宁夏不同地区和不同生长期地骨皮总蒽醌含量比较

                        作者：马学琴，黄青，付雪艳，董琳

【摘要】  　　目的 考察宁夏不同地区和不同生长期地骨皮总蒽醌的含量。方法采用60%甲醇提取、直接和酸水解后醋酸镁比色法，分别测定地骨皮药材中总蒽醌的含量。结果银川、固原、青铜峡5～6年生地骨皮总蒽醌含量较高。结论宁夏各地产不同生长期的地骨皮药材中总蒽醌含量有较大差异。

【关键词】  地骨皮；总蒽醌

　　Abstract:ObjectiveTo determine the content of anthraquinone in Lycium barbarum L. from different regions and in different years of Ningxia .MethodsThe Lycium barbarum L.was extracted by 60% methanol, the colorimetry with magnesium acetate as color - developing reagent was applied. The content of total anthraquinone was determined.  ResultsThe contents of total anthraquinone in Lycium barbarum L. collected from Yinchuan,Guyuan,Qingtongtia were high. ConclusionThe difference of the anthraquinone content in these samples is obvious.　

　　Key words:Lycium barbarum L.;   Total anthraquinone

    地骨皮为茄科植物枸杞Lycium chinense Mill或宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥根皮，广布于我国，为宁夏道地药材，也是常用中药材之一。《神农本草经》有对地骨皮的记载：“味苦、寒。主五内邪气，热中，消渴，周痹”。药研究表明其具有降血压、降血糖、调血脂、解热、抗菌及抗病毒等活性［1］。地骨皮化学成分中香豆素类化合物、环肽类、生物碱、多元酚(包括黄酮和酚酸类化合物)和蒽醌类化合物等为地骨皮主要的生物活性成分［2］。《药典》2005年版收载的地骨皮只有性状、显微鉴别和总灰分的检查，无对其有效部位或有效成分的含量测定等项目。关于地骨皮有效部位的含量测定还未见报道。笔者为了探明地骨皮中总蒽醌的含量，并且探讨生长期和产地对药材中总蒽醌的影响，主要就宁夏不同地区和生长期的地骨皮药材样品进行总蒽醌的含量测定［3］。

　　1  仪器与试药

    岛津UV-2550紫外分光光度仪(日本),CQ-2200超声波清洗器(上海新超超声波仪器有限公司)。大黄素(中国药品生物制品检定所),0.5%醋酸镁甲醇溶液，甲醇(分析纯)。地骨皮药材采自青铜峡、银川、中宁、固原等地，经鉴定为宁夏枸杞Lycium barbarum L.的干燥根皮。

　　2  方法与结果

　　2.1  测定波长的选择

　　称取大黄素适量，用0.5%醋酸镁甲醇溶解。以0.5%醋酸镁甲醇为空白，进行全波长扫描，结果表明大黄素醋酸镁甲醇溶解在510 nm有最大吸收，故选510 nm为测定波长。

　　2.2  对照品溶液的制备

　　精密称取大黄素对照品(100℃干燥至恒重)11.20 mg, 置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容得浓度为0.112 mg/ml对照品溶液。

　　2.3  线性范围考察

　　精密量取对照品溶液各30，155，230，330，430，530，630 μl置5ml容量瓶中，各加入2.5 ml甲醇溶解后溶液在λ=510 nm处的吸光度。以吸光度对浓度进行线性回归， 得到回归方程A=38.02C-0.004 9, 线性范围：1.33～22.5 μg/ml，r=1。

　　2.4  供试品的制备

　　不同来源的地骨皮供试品经过去泥、剥取根皮、晒干、粉碎、过60目筛、粉末经恒温(60℃) 干燥24 h后, 精密称取约0.5 g, 置250 ml圆底烧瓶中，加60%甲醇约100 ml，回流提取2 h，冷却，滤过。精密量取续滤液10 ml置100 ml圆底烧瓶中，挥干甲醇并加入2.5 mol/L硫酸约20 ml，回流2 h。稍冷，加入氯仿约30 ml，继续回流2 h。停止加热，冷却至室温后，转移至分液漏斗内，用约10 ml氯仿分两次荡洗烧瓶，转移至分液漏斗内，小心分取氯仿层至50 ml量瓶中，加氯仿至刻度。精密量取氯仿提取液5 ml，置10 ml量瓶中，蒸去氯仿，残渣加0.5%醋酸镁甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀。以0.5%醋酸镁甲醇溶液为空白，在λ=510 nm测定吸收光度。

　　2.5  精密度实验取“2.2”项下对照品溶液，重复测定5次, 测得的吸光值RSD为0.12%(n=5)。

　　2.6  重现性实验取同一产地和生长期的供试品5份, 按供试品溶液的制备方法制备, 依法测定, 测得的吸光值RSD为2.53%(n=5)。

　　2.7  稳定性实验精密称取地骨皮药材约0.5 g，照“2.4”项下制备方法制备, 每间隔20 min测定吸光度，共测6次，在1h内吸光度值无变化，表明0.5%醋酸镁甲醇溶液在1 h内显色稳定。

　　3  结果

　　3.1  不同生长期和地域地骨皮外观变化地骨皮系多年生药材，因此要考察不同生长期总蒽醌含量变化。在实地采挖时，笔者发现：不同地域地骨皮外表面由灰黄色至棕黄色不等，粗糙，有不规则纵裂纹，易成磷片状剥落。内表面黄白色至灰黄色，较平坦，有细纵纹。晒干后质轻脆，易折断。

　　3.2 不同生长期和地域地骨皮总蒽醌含量比较根据生长期不同，测定了宁夏不同地区地骨皮总蒽醌含量。结果见表1。表1  不同地区不同生长期地骨皮总蒽醌含量比较（略）

    由表1数据可以看出，不同地域和生长期地骨皮总蒽醌的含量具有显著差异(P< 0.05) , 可见地域和生长期不同，地骨皮总蒽醌的含量不同。

　　4  讨论

    从实验测定结果来看，银川、固原、青铜峡者5～6年生地骨皮总蒽醌含量高。除银川5～6年可能由于土壤不同或采集方法不同而导致蒽醌含量偏低外，随着生长期的延长，地骨皮总蒽醌的含量在逐渐增加，并且增加幅度随着地域的不同而不同：随着生长年限的增加，固原、青铜峡地骨皮总蒽醌含量成倍增加；中宁地骨皮总蒽醌含量基本保持较低水平。本研究从银川野生地骨皮的总蒽醌含量高表明，随着年限的增加, 总蒽醌的量还会明显提高。

    笔者实际调查发现, 药农还未认识到地骨皮的药用价值，当枸杞树生长期超过7年后由于不再挂果而直接被焚烧。因此，本文旨在挖掘宁夏地骨皮的药用价值，以活性部位总蒽醌为代表，揭示宁夏地骨皮活性部位的含量，为地骨皮进一步的研究奠定基础。

【】
  　　［1］国家中医药管理局《中华本草》编辑委员会.中华本草，第7册［M］.北京：与技术出版社，1999：274.

　　［2］魏秀丽，梁敬钰.地骨皮化学成分研究［J］.中草药，2003，34（7）：580.

　　［3］江兰英, 谢细平, 陈华龙，等.不同生长期和不同产地虎杖总蒽醌比较［J］.中草药，2005，36（8）: 1244.