人结肠癌总RNA转染树突状细胞介导个体化免疫治疗的体外实验
来源：岁月联盟
时间：2017-03-19
2.3 CTL对自体或异体原代培养结肠癌细胞的杀伤率： RNA-mDC诱导产生的CTL 对自体结肠癌细胞杀伤率显著高于对异体原代结肠癌细胞组(P<0.05)。表明肿瘤RNA被mDC递呈后，能有效刺激产生对自体肿瘤细胞具高度特异杀伤活性的CTL。
2.4 细胞因子检测 ： RNA-mDC组细胞培养上清中IL_12的浓度高于mDC组(P<0.05)，并显著高于imDC组(P<0.01)；RNA-mDC刺激产生的CTL组上清中INF- γ的浓度高于mDC 组(P<0.05)，并显著高于imDC组(P<0.01)。
3 讨论
现已证明对肿瘤细胞免疫耐受是肿瘤在体内长期生存与不断生长的关键因素。体内肿瘤细胞通过多种方式逃避免疫系统的识别；另外，肿瘤细胞分泌IL-10、IL-6、TGF-β等免疫抑制因子阻止DC成熟，未成熟DC即便俘获并提呈肿瘤抗原给T细胞，也不能激活T细胞［７］。
因此提高抗肿瘤免疫效应就必须制备有效的肿瘤抗原；获得具有强大抗原提呈能力的mDC和提高肿瘤抗原的表达水平。
用肿瘤全细胞抗原对DC进行修饰刺激机体产生抗肿瘤免疫效应，近年来已被广泛接受。与各种形式的全细胞抗原比较，肿瘤细胞总RNA具有明显优势。研究结果显示，在GM-CSF、IL-4、TNF_α作用下，经7d体外培养，大部分贴壁PBMC发育为mDC，高表达抗原提呈分子和共刺激分子，具有高效刺激自体T细胞增殖的能力。转染自体结肠癌细胞总RNA的mDC具有更高的IL-12分泌能力，激活T细胞产生的CTL上清液中IFN_γ水平显著提高。上调DC及肿瘤细胞抗原提呈分子及共刺激分子的表达［8］，可加强DC的抗原提呈功能，同时也可提高肿瘤细胞抗原表达及CTL对其识别杀伤的能力。但是，RNA转染DC治疗肿瘤的分子机制尚不明确。
我们经短期培养制备了三株生长稳定的原代结肠癌细胞，将其作为靶细胞用于细胞毒杀伤实验，结果显示经自体抗原致敏的CTL对自体肿瘤细胞的杀伤率显著高于另外两株异体肿瘤细胞。表明CTL识别肿瘤细胞表面抗原肽具有个体特异性，同种异体肿瘤细胞可能表达肿瘤相关抗原，但缺乏与特异性CTL相适应的HLA表型，因此不能被有效的识别和杀伤，提示临床抗肿瘤免疫治疗应采取个体化方案。
参考文献
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