药用植物中九种有机氯农药残留的检测
作者：仲婧宇，陈智生，刘睿娜，邢义满
【摘要】 参照国家标准GB/T5009.162-2003《动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定》，用GC-ECD气相色谱法对甘草、丹参、黄芪和白芍等药用植物中五氯硝基苯（PCNB）、六六六（HCH）和滴滴涕（DDT）等9种有机氯农药残留进行了检验。确认了毛细柱OV-101方法中PCNB与HCH的未能分离的某个组分；确认了毛细柱DB-1701用于PCNB、HCH和DDT九种组分检测方法的可行性。
【关键词】 气相色谱；有机氯农药残留；五氯硝基苯（PCNB）；六六六（HCH）；滴滴涕（DDT）；检测
【Abstract】 According to standard GB/T5009.162-2003 derermination of organochlorine and pyrethroid pesticides multiresidues in aninmal foods , PCNB,α-HCH, β-HCH, γ-HCH , δ-HCH,ρ,ρ’-DDE,ο,ρ’-DDT,ρ,ρ’-DDD, ρ,ρ’-DDT, in medical herbs, such as Licorice root ,Salvia miltiorrhiza ,Astragalus membranaceus and Paeonia lactiflora , were inspected with GC-ECD. That PCNB can’t be separated from α-HCH, β-HCH, γ-HCH or δ-HCH in the chromatographic graph with capillary column OV-101 is verified. The determination methord of PCNB、α-HCH, β-HCH, γ-HCH ,δ-HCH , ρ,ρ’-DDE ,ο,ρ’-DDT,ρ,ρ’-DDD ,ρ,ρ’-DDT, with capillary column DB-1701 was feasible.
【Key words】 gas chromatography;organochlorine pesticide residues;PCNB, HCH;DDT;determination
五氯硝基苯（PCNB）、六六六（HCH）和滴滴涕（DDT）九种组分是药物性植物中有机氯农药残留必检项目。图1是国家标准GB/T5009.162-2003《动物性食品中有机氯农药残留测定》标准谱图，采用GC-ECD气相色谱法检测多组分有机氯农药残留，色谱柱为OV-101（30m×0.32mm×0.25μm）玻璃毛细柱。发现谱图上PCNB组分与HCH的4个组分混合在一起，5个组分只有4个峰，显然PCNB组分与HCH的某个组分未能分离。笔者选用毛细柱DB-1701用于PCNB、HCH和DDT九种组分的检验，分离效果显著。
1 实验
1.1 主要仪器 福立GC-9790 气相色谱仪（ECD）；HY-4电动振荡器；RE-52AA 旋转蒸发器；HGC-12A 氮吹仪；LDS-2 高速离心机。
1.2 试剂 石油醚（60～90℃）；丙酮（分析纯）；二氯甲烷（分析纯）；九种农药标准样品100μg/ml（农业部环保检测所）。
1.3 标准溶液配制 石油醚为溶剂配制标准使用液的浓度（μg/ml）：HCNB 为0.1μg/ml ；α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH各为0.1μg/ml；ρ,ρ’-DDE、ο,ρ’-DDT、ρ,ρ’-DDD、ρ,ρ’-DDT各为0.2μg/ml。
1.4 试样处理 制备：试样60℃干燥4h，粉碎成细粉。精确称取2.00g，置于100ml具塞锥型瓶中，加水20ml浸泡过夜。
提取：加丙酮40ml，氯化钠约6g，二氯甲烷40ml，超声波处理30min。静置分层，将有机相移入装有无水硫酸钠（20g）的100ml具塞锥型瓶中，放置4h。量取提取液35ml，于40℃水浴减压浓缩至干。加少量石油醚，如前反复操作至丙酮及二氯甲烷除净。
净化：用少量石油醚溶解并转移至10ml刻度离心管中，加石油醚稀释定容至5ml，加浓硫酸1ml，离心（3000转/min）10min。
