功能性消化不良患者脂肪餐前后血浆胆囊收缩素水平的变化
作者：徐焕海 陈淑洁 王良静 姒健敏
【摘要】 目的 探讨功能性消化不良(Functional dyspepsia, FD)患者脂肪餐前后血浆胆囊收缩素（Cholecystokinin, CCK）水平的变化及其在FD发病中的可能作用。方法 对21例FD患者与10例健康对照者用放免法检测其脂肪餐前后血浆胆囊收缩素水平的变化。结果 对照组脂肪餐后0.5h，1.0h，1.5h血浆CCK水平较空腹显著增高（P<0.05）；FD组脂肪餐后1.0h，1.5hCCK水平较空腹明显升高（P<0.05）；对照组血浆CCK水平在脂肪餐后呈直线上升趋势，在餐后1.0至1.5小时达到高峰，并且开始下降；而FD组脂肪餐后呈缓慢上升趋势，在餐后0.5至1.0小时CCK水平开始上升，并在1.0至1.5小时仍持续一定水平不下降；FD组的空腹CCK水平较对照组显著增高（P<0.05）。结论 功能性消化不良患者空腹血浆CCK分泌增多，并存在血浆CCK脂肪餐后分泌曲线的异常。CCK水平变化可能与功能性消化不良发生机制有关。
【关键词】 功能性消化不良 胆囊收缩素
【Abstract】Objective To detect the change of the level of plasma CCK before and after fatty diet test, and to illuminate the possible mechanism of dyspepsia in patients with functional dyspepsia (FD ). Methods In FD group , the 21 patients all met with Rome II diagnostic criteria of FD. 10 healthy patients were included in group N as control .After fatty-meal test ,the plasma CCK at 0h, 0.5h，1h and 1.5h was assayed respectively by the way of radioimmunoassay. Results In group N, the level of CCK at 0.5h，1h and 1.5h after fatty-meal test was significantly higher than that in 0h after fatty-meal test（P<0.05）. In group FD the level of CCK at 1h and 1.5h after fatty-meal test was significantly higher than that at 0h after fatty-meal test（P<0.05）. The level of CCK pre-meal in group FD was significantly higher than that in group N (P<0.05), meanwhile there was no significant difference among the groups after fatty-meal test at 0.5h，1h and 1.5h respectively (P>0.05). The curve of CCK in group N reached the peak level at 1.0h and dropped down within 1.5h. Meanwhile, the level of CCK in group FD raised slowly even after 1.5 hours by fatty-meal test. Conclusions The levels of plasma CCK pre-meal is raised in FD patients . And the curve of secretion of CCK after fatty-meal is abnormal. The change of secretion of CCK may play a role on dyspepsia.
【Key words】functional dyspepsia (FD ) Cholecystokinin
