HPLC法测定地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷元的含量
【摘要】 目的：建立地奥心血康的准确定量质控方法。方法：采用高效液相色谱法测定地奥心血康中主要成分薯蓣皂苷的含量。结果：地奥心血康中薯蓣皂苷进样量在0.165～3.389μg范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为98. 2%，RSD=1.7%。结论：该方法操作简单、方便、重现性好，用于控制地奥心血康的含量，可信度高。
【关键词】 地奥心血康 薯蓣皂苷元 含量测定
Determinating the content of diosgenin in Diao xinxuekang capsules by HPLC
【Abstract】Objective:To establish the accurate and controlled method in Diao xinxuekang by HPLC.Method:Determinating the content of diosgenin in Diao xinxuekang capsules by HPLC.Results:The linear range of diosgenin in Diao xinxuekang was 0.16～3.389μg，the average reconvery was 98.2%,RSD=1.7%.Conclusion:A simple and accurate method to diosgenin in Diao xinxuekang capsules was established.
【Key word】Diao xinxuekang capsules;diosgenin;content determination
地奥心血康胶囊具有活血化瘀、行气止痛、扩张冠脉血管、改善心肌缺血等作用。用于预防和冠心病、心绞痛以及瘀血内阻之胸痹、眩晕、气短、心悸、胸闷或痛 [1]；临床应用广泛，因地奥心血康胶囊中主要成分为薯蓣皂苷[2]，现行药典的含量测定方法准确性及重现性不高，我们改用高效液相色谱法，效果满意。
1 仪器及试药
日本岛津LC10ATvp高效液相色谱仪。薯蓣皂苷对照品（药品生物制品检定所，批号：1539-200001），甲醇为纯级纯，其余试剂均为分析纯，地奥心血康胶囊为吉林市第二人民提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充荆，色谱柱 Kromasil C18反相柱（5m 4.6 250mm），柱温35℃，色谱纯甲醇为流动相，检测波长210nm，流速0.6ml/min，理论板数按薯蓣皂苷元应不低于8000[3]。
2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取薯蓣皂苷元对照品适量，加色谱纯甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，即得。
2.1.2 供试品溶液的制备 取本品装量差异项下内容物混匀，取约1.6g，精密称定，置100ml磨口梨形瓶中，加2mol／L。盐酸溶液60ml，超声使结块溶解，100℃水浴水解1小时，取出立即冲凉，定量滤纸常压滤过，残渣加1％NaOH溶液60ml洗涤，再用水洗至中性，残渣连同滤纸105℃烘干，一并移入锥形瓶中，剪碎滤纸，加石油醚100ml。同时洗净剪刀，超声处理50分钟，较小滤纸常压滤过，残渣用少量石油醚洗涤，合并石油醚，回收石油醚至干，残渣加色谱纯甲醇超声助溶，定量转移至10ml量瓶中，加色谱纯甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml置10ml量瓶中，加色谱纯甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
2.1.3 测定法 分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.2 精密度测定
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取薯蓣皂苷元对照品10.1mg置10ml量瓶中，加色谱纯甲醇超声助溶并稀释至刻度，摇匀。
2.2.2 测定 测定条件同供试液的含量测定，将甲醇溶液及对照品溶液分别进样10μl，记录色谱图，归一法计算，纯度为98.8%。
纯度=3268987/3309641×100%=98.8%
2.3 方法学考察
2.3.1 标准曲线的制备 精密称取薯蓣皂苷元对照品（同前，纯度为98.8%）25.5mg，置10ml量瓶中，加色谱纯甲醇超声溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取0.25、0.5、1.0、2.0、4.0置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，照高效液相色谱法试验，分别吸取以上稀释液各10μl，注入液相色谱仪，记录相应的峰面积积分值，结果见表1。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，结果表明：进样量在0.637～10.20g范围内峰面积与进样量呈良好的线性关系。
表1 线性关系试验结果（略）(Table 1 linear relations test result)
经线性回归求得回归方程：A=3.35×105.C-4.23×103 =0.9998（A-峰面积积分值 C-进样量）
2.3.2 稳定性试验 含量测定项下供试液，室温放置，每隔一定时间进样10μl，测定薯蓣皂苷元峰面积积分值，结果见表2。
表2 供试液稳定性试验结果（略） （Table2 supplies the test result for the test solution stability）
结论：供试液室温放置24小时内结果稳定。
2.3.3 精密度试验 称取（050522）样品一份，按供试液制备方法制成供试液，按含量测定方法测定，连续进样5次，每次进样10μl，结果见表3。
表3 精密度试验结果（略）（Table 3 accuracy test result）
2.3.4 重现性实验 取本品内容物（020522）样品5份，按供试液制备方法制成供试液，按含量测定方法测定，结果见表4。
表4 重现性试验结果（略）(Table 4 reappearing test result)
2.3.5 加样回收率试验 分别精密称取本品内容物（020522）0.5g三份，1.2g两份，0.8g样品中分别加入薯蓣皂苷元对照品6.0mg、1.2g样品中分别加入薯蓣皂苷元对照品3.5mg，按供试液制备方法制成供试液，按含量测定方法测定，以下式回收率，结果见表5。
回收率=测得薯蓣皂苷元总量－制剂中薯蓣皂苷元量/添加薯蓣皂苷元对照品量×100%
表5 加样回收试验结果（略）（Table 5 the recovery test result added the type）
2.4 样品的含量测定
取十批供试品，按供试品制备方法制成供试液，按含量测定方法测定，以供试品峰面积积分值与对照品峰面积积分值计算，结果见表6。
表6 十批样品薯蓣皂苷元含量测定结果（略）（Table 6 10 batch of samples content determination result on diosgenin）
3 结论
用HPLC法控制地奥心血康的含量，操作简单，结果准确，重现性好，可信度高。
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[1] 国家药典委员会．中华人民共和国药典[M]．北京：化学出版社，2005：430．
[2] 吴立军，主编．天然药物化学[M]．第5版．北京：人民卫生出版社，2003，6：156．
[3] 赵陆华．高效液相色谱法分析中药成分手册[M]．北京：医药科技出版社，1994：637．