浓缩：量取上清液2ml，氮吹仪浓缩至1ml，留待进样。
1.5 色谱操作条件 （1）毛细柱OV-101 （ 30m×0.32mm× 0.25μm） 见图2。
1-α-六六六 （α-HCH） 2-β-六六六（β-HCH） 3-γ-六六六（γ-HCH） 4-五氯硝基苯PCNB（quintozene）
5-δ-六六六（δ-HCH） 6-七氯（heptachior） 7-艾氏剂（aldrin） 8-除螨酯（fenson）
9-环氧七氯（heptachior epoxide） 10-杀螨酯（chiorfenson） 11-狄氏剂（dieldrin） 12-ρ,ρ’-滴滴伊（ρ,ρ’-DDE）
13-ρ,ρ’-滴滴滴（ρ,ρ’-DDD） 14-ο,ρ-滴滴涕（ο,ρ’-DDT） 15-ρ,ρ’-滴滴涕（ρ,ρ’-DDT）
16-胺菊酯（phthalthrin） 17-氯菊酯（permethrin） 18-氯氰菊酯（cypermethrin）
19-α-氰戊菊酯（α-fenvalerate） 20-溴氰菊酯（deltamethrin）
COL： 225℃，（毛细柱DB-1701 30m×0.32mm× 0.25μm）
COL： 60℃（1/min）-（30℃/min） - 170℃ -（2℃/min）-240℃
INJ： 270℃，柱压 0.12MPa, 分流20ml/min，清洗3ml/min
DET ：300℃，尾吹20ml/min，电流 1nA， 量程“0”档。
（2）毛细柱DB-1701 （30m×0.32mm×0.25μm）见图3。
1-α-HCH 2-PCNB 3-β-HCH 4-γ-HCH 5-δ-HCH
6-ρ,ρ’-DDE 7-ο,ρ’-DDT 8-ρ,ρ’-DDD 9-ρ,ρ’-DDT
INJ： 240℃， 柱压 0.12MPa，分流20ml/min，清洗3ml/min
DET： 250℃， 尾吹30ml/min，电流 1nA， 量程“0”档
（3）毛细柱DB-1701 （30m×0.32mm×0.25μm）见图4。
COL： 160℃ - 10℃/min - 220℃ - 8℃/min - 250℃（10min）
INJ： 240℃，柱压 0.12MPa, 分流20ml/min，清洗3ml/min
DET： 250℃，尾吹20ml/min,电流 1nA，量程“0”档
1.6 测定 进样 0.5μl，保留时间定性，外标法峰高定量。
公式 X=Cx×V3×V1 m×V2×k
X—试样含量（mg/kg）
Cx—标样浓度（μg/ml）
m—试样质量（g）
K—试样提取液浓缩倍数
V1—试样溶液总体积（ml）
V2—试样提取液体积（ml）
V3—试样定容体积（ml）
2 实验结果
2.1 色谱图 图2可见PCNB与δ-HCH有相同的保留时间，即毛细柱OV-101不能分离这两个组分；图3可见PCNB与δ-HCH有不同的保留时间，即毛细柱DB-1701能分离这两个组分，用于9种有机氯农药检测效果理想；图4是毛细柱DB-1701程序升温工作方式，分离效果比恒温方式更好。
2.2 检测限 本方法（DB-1701恒温方式）的试样检测限（mg/kg）见表1。
1-α-HCH 2-PCNB 3-β-HCH 4-γ-HCH 5-δ-HCH
6-ρ,ρ’-DDE 7-ο,ρ’-DDT 8-ρ,ρ’-DDD 9-ρ,ρ’-DDT表1 试样检测限
3 结果结论
毛细柱DB-1701用于PCNB、HCH和DDT 9种组分的检测方法，明显优于毛细柱OV-101多组分有机氯农药残留检测方法。
该方法不仅可用于药物性植物中有机氯农药残留检测，也可以广泛用于其他食品中的有机氯农药残留检测。采用本方法，可缩短分析时间为10min。本方法既可恒温操作，也可以程序升温操作。手工进样时，更适合恒温操作。
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1 王绪卿.色谱在食品安全分析中的应用.北京：化学出版社，2005,51-53.
2 吴永宁.食品安全.北京：化学工业出版社，2003,91-124.
3 范正伟.色谱定性与定量.北京：化学工业出版社，2000,174-178.
4 国家药典委员会.中华人民共和国药典.北京：化学工业出版社，2003，附录IX Q.
