血清高半胱氨酸含量与恶性肿瘤的关系

【摘要】  目的 探讨血清高半胱氨酸水平与恶性肿瘤的关系。方法 采用A/C Diagnostics Homocysteine Enzymatic Microtiter Plate Absorbance Assay测定249名恶性肿瘤患者和215名健康对照的血清高半胱氨酸水平。结果 恶性肿瘤患者血清高半胱氨酸几何均数为118.48μM/L（95%CI：116.40～120.56），对照组为11.20μM/L（95%CI：8.16～14.24），两组差异非常显著（t=27.307，P=0.000）。不同部位和不同组织类型恶性肿瘤之间没有明显差异（P<0.05）。经非条件Logistic回归分析，血清高半胱氨酸可增加恶性肿瘤危险性13.082倍（95%CI：7.544～22.685）。其诊断的灵敏度和特异度分别为91.16%和95.35%。 结论 在排除心血管疾病和糖尿病后，血清高半胱氨酸可作为恶性肿瘤的标志物。

【关键词】  高半胱氨酸 恶性肿瘤 肿瘤标志物

　　0  引言
   
　　绝大多数恶性肿瘤的病因和发病机制目前仍不清楚，由于高半胱氨酸可能是使上皮性组织发生生物性转化的一种促进因素[1，2]，因此，血清（浆）或局部组织中tHcy水平与恶性肿瘤的关系也引起了重视。体外组织培养结果表明，高半胱氨酸可引起组织畸形和畸胎[1,2]。已有研究证实，白血病、卵巢癌、乳腺癌及消化系统肿瘤等与血浆高浓度高半胱氨酸水平有密切联系[3?7]。为此我们进行了恶性肿瘤与血清高半胱氨酸含量的研究。

　　1  资料和方法

　　1.1  资料  正常对照来自体检健康、非恶性肿瘤患者。男101例，女114例，平均年龄分别为52.20岁和51.82岁。病例来自哈尔滨医科大学附属肿瘤2002年11月～2003年7月经病理确诊的恶性肿瘤患者，共计249例。男性103例，女性146例，平均年龄分别为55.85岁和51.62岁。其中结/直肠癌92例，肝癌24例，卵巢癌37例，乳腺癌21例，胃癌11例，肺癌10例和其他癌54例。两组间年龄分布没有统计学差异（χ2=1.487，P=0.476）。 酶溶液（Recombinant Homocysteinase rHcyaseTM）由美国AntiCancer公司提供。

　　1.2  方法  采集被研究者空腹晨血5ml，0℃～4℃保存，1h内离心取血清，低温保存备用。在采血同时调查被研究者既往吸烟史、饮酒史、疾病史等情况。血清中tHcy的测定使用美国AntiCancer公司提供的A/C Diagnostics Homocysteine Enzymatic　Microtiter Plate Absorbance Assay方法[8,9]。
   
　　血清中tHcy含量属偏态资料，用G±S表示。两组间计数资料的差异用卡方检验，计量资料用t检验，多组间的均数比较用方差分析。采用非条件Logistic回归模型进行单因素和多因素分析。所有统计分析均使用SAS6.12软件包完成。

　　2  结果

　　2.1  tHcy平均水平  健康对照组血清平均含量为（11.20±3.04）μM/L，恶性肿瘤患者为（118.48±2.08）μM/L，两者之间存在明显的统计学差异（t=27.307，P=0.000）。

　　2.2  影响血清tHcy含量的因素  在健康对照中，对血清中tHcy含量有明显影响的因素为性别和吸烟，而在恶性肿瘤组各因素对血清中tHcy含量影响不明显，见表1。