功能性消化不良( FD) 是临床比较常见的一种症候群，目前其病因和发病机理尚未清楚。我们用放免法检测了21例FD患者与10例健康对照者，脂肪餐前后，血浆胆囊收缩素(CCK)水平，探讨FD患者脂肪餐前后血浆CCK水平的变化及其在FD发病中的可能作用。
1 对象与方法
1.1 一般资料
(1)健康对照组（即N组）：选自本院实习医生和工作人员10例。无慢性胃病史及上消化道症状；胃镜排除上消化道溃疡、糜烂、肿瘤和反流性食管炎等疾病；肝胆胰B超及血生化排除肝胆胰等器质性疾病；无糖尿病等全身性疾病；无烟酒史；近两周无服药史。其中男4例，女6例，平均年龄为(37.3±9.89)岁。(2)功能性消化不良组(即FD组)：均为符合罗马ⅡFD诊断标准的本院门诊患者，共21例。剔除胃镜发现上消化道溃疡、肿瘤和反流性食管炎等疾病；肝胆胰B超及血生化检查发现肝胆胰等器质性疾病；无糖尿病等全身性疾病；无烟酒史；近两周无服药史。其中男8例，女13例，平均年龄为(33.9±8.25)岁。
1.2 方法
(1)脂肪餐试验和血浆取样：
所有患者和健康志愿者检测前一天晚8点后禁食禁水。空腹抽静脉血后，进标准脂肪餐（5min吃完油煎鸡蛋2只+250ml光明特浓纯牛奶，共含脂肪45g、蛋白23g，含热量2291 kj），每间隔30min即0h，0.5h，1h和1.5h各抽静脉血2ml，置入10ml含30μl 10%EDTA二钠和30μl抑肽酶的试管中混匀，4℃下离心10min，取血浆存放在-20℃冰箱。
(2)放射免疫法检测血浆CCK水平：
购置CCK试剂盒（英国皇家医学院内分泌部免费提供）和Sep-Pak C-18柱（美国Waters inc. Massachusetts公司提供），按试剂盒说明书步骤进行检测。
血浆标本过柱： 取0.5ml血浆和0.5ml含1%的TFA混匀离心取上清液；在含60%乙晴溶液中加入1%TFA（缓冲液A）即为缓冲液B；上清液注入Sep-Pak C-18柱；分别用缓冲液A5ml和缓冲液B3ml淋洗Sep-Pak C-18柱；淋洗液装瓶，-42(C冷冻干燥备用。
血浆CCK水平测定：用500μl 0.05M Ph 7.4的磷酸盐缓冲液溶解淋洗液，振荡3min后，取样200μl；加九种不同浓度的CCK标准品（0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、23.0、64.0和128.0 pmol/L）各100μl，另一管加缓冲液100ul，以上各管均加CCK抗体100μl，并设不加CCK抗体的空白管；摇匀后4℃孵育24h；加入125I-CCK100 μl后4℃孵育48h；除空白管外均加入分离剂（二抗）500 μl混匀，室温下放置20min，离心后去上清液；γ-放射免疫计数器测定CCK浓度 (pmol/L)。1.3 统计学处理 全部资料录入SPSS 10.0统计包。计量资料以(x±s)表示，两组比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性。
2 结果
两组空腹和脂餐试验后CCK水平变化及相关曲线见表1和图1。从表1可见N组脂餐后0.5h，1.0h和1.5h CCK水平较空腹显著增高（P<0.05）；FD组脂餐后1.0h和1.5h CCK水平亦较空腹明显升高（P<0.05）。而且FD组的空腹CCK水平较N组显著升高（P<0.05），而脂餐后0.5 h、1.0h和1.5h CCK水平两组比较无显著性差异（P>0.05）。表1 FD组与健康志愿者组脂餐前后血浆CCK水平（略）注：N健康志愿者，FD 功能性消化不良, 各组脂餐前后比较，*P<0.05；与N组比较，#P<0.01
从图1各组空腹和脂餐后0.5h，1.0h和1.5h血浆CCK水平的变化趋势发现：N组血浆CCK水平在脂肪餐后1.0h达到高峰，1.5h后开始下降。而FD组患者CCK水平在脂餐后1.5h内呈缓慢上升趋势。
3 讨论
消化不良是一组表现为持续或反复发作的上腹痛、上腹不适、早饱、饱胀、和恶心等症状的临床症候群。消化不良在临床上很常见，各国报道患病率在20％～40%之间［１］。功能性消化不良（functional dyspepsia, FD）是指经现有检查未能显示消化系统结构上的明显异常，或是有轻微改变但难以用这些表现来解释其症状。国际上罗马Ⅱ标准推荐的FD的定义为：在12个月内症状至少存在12周，症状不必持续存在。持续或反复存在的消化不良（位于中上腹部的疼痛或不适），不存在可以解释其症状的器质性疾病的证据（包括进行上消化道内镜检查），没有证据表明消化不良的症状能通过排便消除，或与排便的频率或大便性状的改变相关［２］。