枳陈汤对Wistar大鼠胃排空影响的实验研究

【摘要】  　　目的 观察枳陈汤对Wistar大鼠胃排空的作用，探讨其可能的作用机制。方法将Wistar大鼠随机分成A组(枳陈汤组)和B组(正常对照组)。用药5周后，用同位素法检测其胃液体排空功能，用微量羟胺法检测其红细胞乙酰胆碱酯酶活性，用放免法检测其血浆胃动素。结果A组和B组的30 min胃排空率分别为（43.35±11.56）%和（31.66±6.81）% (P<0.05)。A组的红细胞乙酰胆碱酯酶活性和血浆胃动素分别为（0.418±0.066） μmol/30 min和（125.81±25.58） pg/ml，B组为（0.291±0.056） μmol/30 min和（91.18±25.19） pg/ml。A组均比B组的高(P<0.05)。结论枳陈汤可有效地促进大鼠胃排空功能，其机制可能与通过增强胆碱能神经功能和提高血浆胃动素水平有关。

【关键词】  枳陈汤；胃排空；红细胞乙酰胆碱酯酶活性；血浆胃动素

　　Abstract：ObjectiveTo observe the effect of the herbal medicine Zhichen Tang on the gastric emptying in wistar rats and to investigate its mechanism. MethodsWistar rats were randomly divided into two groups-group A(Zhichen Tang) group B (control). After treating with Zhichen Tang for 5 weeks, 30-min gastric liquid empyting rate, erythrocyte acetylcholinesterase activity and plasma motilin content were measured by radioistopic techniology, microcolorimetric and radioim munoassay, respectively. ResultsThe experiment indicated that 30 min gastric emptying rates of group A and B were (43.35±11.56)% and (31.66±6.81)%,respectively(P＜0.05).The erythrocyte acetylcholinesterase activity and the plasma motilin content of group A were also significantly higher than those of group B.ConclusionZhichen Tang can promote liquid gastric emptying by improving the cholinergic nerve function as well as increasing the plasma motilin content.

　　Key words：Zhichen Tang;   Gastric emptying;  Erythrocyte-acetylcholinesterase activity;  Plasma motilin

    功能性消化不良是临床常见病，与胃肠动力障碍存在着确切的联系。该病患者餐后胃窦运动功能的减弱，从而导致了胃排空的延迟［1～3］。枳陈汤是本院功能性消化不良的常用方剂。多年临床结果显示，该方对功能性消化不良具有良好的效果。但其机制尚不清楚。为此，本研究以Wistar大鼠为模型，采用枳陈汤处理后，观察了大鼠胃排空的情况，并从胃动素和胆碱酯酶两方面探讨了其可能的作用机制。

　　1  材料及方法

　　1.1  材料枳陈汤方，主要成分枳实、陈皮、莱菔子等，制成水煎液，浓度为1.50 g/ml，由本院中药房配制。Wistar大鼠，雄性，8周龄，60只，购自院上海试验动物实验动物中心。锝-99m-二乙三胺五醋酸(99m Tc-DTPA，购自上海新科公司。胃动素放射免疫分析盒，购自北京市解放军总东亚免疫技术研究所。溴化乙酰胆碱(C7H16BrN2O，CP)，购自上海试剂三厂。

　　1.2  大鼠胃排空功能测定

　　1.2.1  取大鼠30只，随机分成对照组和枳陈汤两组，每组15只。

　　1.2.2  对照组每天用双蒸水1 ml灌胃，枳陈汤组每日用枳陈汤方1 ml灌胃(8 g/kg)。共喂药5周。

　　1.2.3  第36天时禁食(不禁水、药)1 d。第36天，各组用同位素99mTc-DTPA标记的面粉糊剂1 ml灌胃(每毫升面粉糊剂中含标准粉0.5 g,99mTc-DTPA0.5 μCi)。标准组于灌胃后立即处死，剖腹，用缝合线结扎贲门或幽门，用手术剪沿结扎处非胃端将胃取下。

