慢性应激对大鼠行为及血清IL-2含量的影响

【摘要】  目的  探讨慢性应激对大鼠体质量、行为和血清IL-2含量的影响。方法　取健康雄性SD 大鼠随机分为对照组（n=10）和应激组（n=10）。采用束缚、食物剥夺、昼夜颠倒、鼠笼倾斜和变换合笼饲养对象的复合应激方式建立慢性应激模型,通过旷场试验观察大鼠的行为变化，用秤监测大鼠的体质量变化；采用ELISA法测定大鼠血清IL-2的含量。结果  第3周应激后应激组大鼠的体质量增长明显低于对照组（P<0.05）；应激组大鼠水平运动得分和垂直运动得分均低于对照组（P<0.05）；应激组大鼠血清IL-2含量低于对照组（P<0.05）。结论  慢性应激可引起大鼠行为异常，抑制大鼠的体质量增长和机体免疫功能。
和应激组（n=10）。采用束缚、食物剥夺、昼夜颠倒、鼠笼倾斜和变换合笼饲养对象的复合应激方式建立慢性应激模型,通过旷场试验观察大鼠的行为变化，用电子秤监测大鼠的体质量变化；采用ELISA法测定大鼠血清IL-2的含量。结果  第3周应激后应激组大鼠的体质量增长明显低于对照组（P<0.05）；应激组大鼠水平运动得分和垂直运动得分均低于对照组（P<0.05）；应激组大鼠血清IL-2含量低于对照组（P<0.05）。结论  慢性应激可引起大鼠行为异常，抑制大鼠的体质量增长和机体免疫功能。
【关键词】  慢性应激  行为学  白细胞介素2

【Abstract】 Objective  To explore the change of IL-2 concentrations in serum and behavior of rat induced by chronic stress.  Methods SD rats were administered with different multi-stress. Open-field test was applied to evaluate behavior of the rats. The IL-2 level in serum was measured.  Results   Body weight gain in stress group was significantly lower than that in control group (P<0.05). The open-field test showed that there was remarkable difference between chronic stress group and the control group. The serum IL-2 level of stress group was significantly lower than that of control group (P<0.05).  Conclusion   Chronic stress might induce abnormal behavior of rats, and suppress weight gain of rats. At the same time it might induce the inhibition of immune function.
【Key words】Chronic psychological stress   Ethology   interleukin-2
        随着社会竞争的激烈和生活节奏的加快，应激已成为多种疾病的重要病因或诱因。过度持久的应激使人体处于心理压力过大、超负荷运转的紧张状态中，很容易使机体走向亚健康状态。国内外研究表明，心理应激可以引起心理行为变化。而且，过度持久的应激可使机体免疫功能低下，也影响神经系统中与行为相关的神经元形态和功能，导致动物行为异常[1]。本课题通过检测慢性应激小鼠在旷场实验中的行为变化及免疫指标的变化，进一步探讨慢性应激对心理行为以及免疫功能的影响及其可能的机制。
        1 材料和方法
        1.1 材料  健康雄性Sprague Dawley大鼠20只，体质量200～300g。实验前适应性饲养1周，自由饮水进食，室温20～22℃，昼夜节律光照，普通级动物，由山西省中医研究所提供。动物按体质量随机分为对照组和应激组，每组10只。实验过程中死亡1只，未纳入统计。
        1.2 建立慢性应激模型  采用5种应激方式，包括束缚（4h）、食物剥夺(24h)、昼夜颠倒（24h）、鼠笼倾斜（12h）、变换合笼饲养对象（24h）。应激持续4周，每周休息1日。每日随机选取1 种应激方式作用于应激组动物，共应激28天。对照组动物不给予任何应激，相同条件下饲养28天。
        1.3 动物体质量测定  实验前及实验过程中每周用动物秤称动物体质量1次，共5次。体质量增长量(g)=实验后每周周末体重(g)- 实验前体重(g)
        1.4 行为学测定  采用旷场实验(Open field test，OFT)，本实验所采用的开阔箱自制，长80cm、宽80m、高40cm，周壁为黑色，上面敞开。底面分成面积相等的25块，沿墙格为外周格，其余为中央格。操作者轻轻将大鼠放入开阔箱的正中央格，并且开始计时由三个人共同观察记录大鼠在3min内的行为举动。主要观察指标：（1）中央格停留时间：大鼠被放入中央格至其三爪跨离该格的时间；（2）穿格次数（水平运动得分）：三爪以上跨入临格的次数；（3）直立次数（垂直运动得分）：前肢向上抬举次数（两爪离地1cm以上）；（4）粪便次数。行为总分为水平运动得分和垂直运动得分之和。每次彻底清洁敞箱后，再进行下一只动物的测试。整个实验在明亮安静的房间里进行。
        1.5 标本制备  试验结束后第二日9:00am～11:00am,大鼠断头取血,置于室温凝固2小时后,离心15min (1500×g) ,取血清, -20℃保存待用。
        1.6 血清IL-2水平检测  采用双抗体酶联免疫吸附试验法（ELISA），具体操作严格按照说明书进行，试剂盒购于武汉博士德生物工程有限公司。
        1.7 统计学处理  采用SPSS13.0统计学软件对数据进行整理和分析。实验结果采用       ±s表示，两均数间比较采用t检验。检验水准α=0.05。
        2 结果
        2.1 慢性应激对大鼠体质量的影响  见表1。实验前两组大鼠体质量无显著差异（P>0.05）。各组大鼠的体质量随时间呈增长趋势，但第3周应激后应激组大鼠的体质量增长明显低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
        2.2 慢性应激对大鼠旷场实验的影响  见表2。应激组大鼠中央格停留时间和粪便次数高于对照组，经t检验，差异无统计学意义（P>0.05）；其水平运动得分和垂直运动得分均低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。
        2.3 慢性应激对大鼠血清IL-2含量的影响  应激组大鼠血清IL-2含量为(28.88±0.028)pg/ml低于对照组（48.21±0.069）pg/ml。经t检验，t=-2.425,P=0.039。差异有统计学意义（P<0.05）。
        3  讨论
        应激是机体在受到各种强烈因素（刺激源）刺激时所出现的一系列神经内分泌反应以及由此而引起的各种机能和代谢的改变。