豨莶草炮制品抗炎作用的实验研究

【摘要】  　　目的 对豨莶草用黄酒蒸制不同时间所制得炮制品的抗炎作用的强弱进行实验研究。方法采用致大鼠慢性棉球肉芽肿和二甲苯致小鼠耳肿胀的方法，观察不同炮制时间的豨莶草对棉球肉芽肿的重量及小鼠耳肿胀度的影响。结果豨莶草酒蒸8 h蒸制的炮制品对两种炎症模型均显示出明显的抑制作用。结论实验样品中8 h蒸制品的抗炎作用最全面。提示豨莶草用黄酒蒸8 h抗炎作用最佳。

【关键词】  酒蒸豨莶草；棉球肉芽肿；肿胀率

　　Abstract：ObjectiveTo study the anti-inflammatory effect of processed  Herba Siegesbeckiae with millet wine for different time. MethodsThe swelling of ears in  mice induced by xylene and  the proliferation of granulation induced by cotton balling were adopted. ResultsProcessed Herba Siegesbeckiae  steamed for 8 hours had obvious inhibitory effect on two kinds of inflammation models.ConclusionIt seems that processed Herba steamed with millet wine for 8 hours has the most extensive effect on inflammation.

　　Key words：Processed Herba Siegesbeckiae with millet wine；  Cotton ball granuloma；  Turgescence
   
　　豨莶草为菊科植物豨莶Siegesbeckia orientalis L. 腺梗豨莶Siegesbeckia pubescens Mskino 或毛梗豨莶Siegesbeckia glabrescens Makino的干燥地上部分。全国大部分地区有产，主产于湖南、福建、湖北、江苏等省。豨莶草主含多种二萜及二萜苷类、苦味质、生物碱等。本品苦寒，有小毒。入肝、肾二经。祛风湿、利筋骨。治四肢麻痹、腰膝无力，风湿疼痛［1］。豨莶草始载《新修本草》，宋《证类本草》最早记载了炮制应用：“……九蒸九曝，不必大燥，但取蒸为度，乃熬捣为末，治中风”。古中记载的炮制方法有清蒸、酒蜜蒸、酒蒸、酒炒、清炒［2］。蒸法中无论用辅料或不用辅料都要求蒸9次，并有强调不蒸够9次，疗效不好。如《药品辨义》称其性苦辛气寒，故必蒸晒9次，加以酒蜜则苦寒之阴尽去，而清香之味见矣，如数不至九，阴浊未尽，则不能透骨搜风，而却疾奏捷也。现在，《药典》收录豨莶草生品和酒蒸豨莶草两种炮制品。其中，豨莶草：除去杂质，洗净，稍润，切段，干燥；酒蒸豨莶草：取豨莶草段，用黄酒拌匀，闷至黄酒被吸尽，隔水蒸透。酒豨莶草100 kg，用黄酒20 kg。酒蒸豨莶草只蒸制1次，与古代记载蒸制9次有较大的差异，并且没有写明蒸制时间，实际操作很难掌握 。近年有报道豨莶草具有抗炎、抗菌及降压的作用。本实验使用豨莶草酒蒸制4，6，8，10 h 4种炮制品的水提活性部位，观察对急性非特异性炎症模型和慢性炎症模型大鼠的影响，其抗炎作用的强弱、特点和差别，为豨莶草用黄酒蒸制时间的确定提供药效学依据。

　　1  材料

　　1.1  药物

　　豨莶草炮制品  咖啡色液体，1 g生药/ml ；阳性药，吲哚美辛,批号:20030401,厂家:石家庄市华龙药业股份有限公司。

　　1.2  动物

　　SD大鼠 二级 雄性160～200 g（不同实验所用体重不同），由北京市维通利华动物繁育场提供，合格证号：SCXK（京）2002-0003。ICR小鼠二级 雄性24～26 g，由北京市维通利华动物繁育场提供，合格证号：SCXK（京）2002-0003。

　　1.3  材料

　　二甲苯：北京益利精细化学有限公司，液体，100％棉球：30 mg/个，高压灭菌，各加入强力阿莫仙（批号：030313，厂家：珠海联邦制药股份有限公司）1 mg/0.1 ml/个，50℃烘箱烤干。

