泽桂癃爽胶囊对老年性及实验性大鼠前列腺增生的治疗作用
【关键词】 泽桂癃爽胶囊；睾酮；前列腺增生；大鼠交配能力
【Abstract】 Objective To investigate the change of blood serum and prostate testosterone on rat and the relationship with benign prostatic hyperplasia .To discuss the effect of Zegui Longshuang Capsules on prostate weight of rat， and test testosterone of serum and prostate.Methods Administering five groups elder male rat different drug， compare between the elder and mature. Serum and prostate testosterone were measured using radioimmunoassay. Observe the mating ability of corresponding female rat. Administer mature rat with five groups same as above， meanwhile SC propyl-testosterone，administer propyl-testosterone only on model，determine the level of prostate weight， observe if Zegui Longshuang Capsules can increase the sex ability on model rat which has hyperplasia of prostate caused by propyl-testosterone.Results Compared with elder control group， the prostate weight and viscera coefficient on high， mid dose of elder rat changed significantly after 21 days administration. The prostate weight and viscera coefficient has significant difference between elder and younger control group. The blood serum and prostate testosterone of elder group has significant difference from the younger. The level of blood serum testosterone and prostate testosterone of high dose of Zegui Longshuang Capsules has significant difference separately from control group. After SC administration of propyl-testosterone， the prostate， viscera coefficient of high and mid dose of Zegui Longshuang Capsules on younger group changed significantly compared with younger control group.Conclusion High dose of Zegui Longshuang Capsules can restrain the hyperplasia of prostate caused by ages on elderly rat， restrain the hyperplasia of prostate caused by propyl-testosterone on younger rat and increased the sex ability of male rat.
【Key words】 Zegui Longshuang capsules；testosterone；prostatic hypertrophy；mating ability
