OLYMPUS全自动生化分析仪交叉污染的探讨
［关键词］ 全自动生化分析仪；交叉污染；试剂
近年来，随着医学技术的进步和迅速，各种全自动生化分析仪相继出现并广泛应用于临床实验室，生化分析仪项目间的交叉污染方面的研究也很多，我们用OLYMPUS 400、OLYMPUS 2700对目前使用的试剂可能存在交叉污染的项目进行了实验，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 仪器 OLYMPUS 400、OLYMPUS 2700全自动生化分析仪。
1.2 试剂 丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(ALP)、胆碱酯酶(CHE)由温州东瓯公司提供，方法均为连续监测法；淀粉酶脢(AMS)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK?MB)由科利亚公司提供，方法为连续监测法；血清镁(Mg2+)由科利亚公司提供，方法为二甲苯胺蓝法；无机磷(P2+)由中生公司提供，方法为钼酸铵法；总二氧化碳(TCO2)由RADON公司提供，方法为酶法。
1.3 标本 混合血清、门诊患者血清、蒸馏水。
1.4 方法 按试剂说明书设定仪器参数。
1.4.1 用OLYMPUS 400与OLYMPUS 2700以临床样本与混合血清为研究对象，同时对影响LDH的项目：ALT、AST；对影响Mg2+的项目：ALP、CK、CK?MB、TCO2、AMS；对影响P2+的项目：CHE、CK?MB、ALP、TBIL进行交叉污染实验。
1.4.1.1 LDH对ALT、AST的影响 以两种方式测定，第一种方式：取40份样本，包含线性范围内的高、低值，先单独测定LDH，再测定ALT紧跟着测定LDH，然后将ALT换成AST，以同样方式测定LDH；第二种方式是用混合血清按照上述方式连续测定20次。
1.4.1.2 ALP、CK、CK?MB、TCO2、AMS对Mg2+的影响 以两种方式测定，第一种方式：取40份样本，包含线性范围内的高、低值，先单独测定Mg2+，再测定ALP紧跟着测Mg2+然后将ALP换成CK、CK?MB、TCO2、AMS，以同样方式测定Mg2+；第二种方式是用混合血清按照上述方式连续测定20次。
1.4.1.3 CHE、CK?MB、ALP、TBIL对P2+的影响 以两种方式测定，第一种方式：取40份样本，包含线性范围内的高、低值，先单独测定P2+，再测定CHE紧跟着测P2+，然后将CHE换成CK?MB、ALP、TBIL，以同样方式测定P2+；第二种方式是用混合血清按照上述方式连续测定20次。
1.4.2 用OLYMPUS 2700以蒸馏水为检测对象 按照1.4.1的方法对3种组合方式测定蒸馏水中相应LDH、Mg2+、P2+的含量。
2 结果
2.1 ALT、AST对LDH的影响 见表1。
表1 ALT、AST对LDH的影响(略)
注：t1为方式1与方式2配对比较，t2为方式1与方式3配对比较，#P>0.05，*P<0.05。
结果表明，两台仪器先测ALT对测定LDH结果均无显著影响。OLYMMPUS 2700先测AST对测定LDH结果无显著影响。OLYMMPUS400先测AST对测定LDH结果有显著影响。
2.2 ALP、CK、CK?MB、TCO2、AMS对Mg2+的影响 见表2。
表2 ALP、CK、CK?MB、TCO2、AMS对Mg2+的影响(略)
注：t1为方式1与方式2配对比较，t2为方式1与方式3配对比较，t3为方式1与方式4配对比较，t4为方式1与方式5配对比较，t5为方式1与方式6配对比较，#P>0.05。
结果表明两台仪器先测定ALT、CK、CKMB、TCO2、、AMS对测定Mg2+结果均无影响。
2.3 CHE、CK?MB、ALP、TBIL对P2+的影响 见表3。
