗粒 37.8、18.9、9.45 g 生药/kg 组。

    除空白对照组外，其余各组大鼠按 0.5 mg/kg 注射苯甲酸雌二醇，每日 1 次，连续 20 d，随后注射黄体酮 5 mg/kg，每天 1 次，连续注射 5 d。空白对照组每天注射生理盐水 0.2 mL/只，连续注射 25 d，模型制作成后再饲养 35 d 用于治疗[1]。

    各给药组按剂量灌胃给药，空白对照组和模型对照组给予等体积蒸馏水，每天 1 次，连续 60 d。

    末次给药后 1 h，大鼠麻醉，腹腔静脉取血 4 mL 作雌二醇（E2）、孕酮（P）、睾酮（T）测定；用精密游标卡尺测量每只大鼠胸部第 2、3 对乳房乳头高度；以 8 mm 打孔器取下第 3 对完整乳房，电子称称重；取下第 2 对完整乳房，10% 福尔马林固定，石蜡包埋，HE 染色，光镜下检查增生乳腺病理组织变化。乳腺组织根据病理增生状况分为Ⅰ~Ⅳ级。

    Ⅰ级（正常乳腺组织）：乳腺小叶不增生（-），腺泡数量极少，腺泡和导管不扩张，处于静止状态；Ⅱ级：增生（+），乳腺小叶无明显增生，个别腺泡和导管有轻度增生，无扩张；Ⅲ级：增生（++），乳腺小叶大部分增生，部分腺泡和导管明显扩张；Ⅳ级：增生（+++），乳腺小叶明显增生，腺泡和导管处于极度扩张状态，腺上皮细胞呈扁平状，腺泡内及导管内有大量的分泌物。累计每组动物乳腺评分，进行秩和检验，若平均秩次越高提示增生程度越重[2]。

    1.3    统计方法

    各组实验数据均以 x±s 表示，采用 SPSS l3.0 软件进行 One-Way ANOVA 分析处理。

    2    结    果

    2.1    乳增灵配方颗粒对乳腺增生大鼠乳头高度的影响

    见表 1，乳增灵配方颗粒按 37.8、18.9、9.45 g 生药/kg 剂量用药 60 d 后，大鼠第 2、3 对乳头高度与模型组相比均明显减小（P < 0.01）。

    2.2    乳增灵配方颗粒对乳腺增生大鼠乳房重量的影响

    表 2 显示，乳增灵配方颗粒按 37.8、18.9、9.45 g 生药/kg 剂量用药 60 d 可显著减小乳腺增生大鼠第 3 对乳房重量（P < 0.01）。

    2.3    乳增灵配方颗粒对乳腺增生大鼠血清 E2、P、T 含量的影响

    表 3 说明，乳增灵配方颗粒按 37.8、18.9、9.45 g 生药/kg 剂量用药 60 d 可显著减少乳腺增生大鼠 E2 含量（P < 0.01）。

    2.4    乳增灵配方颗粒对乳腺增生大鼠病理组织变化的影响

    病检查显示：正常对照组所有乳腺组织均呈正常形态（Ⅰ级），乳腺小叶散在分布，无腺泡增多、腺上皮层次增加、腺泡扩张、分泌等小叶增生现象；亦无导管上皮增生、组织变性坏死、炎细胞浸润等病理改变。模型对照组所有乳腺组织均呈重度乳腺小叶增生（Ⅳ级或Ⅲ级），腺泡明显增多，部分小叶分界不清，腺泡高度扩张，分泌旺盛，导管上皮呈中度到重度增生，但组织无变性坏死、炎细胞浸润等病理改变。特茉芬组动物乳腺组织呈轻度乳腺小叶增生（Ⅱ级或Ⅰ级），病变程度较轻。乳增灵配方颗粒 37.8、18.9 g 生药/kg 剂量组动物所有乳腺组织呈轻到中度不等之乳腺小叶增生（Ⅱ级或Ⅲ级），总体病变程度明显较模型对照组为轻，无导管上皮增生、组织变性坏死、炎细胞浸润等病理改变。

    3    讨    论

    乳腺增生病是育龄妇女常见病和多发病，临床以乳房疼痛伴乳房肿块为特征，约占乳腺病 75%，其中有 2%~5% 的患者发生癌变。目前，西医对该病防治多采用手术或用激素及受体阻断剂等，虽有疗效但往往愈后会导致激素代谢趋于紊乱。

    乳腺增生病属中医学，“乳癖”范畴，认为“冲任失调”是发生乳腺增生病的根本原因。其病机为肝气郁结，气郁血瘀、肝气犯脾、脾不健运、痰气互结、脾肾阳虚、痰湿结聚所致[3]，临床上出现乳房肿胀、疼痛、结块等，除上述症状外，主要在小叶和末梢导管表现上皮细胞增生及腺泡扩张和增生，其关键是丘脑-垂体-卵巢性腺轴内分泌失调及体内 E2、P 水平失调，E2 / P 比值紊乱，长期作用后乳腺上皮细胞和间质细胞增生，增加结缔组织水钠潴留，造成小叶间水肿[4，5]。

    根据中医学理论和临床实践，我们认为本病的病机是肝郁肾虚为本，痰瘀凝结为标，根据标本同治的原则，结合本病症的临床表现，以调肝补肾、化痰散瘀立法，据此组方乳增灵，经长期的临床观察取得了很好的疗效。我们实验研究证实，乳增灵配方颗粒能显著降低实验性乳腺增生大鼠乳头高度，减小乳房重量，显著降低血清 E2 含量，病理组织学检查结果提示乳增灵配方颗粒可减轻乳腺增生大鼠乳腺充血与水肿，减少乳腺小叶的腺泡数量。研究结果为乳增灵配方颗粒用于临床乳腺增生病患者提供了理论依据。

【】
  〔1〕韦永芳, 黄霖, 杨辉, 等. 健乳灵治疗大鼠乳腺增生的病理观察〔J〕. 广州医学院学报, 2005, 33(1):33-37

〔2〕沈红艺, 童瑶, 龚跃新, 等. 乳舒安胶囊抗乳腺增生和镇痛的实验研究〔J〕. 南京中医药大学学报, 2004, 20(6):349-352

〔3〕郑陆辛, 纪福, 陈华元. 乳癖合剂治疗实验性豚鼠乳腺增生病的研究〔J〕. 南京中医药大学学报(版), 2000, 16(1):28

〔4〕阙华发, 阙振福, 邓相爱, 等. 乳腺增生辨证分型与神经内分泌相关性研究〔J〕. 中医药学刊, 2001, 19(4):98-99

〔5〕朱萱萱, 曹仕兵, 张忠华, 等. 中药药膜加微波照射对实验性大鼠乳腺增生的影响〔J〕. 中药新药与临床药理, 2005, 16(1):40