良性前列腺增生(Benign Prostatic Hypertrophy， 简称BPH)是前列腺尿道周围区细胞的良性腺瘤性增生。前列腺增生又称前列腺肥大，是男性老年人的常见病、多发病。据统计，50岁以上的男性大约30%～50%的人有不同程度的前列腺增生；在70～79岁的男性老年人中，BPH的发病率为70%；80岁以上者，患病率高达90%～100%。BPH是男性老年人排尿困难的最常见原因［1，2］ 。然而目前BPH的各种措施［3］，如：药物治疗、微创治疗、手术治疗等，在解除前列腺梗阻，改善排尿症状的同时，也对性功能带来不同程度的影响。
泽桂癃爽胶囊处方由泽兰、皂角刺、肉桂三味药组成。具有行瘀散结、化气利水的功效，主要用于膀胱瘀阻型前列腺增生症。多年的临床应用发现，泽桂癃爽胶囊在改善患者下尿道综合征的同时，还能改善患者性功能质量［4］。本实验研究泽桂癃爽胶囊对增龄性前列腺增生、前列腺增生模型的治疗作用；探讨大鼠前列腺随年龄增加而增生以及与血液、前列腺内睾酮水平的关系；同时印证临床用药中发现的具有改善性功能生活质量作用这一现象。
1 材料及试剂
1.1 动物 Sprague-Dawley(SD)大鼠，雄性体重550±50g，由南京东南大学医学院实验动物中心提供；雄性体重250±20g，雌性大鼠体重220～250g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供。
1.2 药物及试剂 受试药物：泽桂癃爽胶囊，由江苏正大天晴药业股份有限公司提供，临用前用0.5%CMC-Na配制成所需浓度的混悬液。
阳性对照药物(1)：保列治（非那雄胺，finasteride）；由杭州默沙东制药有限公司分装；对照药物(2)：癃闭舒胶囊，由石家庄科迪药业有限公司生产。
丙酸睾丸素注射液、苯甲酸雌二醇注射液，上海通用药业股份有限公司生产；黄体酮注射液，浙江仙居制药股份有限公司生产；睾酮放射免疫试剂盒，天津九鼎医学生物工程有限公司。
1.3 仪器 XHF-1高速分散器（上海金达生化仪器厂），SUPER T21高速冷冻离心机(SORVALL公司，美国)，自动放免仪（科大中佳公司）。
2 方法
2.1 对正常老年大鼠血浆、前列腺组织中睾酮的影响及其交配试验 SD雄性大鼠60只，体重550±50g，随机分为6组，即老年对照组1组；受试药3组，分别给予泽桂癃爽0.9g/kg、0.3g/kg、0.1g/kg；阳性对照药2组，分别给予非那雄胺5mg/kg，癃闭舒0.6g/kg；成年大鼠对照1组，10只，体重250±20g；各组动物连续灌服给药21天。
健康雌性大鼠60只，体重220～250g，乙醚浅麻醉下摘除其双侧卵巢，术后连续3天肌注青霉素G钠20000U/kg，术后3周后用于实验。实验前48h皮下注射苯甲酸雌二醇20μg/只，前4h再皮下注射黄体酮500μg /只。各组雄性大鼠单独置于一笼中，5min后每笼投入1只按上述方法处理的雌鼠，观察以下指标：(1)雌鼠投入笼内后雄鼠第一次扑捉雌鼠的时间（扑捉潜伏期）；(2)自雌鼠投入20min内雄鼠扑捉雌鼠的次数；(3)20min内各组雄鼠发生射精的比率（射精率），检查阴栓确证雄鼠射精。然后自腹主动脉取血后分离血清，0℃保存备用。结束后处死动物，取出前列腺称重，按重量（mg）/原大鼠重量（g）比值。
取部分前列腺组织并剪碎，加入0.1mol/L磷酸缓冲液匀浆，匀浆液离心，吸取上清液备用。测定其血清、前列腺组织中睾酮，按天津九鼎医学生物工程有限公司放免试剂盒使用说明书测定。取材后多余的前列腺组织用福尔马林固定，进行病检查。
2.2 前列腺增生模型制备及其成年大鼠交配实验 成年雄性大鼠60只，体重250±20g，随机分成6组。其中模型对照组sc丙睾5mg/kg；受试药组分别ig泽桂癃爽0.9、0.3、0.1g/kg，同时sc丙睾5mg/kg；阳性对照药2组，分别ig非那雄胺5mg/kg、癃闭舒0.6g/kg，同时sc丙睾5mg/kg；连续造模与灌胃给药21天。结束后处死动物，剖检前列腺称重，计算比值，并用福尔马林固定，进行病理学检查。
2.3 统计学处理 实验数据均以平均值±标准差表示。均数的组间比较均应用student’s检验。
3 结果
3.1 对正常生理状态下老年大鼠前列腺重量及前列腺组织、血清中睾酮的影响见表1。
表1 老年大鼠前列腺脏器系数及血清、前列腺睾酮浓度 （x±s，n=10）
注：与老年对照组比较，*P<0.05，，**P<0.01；与成年对照组比较，##P<0.01，###P<0.001
镜检前列腺组织显示，与成年组相比老年组大鼠前列腺腺泡体积增大，腺上皮细胞增生明显；而泽桂癃爽高、中剂量组、保列治组腺体明显减少，腺上皮细胞的增生程度有所减轻。
