中风膏对大鼠脑出血后脑系数、脑组织含水量的影响
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验药品中风膏为甘肃省中医院内制剂，由医院制剂室完成，批号：甘卫普制(1997)－098－04。配方：岷当归、川芎、赤芍、黄芪、水蛭、羌活、甘草。工艺：将岷当归精馏后，取当归药渣与川芎、赤芍、黄芪、水蛭、羌活、甘草混合，经水提、醇沉、过滤、浓缩后与当归精馏产生的挥发油混合，灭菌制成膏剂，成品包装。质量标准：中风膏为棕黑色稠厚的半流体，味微甜后转苦，加水后易溶解。每克相当于生药9 g（依据中华人民共和国药典2000年版）。脑心通胶囊由咸阳步长制药有限公司生产，国药准字Z20025001。
1.1.2 实验动物雄性SPF级SD大鼠100只，体质量（250±50）g，由甘肃中医学院科研实验中心提供。合格证号：SCXK(甘)2005－007－0001507。
1.1. 3 实验仪器电动台式牙科钻（由甘肃省中医医院提供）、江湾Ⅰ型-C立体定位仪（由兰州大学医学院中心实验室提供）、电热恒温干燥箱（101型，北京科伟永鑫实验仪器设备厂）、分析天平（MC，京制0000249号，北京赛多利斯仪器系统有限公司）、微量进样器。
1.2 方法
1.2.1 分组将100只大鼠随机分为4组：空白组10只；模型组30只；中风膏治疗组（简称治疗组）30只；脑心通胶囊治疗组（简称对照组）30只。模型组、治疗组、对照组再随机分为术后1 d，3 d，5 d 3个亚组，每组各10只大鼠。
1.2.2 模型复制参照Xue[2]和Yang[3]的方法制备大鼠ICH模型。大鼠称重后给予20 %乌拉坦 (0.75 g/kg)腹腔注射麻醉，脑立体定位仪定位大鼠右侧尾状核(前囟后0.2 mm，矢状缝向右旁开3.0 mm，深度6.0 mm)[4]；取血前将大鼠尾放在40 ℃温水中5 min，消毒后距末端0.5 cm处剪断，让鼠尾血滴下取血，用微量注射器取大鼠自体不凝血50 μL，在立体定位仪引导下向尾状核注入自体不凝血，按每分钟20 μL的速度缓慢匀速注入。注血结束留针5 min后缓慢退针，缝合切口，以上均按无菌操作进行。
1.2.3 处理空白组：普通饲养，自由饮水，不做任何处理；模型组：造模，生理盐水灌胃,剂量为40 mL/（kg·d）；治疗组：每日将中风膏以温开水调成混悬液灌胃(0.9 g/kg)，每毫升混悬液含中风膏0.05 g；对照组：每日将脑心通胶囊以温开水调成混悬液灌胃(0.324 g/kg)，每毫升混悬液含脑心通胶囊0.02 g。均在术后麻醉清醒后开始灌胃给药，每日上午、下午各1次。
1.2.4 标本采集断头处死后开颅取脑，沿脑桥上界水平切断，取全脑称重；再取血肿周围脑组织150 mg左右，称湿重后在110 ℃电热干燥箱中烘干至恒质量称取干重。
1.2.5 方法脑系数=全脑重/体质量×100 %；脑组织含水量=（湿重－干重）/湿重×100 %。
1.2.6 统计分析实验结果采用SPSS12.0统计软件分析，数据以（±s）表示，经多样本均数的比较后行组间t检验。
2 结果
2.1 中风膏对大鼠脑出血后脑系数的影响 见表1。表1 中风膏对大鼠脑出血后脑系数的影响 由表1可见，模型组与空白组相比P<0.01,说明该实验造模成功。同时从模型组数据可以看出：随脑出血时间的推移，脑系数逐渐增高。组和对照组与模型组相比P<0.01，表明中风膏与脑心通胶囊均能降低脑系数。治疗组与对照组相比P<0.05，说明中风膏的治疗作用优于脑心通胶囊。
2.2 中风膏对大鼠脑出血后脑组织含水量的影响见表2。 表2 中风膏对大鼠脑出血后脑组织含水量的影响 由表2可见，造模后模型组脑组织含水量比空白组明显升高（P<0.01），说明造模成功。同时从模型组数据可以看出：随脑出血时间的推移脑组织含水量逐渐增高。对照组与治疗组经治疗后脑组织含水量较模型组都显著降低（P<0.01），且治疗组与对照组相比有显著性差异（P<0.05），说明中风膏降低脑组织含水量的作用比脑心通胶囊强。
3 讨论
大量报道，许多机制参与了脑出血后脑水肿形成，这一过程至少包括3个阶段，即：超早期(最初几小时内)，主要由于流体静力压和血凝块回缩所致；第二阶段包括最初2 d以内，由于激活凝血级联反应和凝血酶产生；第三阶段3 d以后，主要是红细胞溶解和血红蛋白诱导的神经毒性。由此可见脑出血后脑损伤效应是由脑组织血液成分的毒性作用(包括血块回缩、凝血酶释放、红细胞溶解、血红蛋白毒性、补体激活、占位效应和血脑屏障破坏等)所引起，早期的血肿清除能够干扰水肿形成，因为它能够阻断血肿内各种有毒成分的级联反应。祖国医学阐述了本病的发生，先是“瘀于脑府”，而后迅速由瘀生水，由瘀热灼津成痰,瘀、水、痰积于脑府而成脑水肿，其病机虽然复杂，但总不离“瘀血”，瘀是根本病因，水、痰是病理产物。中风膏主要成分有当归、川芎、赤芍等，重用岷当归，能明显地降低全血黏度和血浆黏度比值，抑制血栓及血肿的形成，增强血液在血管中的流动度；此外能改善微循环和解除微循环障碍，有利于细胞的营养和氧的供给，起到活血化瘀之功，且本身不对脑组织产生负面影响。本实验中脑出血急性期脑系数、脑组织含水量显著升高（P<0.01），这与李燕华等[5]的研究结果一致。通过治疗，脑系数、脑组织含水量都迅速下降（P<0.01），说明中风膏与脑心通胶囊均有治疗作用，中风膏具有活血化瘀之功从而降低了脑系数、脑组织含水量，减轻脑出血急性期脑水肿的损害，作用优于脑心通胶囊（P<0.05）。
【文献】
[1]何纲.实验性脑出血动物模型的研究进展[J].国外医学·神经病学神经外分册,2001,28(2):80-83.
[2]Xue M,Del Bigio M R.Intracerebral injection of autologous whole blood in rats: time course of inflammation and cell death[J].Neuroscience Letters,2000,283:230.
[3]Yang G Y,Betz A L,Chenevert T L,et al.Experimental intracerebral hemorrhage: relationship between brain edema,blood flow,and blood[brain barrier permeability in rats[J].J Neurosurg,1994,81:93.
[4]包新明,舒斯云.大鼠脑立体定位图谱[M].北京:人民卫生出版社,1991:1.
[5]李燕华, 孙善全. 大鼠脑出血后血肿周围Ca2+浓度的变化与磷酸化CaMKⅡ表达的实验研究[J]. 中风与神经疾病杂志,2004,21（1）:7-9.
