HPLC法测定骨血康胶囊中淫羊藿苷的含量

                     作者：刘向荣,马淑涛,张庭广,白金刚

【摘要】  目的 建立骨血康胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。方法 采用高效液相色谱法。结果 骨血康胶囊中淫羊藿苷浓度在0.04～0.36mg/ml范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.26，RSD为1.86％（n=6）。结论 本方法准确，重现性好，可用于骨血康胶囊中淫羊藿苷的含量测定。

【关键词】  骨血康；淫羊藿苷；HPLC

    【Abstract】  Objective  To establish a method for determination of icariin in Guxuekang  capsules.Methods  HPLC method was used.Results  The linear ranges of icariin was 0.04～0.36ug（r=0.9997），and the average recovery was 99.26％ with RSD 1.86％（n=6）.Conclusion  This method is accurate , reproducible and suitable for the determination of icariin in Guxuekang capsules．

    【Key words】  Guxuekang capsules;icariin;HPLC

    骨血康胶囊由淫羊藿、黄芪、当归、熟地、白芍、川芎、甘草等组成，具有补肾益髓、益气补血的作用。本文报道了采用高效液相色谱法，以淫羊藿苷作为含量检测指标，参照2005版《药典》及相关［1～3〗?

  1  仪器与试药

    1.1  仪器  Waters 高效液相色谱系统。

    1.2  试药与试剂  淫羊藿苷（737-9404）购于中国药品生物制品检定所；骨血康胶囊（制剂组提取）；甲醇为色谱纯，乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

    2  色谱条件与系统适用性试验

    色谱柱：KromasilＣ18（规格：4.6mm×200mm,5μm）；流动相：乙腈：水（30：70），检测波长为270nm，柱温为室温，流速1.0ml／min，进样量10ul。理论塔板数按淫羊藿苷应不低于2000。

    3  含量测定结果

    3.1  对照品溶液的制备  精密称定淫羊藿苷对照品适量，置于10ml量瓶中，加甲醇制成0.1mg/ml的溶液，作为对照品溶液。

    3.2  供试品溶液的制备  精密称定胶囊内容物1g,置100ml具塞锥形瓶中，精密加入100ml稀乙醇溶液，密塞，称定重量，超声处理1h，放冷，用稀乙醇补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

    3.3  阴性对照溶液制备  取处方量，以相同工艺制备不含淫羊藿药材的阴性制剂，依3.2项下方法操作制备阴性对照溶液。

    3.4  测定方法  分别精密吸取各溶液10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算即得。

    3.5  专属性试验  分别取对照溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μl注入液相色谱仪，试验结果表明，对照品溶液（见图２）和供试品溶液（见图３）均在相同保留时间内出现色谱峰，而阴性对照溶液（见图１）在淫羊藿苷主峰位置无吸收峰。

    图１  阴性对照品溶液   图2  对照品溶液图3  供试品溶液

    3.6  线性关系考察  精密称取淫羊藿苷适量，置５0ml量瓶中，用甲醇配制0.1mg/ml溶液。分别精密吸取1，3，5，7，9ml于25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别吸取10μl注入色谱仪中测定，以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。回归方程为Y＝32640X+5.8635  r＝0.9997，由此可见，淫羊藿苷在0．04～0．36mg/ml范围内呈良好的线性关系。

    3.7  精密度实验  配置对照品溶液，连续５次等量注入同台液相色谱仪中，测定峰面积，其RSD为1.33%。结果表明该色谱条件精密度良好。

    3.8  重复性试验  取同一批样品５份，按上述条件测定，结果样品中淫羊藿苷平均含量为9.20mg/g, RSD=0.68％。

    3.9  稳定性试验  分别取淫羊藿苷对照品溶液（0.0948mg/ml）10μl和样品供试液于0，2，4，6，8h进样，测定峰面积。结果对照品RSD=1.02％，供试品RSD=1.24％。

    3.10  加样回收率测定  精密称取已知测定含量的样品5份，分别加入一定量的淫羊藿苷对照品，按制备供试品溶液方法制备供试并依法测定，回收率，见表１表1  加样回收率测定

    3.11  样品测定  分别取本品内容物粉末，精密称定，然后按上述方法制备供试品溶液，分别精密吸取10ul, 按色谱条件测定，计算淫羊藿苷的含量。结果淫羊藿苷平均含量见表２。 表２  含量测定结果

    4  讨论　

    　淫羊藿是骨血康胶囊中的君药，其主要有效成分为淫羊藿苷，本实验建立了高效液相色谱法测定制剂中淫羊藿苷含量的方法，方法准确，重现性好，可用于骨血康胶囊中淫羊藿苷的含量测定。

【】
  １ 国家药典委员会. 药典，一部.北京：化学出版社，2005,229.

２ 施东，孙开敬.测定补肾强身胶囊中淫羊藿苷含量.黑龙江医药,2006,19（4）：235.

３ 刘江琴,梁统.壮骨肾宝胶囊的质量标准研究.中国应用药学杂志,2001，18（3）：192-194.