但目前其病因和发病机制尚未明确，可能包括：（１）胃肠动力和感觉异常；（２）精神心理障碍；（３）幽门螺杆菌（H.pylori）感染；（４）神经系统功能异常；（５）胃肠肽类激素等。目前认为可能与FD有关的胃肠肽类激素有胆囊收缩素（Cholecystokinin）、生长抑素（somatostatin）、胃动素（motilin）等。胆囊收缩素是由小肠的I细胞合成分泌的多肽激素，其主要作用为刺激胰酶合成和分泌，同时有减慢胃排空和收缩胆囊促进胆汁分泌的作用［３］。而CCK分泌的刺激因子包括肠腔中的脂肪、蛋白质和氨基酸等；在它们的作用下CCK-释放肽使I细胞合成分泌CCK增加，进而使胰酶合成和分泌增加、胆汁分泌增加，而胰酶又使CCK-释放肽失活，从而反馈性地抑制CCK的释放［３］。最近报道FD患者存在脂肪刺激CCK分泌增加，从而导致胃的动力和排空作用下降，是导致FD腹胀、早饱等的重要机制［４］。现在已有CCK-A受体拮抗剂用于FD的临床研究［５］。目前国内外有较多研究从功能性消化不良患者的胃肠激素水平变化来探究其可能的病因和发病机制，但就CCK水平动态变化与功能性消化不良关系的研究报道较少。由于大多数研究只检测患者空腹和（或）餐后1 h的血浆CCK水平，结果相差较大［６，７］。本研究检测FD患者在空腹和脂餐试验后0.5h，1.0h 和1.5h血浆CCK水平的动态变化，并与健康志愿者作比较，结果发现FD组患者的空腹血浆CCK水平较健康志愿者显著升高。有研究认为FD患者症状与CCK水平上升有关， 因为CCK通过舒张近端胃和提高幽门括约肌张力以及改变胃排空模式，抑制胃排空作用［８］。而CCK的增加抑制了胃排空从而导致消化不良症状的出现。本研究的结果同样支持这一观点，可以认为功能性消化不良患者的血浆CCK水平的升高与消化不良的发生有关。同时从脂餐试验后0.5 h、1.0 h和1.5 h血浆CCK水平的动态分析发现功能性消化不良患者有餐后CCK分泌曲线发生改变：健康人血浆CCK水平在脂肪餐后呈直线上升趋势，并在餐后1.0至1.5h达到高峰，1.5h后开始下降，与国外相关报道相符［９］。而FD组脂肪餐后呈上升缓慢，在餐后0.5h至1.0h CCK水平开始上升，并在1.0至1.5h仍持续一定水平不下降；功能性消化不良患者餐后CCK分泌曲线的异常，可能与患者胃动力及排空作用下降导致脂肪缓慢进入小肠，缓慢刺激I细胞合成分泌CCK，从而使CCK缓慢升高并持续低水平有关。
【文献】
1 Tygat GNJ, Noach LA, Rauws EAJ. Definition of dyspepsia. Scand J Gastroenterol，1991， 26(suppl 82):1～74.
2 Talley NJ, Stanghellini V, Heading RC, et al. Functional gastroduodenal disorder .Gut，1999， 45（suppl 2）Ⅱ37～42.
3 萧树东，主编. 江绍基胃肠病学. 上海：上海技术出版社. 2001.67．
4 Fried M, Feinle C.The role of fat and cholecystokinin in functional dyspepsia. Gut，2002，51(1):54～57.
5 C Feninle，O Meier，B Otto，et al.Role of duodenal lipid and cholecystokinin A recceptors in the pathophisiology of functional dyspepsia. Gut，2001，48:347～355.
6 杜伟华，张振书，张万岱.功能性消化不良患者体表胃电变化与血浆胃肠激素的关系及临床意义. 广东医学，2000，21：99～101.
7 孙晓宁，刘晓梅，刘均平. 功能性消化不良患者胆囊排空及激素水平的研究. 中华消化杂志，2001， 21：356～359.
8 Schwizer W ，Borovicka J，Kunz P，et al. Role of cholecystokinin in the regulation of liquid gastric emptying and gastric motility in humans：studies with the CCK antagonist loxiglumide. Gut，1997， 41：500～504.
9 Jens FR. Accurate measurement of cholecystokinin in plasma. Clin Chem 1998， 44：991～1001.