3.2 成年大鼠连续造模和给药后的相关参数 如表2。
给药后(见表2)模型组前列腺重量、脏器系数与对照组相比差异有极显著性（P<0.01）。泽桂高、中剂量组前列腺重量，前列腺脏器系数与模型组相比差异有显著性(P<0.05)。保列治组前列腺脏器系数和模型组比较差异有显著性。
3.3 大鼠行为学实验结果 见表3。
表2 成年大鼠前列腺及脏器系数 （x±s，n=10）
注：与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01；与对照组比较，##P<0.01，###P<0.001
表3 各给药组对老年大鼠交配能力的影响 （x±s，n=10）
注：与老年对照组比较，*P<0.05
表3结果显示老年大鼠组泽桂癃爽高剂量可显著缩短大鼠的扑捉潜伏期，增加扑捉次数；提高射精率，表明泽桂癃爽对雄性大鼠的交配能力有促进作用。中剂量组也有促进趋势，而保列治组有抑制雄性大鼠交配能力的趋势。
4 讨论
BPH是与年龄和性激素相关的老年男性常见病。前列腺是雄激素依赖性器官，其正常的结构与功能的维持依赖于雄激素的调节。去势动物的前列腺明显萎缩，给予外源性的睾酮可使其恢复到正常大小，而不引起过度增生［5］。睾丸间质细胞合成并分泌睾酮，促使男性性征和生殖器发育并维持精子生成，其作用受到下丘脑和垂体的调控，下丘脑-垂体-睾丸间质细胞轴之间存在着反馈性联系。随着机体趋向衰老，下丘脑对垂体的作用降低，垂体对睾丸间质细胞的作用也降低，这主要表现在垂体释放的间质细胞刺激素(ICSH)的生物活性被降低了(此时，血清中ICSH浓度是升高的)，睾丸间质细胞接受的分泌刺激作用减少，睾丸间质细胞分泌睾酮量也减少了［6］。
Wilson等［7］研究发现BPH是睾酮水平下降后引起一系列内分泌内环境改变的结果，使已有小结节储备的前列腺进入结节肥大期，导致了临床上的前列腺增生症。陈善明等［8］研究对比了年轻对照组与40岁以上男性的血清睾酮含量，发现血清睾酮水平随增龄进行性下降，两者间呈极为显著的负相关关系(ｒ=-0.45，P<0.0001)；前列腺体积与血清睾酮含量的相关检验得出，前列腺体积随血清睾酮含量下降而增大，二者间呈明显的负相关关系（γ=-0.224，P<0.0001）。应俊等［9］研究也发献随着年龄的增长，血清中的睾酮、游离睾酮、双氢睾酮的浓度逐渐递降。
中老年男性随年龄的增长，发生睾丸对促性腺激素的反应能力下降，睾丸血流量降低，血清睾酮（T）水平呈下降趋势。研究表明［10］，前列腺的生长主要与前列腺内的雄激素浓度相关，而与血清雄激素无直接相关关系，这可能也是为什么老年人血清睾酮水平降低却出现BPH的原因之一［11］。
本实验研究了在生理状态下老年大鼠和成年大鼠血清睾酮含量，老年对照组血清睾酮比成年大鼠组显著降低，并且老年对照组前列腺脏器系数显著高于成年对照组，实验结果与上述研究结果相似。BPH的发病可能与血清睾酮含量的下降有一定关系，但如何发挥作用尚须进一步探讨。
从表1可看出正常生理状态下老年组大鼠前列腺的重量比成年对照组明显增加，前列腺脏器系数与成年对照组比较差异非常显著（P<0.001）。比较老年对照组和成年对照组生理状态下前列腺T浓度发现，老年大鼠前列腺中T浓度显著高于成年组大鼠（P<0.01），血清中T显著低于成年组（P<0.01）。泽桂高剂量组血清T、前列腺中T以及泽桂中剂量组、保列治组前列腺中T与老年对照组相比差异非常显著（P<0.01）。初步认为老年动物前列腺的增生可能与前列腺内睾酮含量增高有关。
血清睾酮水平降低，可引起体力下降，性欲降低，勃起功能障碍和心情抑郁等症状。从本实验的研究发现泽桂癃爽胶囊提高大鼠生理条件下血清中的睾酮浓度，从实验结果来看可以相应的提高雄性大鼠的交配能力（泽桂高剂量组，P<0.05）。同时降低前列腺中的睾酮含量，而减轻前列腺的增生症状。泽桂癃爽能使大鼠血清睾酮水平增加，是否是通过相应的器官反应来实现，有待进一步的研究。
BPH从临床表现来看，似属于中医“癃闭”范畴，其病机为肾气虚弱，痰瘀内结，使气化失职，水道不利，并认为气滞血瘀为本病的关键所在。近年来BPH的药物日渐增多，泽桂癃爽胶囊不同于其他前列腺疾病治疗药物，其中肉桂，辛、甘，大热，归肾、脾、心、肝经；具有温肾助阳改善患者盆底组织血液循环、提高机体免疫力的作用。本实验在理论上初步探讨了泽桂癃爽胶囊对老年大鼠正常生理条件下血清、前列腺中睾酮含量的影响，对临床应用中改善性生活质量的这一现象做了初步印证。睾酮、血清、前列腺三者之间的关系国内外学者看法众口不一，其机制有待于进一步研究。
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