　　表1  不同暴露因素下血清中tHcy含量（略）

　　2.3  不同部位和不同病理类型恶性肿瘤血清中tHcy含量  不同部位和不同病理类型恶性肿瘤血清中tHcy含量经方差分析没有明显统计学差异，见表2、3。

　　表2  不同部位恶性肿瘤血清tHcy含量（略）

　　表3  不同病理类型恶性肿瘤血清tHcy含量（略）

　　表4  tHcy阳性与恶性肿瘤病理诊断的关系（略）
　　
　　2.4  灵敏度和特异度  我们以对照的95%位点值为正常值的上限，对病例组和对照组测定值进行定性划分，见表4。其诊断的灵敏度为91.16%（95%CI：82.55%～99.77%），特异度为95.35%（95%CI：94.39%～96.31%）。其阳性结果诊断价值为95.78%，阴性结果诊断价值为90.31%。

　　2.5  血清高浓度高半胱氨酸水平与恶性肿瘤的Logistic回归分析  经非条件Logistic回归分析，血清高半胱氨酸可增加恶性肿瘤危险性13.082倍（95%CI：7.544～22.685）。经性别、吸烟、饮酒、疾病史和肿瘤家族史等混杂因素调整后，血清高半胱氨酸可增加恶性肿瘤危险性15.378倍（95%CI：8.590～27.582）。血清高半胱氨酸含量以对照的百分位数分布为基准，血清高半胱氨酸含量最高四分位数与最低四份位数相比增加患恶性肿瘤的危险性107.794倍（95%CI：25.533～455.074），见表5。经Logistic逐步回归模型分析，最后进入模型的是高半胱氨酸含量、性别和疾病史（心脑血管疾病和糖尿病）。

　　表5  血清中高半胱氨酸不同浓度与恶性肿瘤（略）

　　* 经吸烟、性别、年龄、家族肿瘤史和疾病史调整；**SCT：血清tHcy含量

　　3  讨论
   
　　影响血清Hcy检测的因素较多，除了标本采集时要求被检测者禁食至少8h和采集后立即分离血清（或0℃～4℃保存不超过1h）外，影响因素还有性别、吸烟、饮酒等因素[10,11]，我们的研究结果基本与上述结果一致。对照组吸烟者血清Hcy几何均数为14.86μM/L，非吸烟者为10.07μM/L，吸烟对血清Hcy有明显影响。对照组饮酒者和非饮酒者的血清Hcy分别为13.45μM/L和10.67μM/L，两者之间没有明显的统计学差异。目前饮酒对血清Hcy的影响报道不一，有动物实验和人群研究认为饮酒对血清Hcy有明显影响[10,11]，但也有没有明显影响和相反的研究结果的报道[12]。饮酒对血清Hcy的影响尚无定论，需进一步研究。
   
　　Hcy与心脑血管疾病、神经管畸形、先天性心脏病和老年痴呆等有明显关系的研究报道较多，但Hcy与恶性肿瘤关系的研究报道甚少。近年来，有报道称肝癌、结直肠癌及妇科肿瘤等患者均可见到血浆Hcy升高[3?7]，也有血清Hcy水平与口腔癌无关的研究报道[13]。本文观察了恶性肿瘤患者249例，结果表明恶性肿瘤患者血清Hcy明显高于对照组。各部位恶性肿瘤之间Hcy水平没有明显差别，男性各部位恶性肿瘤患者几何均数在97.52～147.59μM/L之间，女性在104.62～137.66μM/L之间。组织类型间也未见到明显差异。现已了解, Hcy硫内酯可造成细胞增殖性改变，如纤维化、血管形成、胶原性炎症、钙化、血管内栓塞、鳞状上皮化增生、伴有角质化及上皮不典型增生。
   
　　Hcy升高说明肿瘤患者体内可能存在蛋氨酸循环受阻，从Hcy的代谢途径分析，Hcy升高的原因与叶酸的缺乏有关。有报道证实叶酸缺乏亦可引起基因组甲基化程度降低,且叶酸水平与子宫上皮内肿瘤患者基因组甲基化程度明显相关[14]。叶酸缺乏引起的基因组甲基化程度降低在叶酸缺乏纠正后可逆转。
   