　　2  方法与结果

　　2.1  药品的炮制及供试药品的制备

　　2.1.1  药品的炮制取

　　豨莶草生品1 000 g加入黄酒200 g拌匀，闷润30 min。待黄酒吸收完全后，放入带盖的陶瓷罐中隔水大火分别蒸制4，6，8，10 h，分别取出干燥。（注：加入黄酒时，将200 g黄酒加蒸馏水稀释为400 ml，再和豨莶草拌匀。稀释黄酒目的是为了使豨莶草和黄酒能够充分拌匀。）

　　2.1.2  供试药液的提取

　　称豨莶草各炮制品1 000 g，水12 000 ml，分两次煎。第1次：豨莶草1 000 g水8 000 ml煎2 h。第2次：第1次的药渣再加水4 000 ml，煎1 h。合并两次提取液，浓缩到1 000 ml,制成1∶1的流浸膏。

　　2.2  方法

　　2.2.1  致大鼠慢性棉球肉芽肿［3］

　　取大鼠42只，雄性，160～200 g，乙醚浅麻醉下两侧腹股沟去毛消毒，各切1 cm长的小口，用眼科镊子将30 mg的灭菌棉球从切口处植入腹股沟皮下，随即缝合皮肤。然后随机分为6组，每组7只，当天分别灌胃给药，对照组给等容量的生理盐水； 阳性组给吲哚美辛9 mg·kg-1；豨莶草各炮制品给药6 g·kg-1，1次/d，连续给药7 d，第8天大鼠脱臼处死后，取出两侧棉球，置60℃烤箱至恒重（12 h）减去原棉球重量，即为肉芽肿的重量。结果处理：肉芽肿重量以mg（肉芽肿）/100 g（体重）表示。以各组肉芽肿重量，进行t检验，并比较其抑制率。

　　2.2.2  二甲苯致小鼠耳肿胀［3］

　　取ICR雄性小鼠72只，体重24～26 g，随机分成6组，每组12只。对照组给等容量蒸馏水，阳性组给吲哚美辛20 mg·kg-1，豨莶草各炮制品给药12 g·kg-1 ，灌胃给药1次，给药30 min后用100％二甲苯0.1 ml涂抹小鼠右耳的两侧，涂药后20 min将小鼠处死，剪下两耳，用直径为0.8 mm的打孔器切下两耳圆形耳片，立即称重，耳肿胀率＝右耳片重－左耳片重；肿胀抑制率=（右耳片重－左耳片重）/左耳片重×100%。

　　2.3  结果

　　2.3.1  对大鼠慢性棉球肉芽肿的影响

　　结果见表1。蒸制4，8 h的炮制品6 g·kg-1组对棉球棉球肉芽肿慢性炎症有明显的抑制作用，与对照组比较有显著性差异P<0.05；6，10 h蒸制品与对照组比较无明显差异P>0.05。表1  对大鼠棉球肉芽肿的影响（略）

　　2.3.2  对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

　　结果见表2，8 h的炮制品明显抑制小鼠耳肿胀，与对照组比较有显著性差异P<0.01；10 h的炮制品也可抑制小鼠耳肿胀，与对照组比较有显著性差异P<0.05。4，6 h炮制品未显示出有明显的作用P>0.05。表2  对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（略）

　　3 讨论

    豨莶草酒蒸制时间不同炮制品的抗炎作用是有差异的，古人强调蒸制9次应该是为了获得最佳的药理作用。本文研究结果显示出豨莶草蒸制8 h的炮制品在抗急性炎症和慢性炎症（棉球肉芽肿模型）方面显示出较其他蒸制时间的炮制品有明显的抑制作用，提示从抗风湿的药理作用出发豨莶草酒蒸8 h是最佳的。另外，有报道豨莶草尚有活血化淤、止痛等方面的疗效，豨莶草酒蒸制时间在这些方面的特性和差异有待进一步的探讨。

【文献】
  　　［1］国药典委员会.药典，Ⅰ部［S］.北京：化学出版社，2005：255.

　　［2］叶定江.中药炮制学［M］.北京：中国出版社，1999：353.

　　［3］徐叔云,卞如濂，陈 修,等. 药理实验方法学［M］.北京 :人民卫生出版社, 1991：713.