表3 CHE、CK?MB、ALP、TBIL对P2+的影响(略)
注：t1为方式1与方式2配对比较，t2为方式1与方式3配对比较，t3为方式1与方式4配对比较，t4为方式1与方式5配对比较，#P>0.05，*P<0.05。
结果表明，对于OLYMPUS 2700，先测定CHE、CK?MB、ALP、TBIL对测定P2+结果无影响。对于OLYMPUS 400，先测定CK?MB、ALP、TBIL对测定P2+结果无显著影响，先测定CHE，对于混合血清，结果无显著影响，对于临床标本，结果有显著影响。
2.4 以蒸馏水为检测对象，观察OLYMPUS 2700对3种组合的交叉污染 结果见表4。
表4 OLYMPUS 2700全自动生化分析仪对3种组合测定蒸馏水结果(略)
注：OLYMPUS 2700对3种组合测定蒸馏水无显著交叉污染。
2.5 OLYMPUS 400仪器保养前后结果比较 见表5。
表5 OLYMPUS 400仪器保养前后结果比较(略)
结果表明，仪器保养后，交叉污染大大降低。
3 讨论
全自动生化分析仪项目间的交叉污染的实验报道很多，我们在日常工作中也发现了一些问题，因此我们用OLYMPUS 400及OLYMPUS 2700进行交叉污染实验，结果表明，对于OLYMPUS 400，测定混合血清，AST对LDH有显著影响(P<0.05)，测定40份样本，AST对LDH，CHE对P2+有显著影响，其他项目无显著影响；对于OLYMPUS 2700，实验中的任何项目之间无显著影响，原因可能是OLYMPUS 2700是新购置的仪器，分为内外圈装载试剂，两根针分别吸取R1与R2试剂，其同一试剂圈内的试剂由同一根针吸取，在吸取不同项目试剂的间隔中具有自动清洗过程，进行试剂针、样品针及比色杯清洗以保证测定不受污染，并且我们将可能引起污染的项目分别设置在内、外圈，有效地减少了交叉污染，用蒸馏水做样本对3种组合进行试验也证明了这一点，结果见表4，而OLYMPUS 400全自动生化分析仪只有一个试剂仓，一根试剂针吸取所有的试剂，每种不同项目试剂间吸取仅有一次水冲洗过程，由于AST试剂中LDH的含量太高，达到6 KU/L，CHE中P2+的浓度是50 mmol/L，远远高于正常人血清中的浓度，对于使用了5 a并且试剂针仅用一根的OLYMPUS 400仪器来说，即使仪器保养得再好，仅靠一次冲洗过程完全冲洗干净是不太可能的，因此应增加洗涤次数或在测定前进行预冲洗。此外，当仪器状况不好时，项目间的交叉污染很严重，样本的重复性差，我们用混合血清做了一次试验，结果见表5，为了最大限度地避免交叉污染，检验人员特别是该仪器的负责人应对各项目的试剂成分熟悉，合理设置项目顺序，将被干扰项目置于干扰项目之前或中间间隔其他项目，但是，由于交叉污染的项目很多，很多开展的项目及项目组合也很多，仅仅依靠设置项目的顺序来完全避免交叉污染几乎是不可能的，这就要求检验人员要定期对试剂针、样品针、搅拌棒进行清洗、保养(用1 N次氯酸钠清洗效果较好)，善于发现问题，特别是对于试剂生产厂家的试剂说明书没有标明的成分，但在实验过程中怀疑某个项目对某个项目有干扰时，可以通过实验排查，将一份样本分为2份，1份加生理盐水或其他的稀释液，另一份加等量的试剂，同时测定，考查结果的变化，进而确定可能发生试剂交叉污染造成干扰的项目［1］。此外，本实验结果与其他报道有相同的也有不同的［2，3］，原因可能是使用的试剂不同、仪器不同及仪器的使用状况不同，应根据自己的实际情况设置适合本系统的实验程序。
文献:
［1］ 于雷.生化自动分析仪项间的交叉污染及其避免方法［J］.临床检验杂志，2003，21(3)：168.
［2］ 陈晓婷，徐俊荣，马建锋.几种试剂对镁MTB法自动分析的影响［J］.临床检验杂志，2000，18(5)：211?212.
［3］ 吴健.贵州医药，全自动生化分析仪测定顺序对检测结果的影响［J］.贵州医药，2004，28(2)：124?125.