　　在癌症患者中局部或全身的新陈代谢的改变总是存在的，致癌作用与生物化学紊乱有关，并且常常是非特异性的，此过程可能促进或诱导肿瘤形成过程。新陈代谢的分析可能是一种了解肿瘤生物化学有价值的方法，也可为认证新的肿瘤目标的方法。Sun CF等用肿瘤细胞和正常细胞培养测定培养液中培养细胞释放Hcy含量的方法进行了研究，结果表明Hcy随肿瘤细胞的增加而上升，培养7d后细胞开始死亡，Hcy随之下降。血清中tHcy水平可作为恶性肿瘤的标志物[15]。我们的研究结果也支持这一观点。在排除心脑血管疾病和糖尿病之后，其诊断恶性肿瘤的敏感性和特异性均较高。

【】
  　　［1］ 赵如冰，李勇，陈星. 同型半胱氨酸对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响[J]. 卫生研究, 2001,30（1）:34?36.

　　[2] 李勇，陈星，赵新荣，等. 同型半胱氨酸致细胞凋亡与畸胎发生的关系［J］. 卫生研究, 1999, 28（5）:275?278．

　　[3] Avila MS, Berasain C, Torres L, et al. Reduced mRNA abundance of the main enzymes involved in methionine metabolism in human liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma［J］. J Hepatol, 2000, 33（6）: 907?914.

　　[4] Zhang SM, Willett WC, Selhub J, et al. Plasma folate, vitamin B6, vitamin B12, homocysteine, and risk of breast cancer［J］. J Natl Cancer Inst， 2003, 95(5):373?380.

　　[5] Almadori G, Bussu F, Galli J, et al. Giardina B Serum folate and homocysteine levels in head and neck squamous cell carcinoma［J］. Cancer， 2002, 94(4):1006?1011．

　　[6] Weinstein SJ, Ziegler RG, Selhub J, et al. Elevated serum homocysteine levels and increased risk of invasive cervical cancer in US women［J］. Cancer Causes Control， 2001，12(4):317?324.

　　[7] Vollset SE, Refsum H, Tverdal A, et al. Plasma total homocysteine and cardiovascular and noncardiovascular mortality: the Hordaland Homocysteine Study［J］. Am J Clin Nutr， 2001,74(1):130?136.

　　[8] Yuying Tan, Li Tang, Xinghua Sun. et al. Total?Homocysteine Enzymatic Assay［J］． Clin. Chem, 2000，46:1686?1688.

　　[9] Y Tan, X Sun, L Tang. et al. Automated Enzymatic Assay for Homocysteine［J］. Clin Chem, 2003， 49(6): 1029?1030.

　　[10]崔连奇,张新,张永生,等. 不同喂酒量对大鼠血浆同型半胱氨酸的影响[J]. 慢性病预防与控制, 2001,9(6):245?246．

　　[1１]Mennen LI, de Courcy GP, Guilland JC, et al. Relation between homocysteine concentrations and the consumption of different types of alcoholic beverages: the French Supplementation with Antioxidant Vitamins and Minerals Study［J］. Am J Clin Nutr， 2003， 78(2):334?338.

　　[1２]Schlienger JL. Homocysteine and alcohol consumption. An ambiguous relationship and a new paradox［J］. Presse Med， 2003，32(6):262?267.

　　[1３]Weinstein SJ, Gridley G, Harty LC, et al. Folate intake, serum homocysteine and methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T genotype are not associated with oral cancer risk in Puerto Rico［J］. J Nutr， 2002， 132(4):762?767.

　　[1４]Weinstein SJ, Ziegler RG, Selhub J, et al. Elevated serum homocysteine levels and increased risk of invasive cervical cancer in US women［J］. Cancer Causes Control， 2001，12(4):317?324.

　　[1５]Wu LL, Wu JT. Hyperhomocysteinemia is a risk factor for cancer and a new potential tumor marker［J］. Clin Chim Acta， 2002,322(1?2):21?28.