罗红霉素含量的荷移光谱法测定

【关键词】  罗红霉素 7 7 8 8?四氰基对二次甲基苯醌 荷移反应 分光光度法

    Spectrophotometric determination of roxithromycin

     ABSTRACT  The charge transfer interactions between roxithromycin and 7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane (TCNQ) were investigated by spectrophotometry. The apparent molar absorptivity of TCNQ complex is 1.57×104 L/(mol·cm) at 743nm, and 2.93×104 L/(mol·cm) at 844 nm; the result obeys Beers law in the concentration range of 0～55 mg/L. The relative standard deviation of the method is 1.0% (n=6). The composition of complex of roxithromycin with 7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane is 1∶2. This proposed method has been applied to the determination of roxithromycin in tablets with satisfactory results.

    KEY WORDS  Roxithromycin;  7,7,8,8?tetracyanoquinodimethane (TCNQ);  Charge?transfer reaction;  Spectrophotometry

     荷移反应是指由富和缺电子物质形成电荷转移络合物的反应，基于某些物质生成的荷移络合物具有特定的颜色、最大吸收波长等特性，可测定物质的含量。利用荷移光谱法可测定药物［1～9］、尼古丁［10］、有机溶剂中微量水［11，12］含量等，由于此法简便、快速，试剂稳定，重现性好，因此在药物分析上有广泛的应用前景。罗红霉素为大环内酯类抗生素，主要作用于革兰阳性菌、厌氧菌、衣原体等。目前测定罗红霉素的方法有效价法［13］、伏安法［14］、SP法［15］、HPLC法［16］等， 但未见报道以7，7，8，8?四氰基对二次甲基苯醌(TCNQ)为荷移试剂测定罗红霉素。本文应用分光光度法研究了TCNQ与罗红霉素的荷移反应，确定了利用该反应测定罗红霉素含量的分析方法，并成功地用于药物中罗红霉素含量的测定，与药典法对照，测定结果准确。

    1  实验部分

    1.1  主要试剂与仪器

    TCNQ(Sigma公司产品)丙酮溶液： 5.0×10-3mol/L；标准罗红霉素(罗红霉素对照品，购自药物生物制品检定所)：1.0×10-4mol/L丙酮溶液；甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等有机试剂均为分析纯。罗红霉素片(江苏恒瑞医药股份有限公司，批号05011251；江苏亚邦爱普森药业有限公司，批号0411129)。实验用水均为二次蒸馏水。

    UV?2401PC型紫外可见分光光度计(日本岛津)；HHS·21?Ni型恒温水浴(北京靖卫仪器厂)。

    1.2  实验方法

    准确移取一定量罗红霉素(1.0×10-4mol/L丙酮溶液)于10ml比色管中，加入5.0×10-3mol/L TCNQ丙酮溶液2.00ml。用丙酮稀释至刻度，摇匀后于30℃反应20min，冷却至室温，用对应试剂空白为参比，用1cm比色皿分别在743和842nm处测吸光度。

    2  结果与讨论

    2.1  罗红霉素吸收光谱

    按1.2实验方法配制溶液，以相应的试剂空白为参比，绘制吸收光谱。试验表明，罗红霉素与TCNQ形成的络合物分别在波长743、844nm处有两个吸收峰，试剂在此波长范围内吸收较小，罗红霉素在此波长范围内无吸收(Fig.1)。

    2.2  反应温度的影响

    分别在10℃～60℃恒温一定时间后测量荷移络合物的吸光度，研究温度对荷移反应的影响。试验表明，反应的最佳温度为30℃。

    2.3  反应时间的影响

    控制反应温度为30℃，分别选择反应时间为10～50min，测定溶液吸光度，研究反应时间对生成络合物的影响。试验表明，最佳时间为20min。络合物在室温下放置，120min内溶液的吸光度稳定。

    2.4  试剂用量的影响

    改变试剂用量，研究试剂用量对反应的影响。实验表明，随着试剂用量的增加，荷移络合物的吸光度增大，当试剂用量达到一定时，溶液的吸光度基本保持不变，说明荷移反应趋于完全。适宜试剂用量为2.00ml。

    2.5  溶剂的影响

    分别用甲醇、无水乙醇、丙酮、氯仿等作溶剂，研究溶剂对反应的影响。实验表明，以丙酮作溶剂为好，其荷移络合物吸光度最大且稳定。

    2.6  方法的重现性

    移取6份罗红霉素进行测定，测定结果的相对标准偏差为1.0%，说明方法重现性较好。

    2.7  络合物组成的测定

    应用等摩尔连续变化法和平衡移动法测得罗红霉素与TCNQ反应生成的荷移络合物的组成比均为1∶2(Fig.2，Fig.3)。

    2.8  反应机理

    TCNQ是缺电子试剂，罗红霉素是一种富电子物质，其氮原子上的孤对电子能够与7，7，8，8?四氰基对二次甲基苯醌形成n?π型荷移络合物，根据测得络合物组成比为1∶2，推测其形成机理见Fig.4。

    C (Roxithromycin)+(TCNQ)=1.0×10-3mol/L

    Fig.2    The determination of the comples formation by

    the continous variation method of equivalent mole

    C (Roxithromycin)=1.0×10-4mol/L;

    C (TCNQ)=1.0×10-3mol/L

    Fig.3    The determination of the comples formation by

    the equilibrium movement methodFig.4       

    2.9  标准曲线

    按实验确定的最佳条件配制溶液并进行反应，在各自的最大吸收波长下测定荷移络合物的吸光度，将测得的数据作统计处理，绘制工作曲线，得到回归方程及线性范围，结果见Tab.1。

    3  样品的测定

    3.1  样品的准备

    取不同厂家生产的罗红霉素各10片(标示量均为每片150mg)，精确称量后研磨混匀，然后准确称取总量的十分之一，用丙酮溶解，过滤，弃去不溶物。滤液于100ml容量瓶中定容备用。

    3.2  样品的测定

    取适量上述制备好的样品试液于10ml比色管中，按实验方法在λmax处进行测定，另按药典方法测定相同药物制剂含量，并用标准加入法作回收率实验。结果表明制剂中辅料对测定基本无影响(Tab.2)。

【】
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