甜荞麦叶总黄酮降糖、降脂作用及机制

【关键词】  荞麦叶总黄酮

　　Effects and mechanism of total flavones of buckwheat leaf in lowering serum glucose and lipid

　　【Abstract】 AIM: To study the effects and mechanism of total flavones of buckwheat leaf (TFBL) in lowering serum glucose, lipid and antilipid peroxidation in diabetic and hyperlipidemia rats.  METHODS:  The diabetic and hyperlipid model of rats were established by streptozotocin and high lipid feed. The levels of serum glucose, TC, TG, insulin, MDA, SOD and insulin receptor of liver were detected after TFBL was administered orally with the dose of 0.2, 0.4 and 0.8 g・kg-1 for 12 wk. RESULTS: TFBL obviously decreased the serum glucose, TG and LDLc (P<0.01), increased HDLc (P<0.01), enhanced both the insulin sensitivity index and the combination of insulin with receptor, and improved the glucose tolerance. TFBL also obviously lowered the content of MDA (P<0.01) and improved the SOD activity in blood. CONCLUSION:  TFBL has the effects of reducing serum glucose, lipid, MDA, antilipid peroxidation and increasing the insulin receptor quantity and/or sensitivity.

　　【Keywords】 total flavones of buckwheat leaf; diabetic; hyperlipidemia;  serum  glucose; serum  lipid; lipid  peroxides

　　【摘要】 目的: 研究荞麦叶总黄酮（TFBL）对实验性糖尿病高脂血症大鼠的降血糖、血脂作用及其机制. 方法: 用链脲佐菌素和高脂饲料诱发大鼠糖尿病和高脂血症，以TFBL口服12 wk，剂量分别为0.2, 0.4和0.8 g・kg-1. 实验结束时检测空腹血糖（FBG）、糖耐量(OGTT), TC, TG, LDLC, HDLC, 胰岛素（INS）、血清和肝组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶(SOD)及肝细胞膜胰岛素受体结合力. 结果: TFBL能降低血中FBG， TG， LDLC（P<0.01），升高HDLC（P<0.01），改善OGTT，增加胰岛素敏感指数（ISI）和胰岛素与受体的结合力，存在剂量依赖性. 同时TFBL能降低血清和肝组织中MDA含量（P<0.01），增加血清SOD活力. 结论: TFBL具有良好的降血糖、调血脂、增加胰岛素与受体结合力和敏感性及抗脂质过氧化作用.

　　【关键词】 荞麦叶总黄酮； 糖尿病； 高脂血症；血糖；血脂；脂质过氧化

　　0引言

　　糖尿病（DM）高脂血症的发病率呈逐年上升趋势并严重危害人类健康. 因此，研究和开发防治DM及并发症的药物越来越受到人们重视，特别是从中草药中寻找有效防治糖尿病高脂血症及并发症的药物倍受人们关注. 荞麦为蓼科本草植物, 其全草含较高的黄酮类化合物. 流行病学研究表明荞麦产区人群血糖、血脂水平低于非荞麦产区. 国外学者研究发现荞麦种子提取物具有降糖、降脂、抗氧化及抑制血小板聚集等活性［1,2］. 荞麦叶总黄酮(total flavones of buchwheat leaf, TFBL)主要含有芦丁、槲皮素，但荞麦叶总黄酮和纯度明显高于种子. 目前对荞麦种子研究报道较多，对荞麦叶研究鲜有报道，而用荞麦叶总黄酮研究降糖、降血脂作用机制目前未见. 我们前期研究了荞麦种子总黄酮具有降糖、降脂、抗氧化等活性［3］. 在前期工作基础上，用TBFL观察了对实验性糖尿病高脂血症大鼠的治疗作用，探讨其降血糖和调血脂的可能机制.

　　1材料和方法

　　1.1材料①动物: SD大鼠，体质量（220±20） g，雌雄各半（北京医学院实验动物研究所提供），合格证号为SCXK11000006. ②药品与试剂: 荞麦叶为甜荞麦种子收割后干燥的叶（来自内蒙古库伦旗），用10倍量的700 mL・L-1乙醇回流提取3次，合并提取液，用旋转蒸发器回收乙醇并浓缩原液量的1/2，提取液趁热过滤去除不容性沉淀，加分离剂冷却析出淡黄色结晶，离心，沉淀物经70℃烤干即为TFBL（经中国科学院药物研究所鉴定为黄酮类，总黄酮含量为98 g・L-1）. 链脲佐菌素、四乙氧基丙烷和硫代巴比妥酸（Sigma公司），格列苯脲（HB419,苏州长征制药厂），胆固醇（进口，广州化学试剂分公司分装），胆酸钠（进口，上海化学试剂站分装），血糖和血脂试剂（宝灵曼公司），SOD和MDA试剂（南京建成生物研究所）. 胰岛素放免试剂盒和同位素标记胰岛素（为北京北方生物技术研究所提供），其他试剂为国产分析纯. ③仪器: FT630G型微机多探头放免仪（北京核仪器厂），TGL16型冷冻低温离心机（上海安亭科学仪器厂），日立7150全自动生化分析仪（日本），722型分光光度仪（北京）. 日立850荧光分光光度仪（日本）.

　　1.2方法

　　1.2.1大鼠糖尿病高脂血症模型［4］大鼠60只，按体质量随机分6组，每组10只. ①组为正常对照组：喂基础饲料. ②～⑥组为糖尿病高脂模型组，方法为大鼠均禁食16 h，腹腔注射链脲佐菌素50 mg・kg-1，1 wk后以同样方法再注射1次，同时喂高脂饲料（组成质量分数：81%基础饲料，2%胆固醇，10%猪油，5%蛋黄，0.5%胆酸钠，0.1%丙硫氧嘧啶，2%氯化钠），②组为实验对照组. ③～⑤为TFBL治疗组（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ），分别灌胃0.2, 0.4和0.8 g・kg-1. ⑥为阳性对照药HB419组，给药量为灌胃0.001 g・kg-1.  ①和②组同时灌胃等容积常用水,上述各组均每日给药1次，连续12 wk.

　　1.2.2检测指标末次给药后禁食12 h，取尾静脉血测空腹血糖（葡萄糖氧化酶法）. 用口服葡萄糖测OGTT：灌胃葡萄糖1.5 g・kg-1后，0, 30, 60和120 min各尾静脉取血测血糖值，以OGTT（曲线下面积）表示（灌胃葡萄糖后血糖时间曲线下面积）. 再6 h后乙醚麻醉，颈动脉取血，分离血清. 按试剂盒要求测定TC，TG，HDLC，LDLC，INS，MDA和SOD. 按公式AI=(TC-HDL-C)/HDL-C动脉粥样硬化指数（AI）［3］，以Ln(INS.GBF)表示INS敏感指数(ISI). 取血后迅速取肝脏，以四乙氧基丙烷为标准，按［3］测定MDA和SOD. 用放免法按文献［5］方法测定肝细胞膜胰岛素受体，以Bq值表示胰岛素与膜受体的结合力.