幽门螺杆菌感染与不孕不育症的血清学研究

                                 作者：　杜久伟, 许克义, 陶欣荣, 朱复希, 陈天义, 任宏艳   

【关键词】  ,螺杆菌

    A serologic study on Helicobacter pylori infection and infertility

　　【Abstract】AIM:  To study the relationship between Helicobacter pylori infection and infertility. METHODS: Serum H.pyloriIgG, antisperm antibody (AsAb), T lymphocyte subsets and some cytokines were detected in 125 patients (male 58, femal 67) with infertility. RESULTS:  The positive rates of H.pyloriIgG and AsAb in patients with infertility were 46.4% and 21.6%, which were higher than those in normal control group (P<0.01). The positive rates of AsAb in patients with H.pyloriIgGpositive or negative infertility patients were 32.8% and 11.9%, with a significant difference between them (P<0.01). In H.pyloriIgGpositive infertility patients, the CD3+, CD4+ and CD4+/CD8+ decreased, the serum IL4, IL6, IFNγ   and TNF increased, and the ratios of IFNγ  to IL4 decreased (P<0.05). CONCLUSION:  H.pylori is an infertilitycausing pathogen. The increased positive rates of AsAb and cytokines may be involved in the development of infertility.

　　【Keywords】 Helicobacter pylori; infertility; antisperm antibody (AsAb); T lymphocyte subsets; cytokines; serology

　　【摘要】目的： 探讨幽门螺杆菌感染和不孕不育症的关系及其可能的免疫学因素.  方法： 用ELISA法检测不孕症(n=67)，不育症(n=58)患者血清抗H.pyloriIgG，抗精子抗体，T细胞亚群及部分细胞因子水平. 结果： 不孕不育症患者血清H.pyloriIgG和AsAb依次为46.4%和21.6%，与对照组相比差异均具有显著性(P<0.01). 抗H.pyloriIgG阳性和阴性的患者AsAb阳性率依次为32.8%和11.9%(P<0.01). 血清抗H.pyloriIgG阳性的患者外周血CD3+， CD4+， CD4+/CD8+均下降，血清IL4，IL6，IFNγ ，TNF水平均上升，IFNγ / IL4比值下降(P<0.05). 结论： H.pylori是引起不孕不育的病原体之一，抗精子抗体和细胞因子水平升高，可能参与不孕症的发生.
 
　　【关键词】 螺杆菌，幽门；不育；抗精子抗体；T淋巴细胞亚群；细胞因子类；血清学

　　0引言

　　引起不孕的原因众多，由病原体感染致生殖道炎症、粘连和阻塞是主要原因之一，常见的病原体有衣原体、支原体. 目前，幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, H.pylori)与其相关疾病的研究已取得了较大的进展，但有关H.pylori与不孕的关系，国内外报道甚少［1-4］. 笔者检测不孕症患者外周血H.pyloriIgG抗体，发现其阳性率明显高于正常人群，且患者抗精子抗体、T细胞亚群及部分细胞因子水平亦发生改变，结果报告如下.

　　1对象和方法

　　1.1对象

　　200304/200502确诊女性不孕患者67例、男性不育患者58例，年龄25 ~48（平均27.6）岁；均排除配偶不孕可能，诊断参照以往进行［4-5］. 分别选择已分娩一健康孩子的妇女40名及住院新生儿父亲40名为对照组，抗H.pyloriIgG检测后，此80人中阴性者为T细胞亚群和细胞因子检测的对照组. 所有不孕不育症患者和对照组人群均经内镜检查无消化系统疾病.
 
　　1.2方法

　　分批采集不孕不育症患者和对照组人群晨起空腹静脉血，血清抗H.pyloriIgG检测采用ELISA法. H.pyloriIgG浓度≥12 kU/L为H.pyloriIgG抗体阳性，酶联免疫诊断试剂盒购自美国Bioseed公司（Hillsbough CA94010）. 抗精子抗体用ELISA法检测，AsAbIgG试剂盒由深圳安群生物工程公司提供，操作按说明书进行. 外周血CD3+，CD4+和CD8+检测用流式细胞术，操作参照Immunnotech公司试剂说明书进行，EPICSXL型流式细胞仪由美国贝克曼库尔特公司制造. 血清IL4，IL6，IFNγ ，TNFα ELISA检测按操作按说明书进行，试剂盒购自深圳晶美生物工程公司.
 
　　统计学处理： 计量资料用x±s表示，计量资料用率表示，用SPSS10.0统计软件包进行χ2检验和方差分析，P<0.05表示有统计学差异.

　　2.1血清抗H.pyloriIgG和AsAb不孕不育症患者和正常人群血清抗H.pyloriIgG阳性率依次为46.4%和27.5%，血清AsAb依次为21.6%和6.2%，差异均具有显著性(P<0.01，表1). 抗H.pyloriIgG阳性的患者中，AsAb阳性率为32.8%(19/58)；而抗H.pyloriIgG阴性的患者中，AsAb阳性率为11.9%(8/67)，前者明显高于后者，差异具有显著性(χ2=20.45, P<0.01)；关联性分析表明血清抗H.pyloriIgG阳性和AsAb阳性有关(χ2=7.96, P<0.01，表2). 表1不孕不育患者血清抗H.pyloriIgG和AsAb的阳性结果［略］表2不孕症患者血清抗H.pyloriIgG和AsAb的关系(略)

　　2.2T细胞亚群和细胞因子血清抗H.pyloriIgG阳性的不孕症患者外周血CD3+， CD4+， CD4+/CD8+均下降，血清IL4，IL6，IFNγ ，TNF水平均上升， IFNγ /IL4比值下降；而抗H.pyloriIgG 阴性的不孕症患者血清IL4水平上升（表3）. 表3不孕不育症患者外周血T细胞亚群和细胞因子水平（略）

　　3讨论

　　本文不孕不育症患者血清抗H.pyloriIgG，其阳性率为46.4%，表明本地区不孕症患者中H.pylori感染并不少见，尤其是女性不孕者中，52.2%血清H.pylori特异性抗体呈阳性. 抗H.pyloriIgG阳性的不孕不育症患者血清AsAb阳性率（32.8%）明显高于阴性患者，说明H.pylori感染后可能导致生殖道局部发生炎症反应、诱导AsAb产生参与不孕症的发生过程［5-7］. H.pylori感染后，患者外周血CD3+，CD4+百分率降低，表明T细胞活化障碍，使H.pylori感染持续存在；CD8+含量并未明显升高，提示CTL活性及数量未显著增加，感染者一般不出现严重的组织损伤. CD4+辅助性T细胞分为Th0，Th1和Th2三种亚型，由于缺乏非特异细胞表面标志，目前主要通过检测各亚型产生的不同细胞因子水平来评价其功能状态，常用IFNγ 代表Th1，IL4代表Th2［8-10］. 尽管抗H.pyloriIgG阳性患者血清IL4，IL6，IFNγ ，TNFα水平均上升，但IFNγ / IL4比值下降，可能因为IL4升高的幅度较IFNγ 更大，表明患者体内Th1/Th2平衡发生改变，即Th2功能较为亢进，机体体液免疫增强. 因此，H.pylori相关不孕症中，似乎以体液免疫反应为主. IL6和TNFα与体内炎症反应的发生相关. 亦有报道表明，IL6，TNFα和IFNγ 可调节女性生殖生理，IL6可抑制子宫内膜间质细胞增殖，TNFα和IFNγ 能诱导妊娠早期人绒毛膜滋养层细胞凋亡，表现为不孕或流产［11］.

　　【】

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