　　1.2.4  将大鼠胃置于井型γ闪烁探头中，用单道γ能谱仪测出各组大鼠胃中残留的99mTc-DTPA的放射活性度(每例标本测定45 s)。按同位素衰变公式X=X0e0．693/λt将各实测值进行校正。以标准组大鼠胃99mTc的放射活性度为基准值，其余各组大鼠胃99mTc的放射活性度为残留值，按公式胃排空率=(基准值-残留值)/基准值，算出各组大鼠在30 min时的胃排空率。

　　1.3  大鼠红细胞乙酰胆碱酯酶活性和血浆胃动素的检测

　　1.3.1  取大鼠30只，随机分成正常对照组、枳陈汤组二组，每组15只，喂药方法、剂量和时间均同胃排空检测实验。

　　1.3.2  实验前1 d禁食(不禁水、药)。第36天，从大鼠股静脉采血5 ml,2 ml置于肝素抗凝管中混匀，以供乙酰胆碱酯酶活性测定。剩余3 ml置于含30 μl 10%EDTA和30 μl抑肽酶试管中混匀，4°C离心，5 000 r/min, 15 min，取血浆250 μl，-20°C保存待检胃动素。

　　1.3.3  红细胞乙酰胆碱酯酶活性测定

　　采用微量羟胺法，参照进行［4］。

　　1.3.4  血浆胃动素测定

　　采用放免法，参照试剂盒说明进行。样品管和标准管的检测均采用双管法。

　　1.4  统计方法采用单因素分析的方法，进行组间比较。

　　2  结果

　　2.1  枳陈汤对大鼠胃排空的影响对大鼠胃排空采用同位素法检测，结果发现，对照组、枳陈汤组30 min胃排空率明显高于对照组，差异有非常显著性(P＜0.01)。见图1。

　　2.2  枳陈汤对大鼠红细胞乙酰胆碱酯酶活性的影响

　　用微量羟胺法检测大鼠红细胞乙酰胆碱酯酶活性，结果发现，枳陈汤组大鼠红细胞乙酰胆碱酯酶活性明显高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)。见图2。

　　2.3  枳陈汤对大鼠血浆胃动素的影响

　　用药5周后，用放免法检测大鼠血浆胃动素，结果发现，枳陈汤组大鼠的血浆胃动素水平均明显高于正常对照组，差异有显著性（P＜0.05)。见图3。
　　
　　3 讨论

    胃的排空，尤其是固体食物的排空与胃窦的运动功能密切相关。研究表明，功能性消化不良餐后胃窦运动功能的减弱，导致了胃排空的延迟［1～3］。本实验结果显示，枳陈汤组的胃排空率均高于对照组，表明枳陈汤具有促进大鼠胃运动功能的作用。进一步研究发现，枳陈汤可能通过提高胆碱能神经功能和血浆胃动素水平实现的。

    胆碱能神经功能活动与胃窦运动功能有关。其中，迷走神经对胃的运动起兴奋作用，能使胃底和胃体收缩，胃的张力增加，胃窦峰电位活动明显增多，胃窦蠕动增强。在功能性消化不良患者中常可发现胃窦收缩频率下降和收缩幅度减少等胃窦运动减弱和胃容受性舒张功能障碍的表现，这些异常与患者迷走神经张力减低有关［5，6］。血液中红细胞乙酰胆碱酯酶活性可较好地反映出机体乙酰胆碱的变化及胆碱能神经功能状态。交感神经兴奋者，其红细胞乙酰胆碱酯酶活性低于正常，而迷走神经兴奋者其乙酰胆碱酶酶活性则高于正常［7，8］。本文显示，枳陈汤组大鼠的红细胞乙酰胆碱酯酶活性高于对照组，提示枳陈汤有增强大鼠胆碱能神经功能的作用。

    胃动素是一种能促进胃运动并呈周期性释放的脑肠肽。临床发现，功能性消化不良患者血浆胃动素的水平一般低于正常，约半数的患者无胃动素高峰出现，表现功能性消化不良患者可能存在着胃动素释放障碍。而胃动素的释放又与迷走神经功能密切相关，刺激迷走神经则能促进胃动素的释放［9］。因此，功能性消化不良患者胃动素释放障碍可能与患者体内迷走神经功能降低有关。本实验结果显示，枳陈汤组的血浆胃动素水平高于对照组，提示枳陈汤能提高大鼠血浆胃动素水平。这种作用与胆碱能神经通路的关系，值得进一步探讨。

【】
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