正交实验法优选蜜炙黄芪的最佳炮制条件
作者：杨志雄，唐永红，陈锡琨，杨海宁
【摘要】 目的 探讨微波炮制方法对蜜炙黄芪中黄芪甲苷含量的影响，优化蜜炙黄芪微波炮制的工艺条件。方法采用HPLC–ELSD法检测蜜炙黄芪中黄芪甲苷的含量，并按L9(34)正交实验对蜜炙黄芪的微波火力、加热时间、含蜜量3个因素进行微波炮制蜜炙黄芪的工艺考察。结果可用微波法炮制蜜炙黄芪，最佳工艺为微波火力100%，加热时间4 min，含蜜量25%，即A3B2C1。结论微波法炮制蜜炙黄芪中黄芪甲苷含量高于炒法蜜炙黄芪，正交实验中的微波火力和加热时间对蜜炙黄芪的效果具显著差异，有统计学意义(P<0.05)，含蜜量对蜜炙黄芪的影响无显著差异，无统计学意义(P>0.05) ,微波法炮制蜜炙黄芪是可行的。
【关键词】 蜜炙黄芪； 微波法； 正交实验； 黄芪甲苷
Abstract：ObjectiveTo assess the microwave processing effects on astragoiosideIV of milkvetch root fried with honey. MethodsMilkretch root was mixed with honey and then fried in microwave oven, according to orthogonal design L9(34) of microwave power levels, processing time, and ratio of honey to milkvetch root. AstragoiosideIV of fried milkvetch root was measured by HPLC–ELSD.ResultsAstragoiosideIV concentration of fried milkvetch root was significantly associated with microwave power levels (P<0.05),and processing time(P<0.05)，and not with ratio of honey to milkvetch root, milkvetch root could be processed well under selected condition of 100% microwave power level, 4 min of processing time, and 25% honey.ConclusionMicrowave technology can be applied to fry milkvetch root with honey.
Key words：Milkvetch root fried with honey; Microwave techology; Ortholonal design; AstragolosideIV
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus (Fisch) Bge.var.mongholicus(Bge.) Hsio或膜荚黄芪Astragalus
membranaceus(Fish) Bge.的干燥根。具有补气升阳、益卫固表、托毒生肌、利水退肿的功效，用于表虚自汗、气虚血脱、脾虚泄泻、中气下陷等症状。蜜炙黄芪能增强补中益气兼润燥作用，多用于内伤劳倦、脾虚泄泻、一切气衰血虚证。本文将微波炉作为炮制设备，研究微波加热对蜜炙黄芪的外观质量及黄芪甲苷的影响，以探讨微波加热在蜜炙黄芪炮制中的可行性。
1 器材
1.1 药材黄芪购自南宁市药材公司,批号为(20061118),经本院药剂科莫可元副主任中药师鉴定为蒙古黄芪Astragalus membranaceus(Fisch) Bge.var.mongholicus(Bge.) Hsio的干燥根。
1.2 仪器微波炉,广东顺德格兰仕电器有限公司生产,WD900BS型,额定电压及额定频率：220V–50 Hz；额定输入功率1 400 W；微波输出功率900 W；额定微波频率2 450 Hz。LC–2010AHT高效液相色谱仪(日本岛津公司)；蒸发光散射检测器（Model400美国索尼公司）；SB–2200超声波清洗器(上海必能信超有限公司)，AJ150天平(瑞士梅特勒公司)，索氏提取器。
1.3 试剂黄芪甲苷对照品(药品生物制品检验所，批号0781–200311）；乙腈、甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。
2 方法与结果［1］
2.1 传统法制备蜜炙黄芪取生黄芪100 g，加25%的蜂蜜水溶液40 ml拌匀，闷润至蜂蜜水被吸尽，用文火炒至表面深黄色，质较脆，具蜜香气，略带粘性，取出放凉，备用。
2.2 微波法蜜炙黄芪选择对黄芪质量可能产生影响的3个因素：微波火力、加热时间、含蜜量。每个因素3个水平(见表1)选用L9(34)正交表进行实验。称取生黄芪100 g，用规定含量蜂蜜水40 ml拌匀，闷润至蜂蜜水被吸尽，平摊于微波炉专用盘中，接通电源，设定微波火力和时间，中途翻动1～2次，即时取出，放凉即可。表1 实验因素水平（略）
2.3 黄芪甲苷含量测定
2.3.1 色谱条件ODS柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）；流动相为乙腈–水（40∶60）；流速1.0 ml·min-1；柱温25℃；ELSD参数：漂移管温度100℃，氮气流速为2.6 ml·min-1，理论塔板数按黄芪甲苷峰计不低于4 000。
2.3.2 对照品溶液的制备精密称取在60℃真空干燥至恒重的黄芪甲苷对照品5.0 mg，用甲醇溶解。定容于5 ml量瓶中，摇匀，即得，备用。
2.3.3 黄芪不同炮制品供试品的制备将生黄芪、传统法蜜炙黄芪、微波法蜜炙黄芪分别粉碎过40目筛，干燥至恒重，分别精密称取各粗粉3 g，加水饱和正丁醇75 ml，精密称重，超声提取45 min，加水饱和正丁醇补足原重，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液50 ml，加氨试液（40～100 ml）洗涤2次，20 ml/次，弃去氨液层，取正丁醇层置旋转蒸发器上蒸10次。残渣加甲醇溶液，定容于2 ml容量瓶中，摇匀，微孔滤膜滤后，即为供试品溶液。
2.3.4 样品含量测定待测样品按供试品制备项下方法操作，对照品和供试品溶液20 μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件分析测定。即得测定结果见表2，方差分析结果见表3。表2 L9(34)正交表及结果（略）表3 方差分析（略）
3 讨论
微波本身不会发热，它是一种能量。微波炉正是利用微波的振荡频率迅速振荡食物内的水分子和脂肪分子。使其互相摩擦撞击从而使食物产生热量。中药自身含有一定水分，蜜炙中需用一定的辅料，为微波炮制中药提供先决的物质条件。从实验结果来看，黄芪甲苷的含量微波法优于传统法，这是由于微波可使黄芪细胞膜遭到破坏，有助于蜜炙黄芪中黄芪甲苷的溶出。
蜜炙黄芪正交实验结果及方差分析（见表2～3）表明，微波火力和加热时间炮制黄芪的效果具有显著统计学意义(P<0.05)，含蜜量对蜜炙黄芪的影响无显著统计学意义(P>0.05)。综合分析表明微波蜜炙黄芪的工艺较优，最佳参数为微波火力100%，加热时间4 min，含蜜量25%，即A3B2C1。
总之，微波蜜炙黄芪不仅减少时间，而且卫生清洁，减少环境污染，色泽均匀，易于控制温度，又可以杀菌消毒，炮制品易于保存，本实验为应用微波法蜜炙黄芪提供依据，值得推广应用。
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［1］国家药典委员会．药典［S］．北京：化学出版社，2005：212.
