哮喘儿童Clara细胞分泌蛋白与肺功能的相关性及临床意义

           作者：温志红，谢庆玲，胡琼燕，杜华

【关键词】  Clara细胞分泌蛋白；肺功能；哮喘；儿童

　　Relationship between Clara cell secretory protein levels and lung function in asthmatic children

　　【Abstract】 AIM: To evaluate the clinical significances of Clara cell secretory protein (CCSP), and the correlation between CCSP levels and lung function in children with asthma. METHODS: Sera were collected from 29 cases during asthmatic attacks, among them 16 asthmatic children being in stable conditions after treatment, and 20 healthy children as controls. Serum CCSP concentrations were measured by a human CCSP enzymelinked immunosorbent assay (ELISA). Lung function was monitored in children with asthma. RESULTS:  Asthmatic children appeared significantly lower levels of CCSP in sera during asthmatic attacks ［(5.49±2.52） μg/L］ or in stable conditions［(9.25±3.38） μg/L］ as compared to healthy ones ［(12.31±3.90） μg/L, P<0.001］, espically those in acute asthma. Furthermore, there was a strongly positive correlation between serum CCSP and FEV1, FEV1/FVC, FEF25, FEF50, FEF75, PEFR in asthmatic children.CONCLUSION: CCSP may play a role in controlling inflammation in the airway and protecting the pulmonary function in chronic asthma.
 
　　【Keywords】 Clara cell secretory protein; lung function; asthma; child

　　【摘要】 目的： 探讨哮喘儿童Clara细胞分泌蛋白(CCSP)与肺功能的关系及临床意义. 方法： 采用酶联免疫吸附法检测29例哮喘急性发作期儿童血清CCSP水平，其中16例患儿经后于缓解期采血复查，另设20例健康对照. 同步检测哮喘儿童肺功能. 结果： 哮喘急性发作期、缓解期儿童血清CCSP水平［分别为(5.49±2.52) μg/L, (9.25±3.38) μg/L］均较健康对照组儿童低［(12.31±3.90) μg/L，P<0.001］，在急性发作期尤为明显. 哮喘儿童急性发作期、缓解期CCSP浓度与FEV1, FEV1/FVC, FEF25, FEF50, FEF75, PEFR均呈正相关. 结论： CCSP具有抗哮喘气道炎症作用；CCSP对肺功能可能起到保护作用.
 
　　【关键词】  Clara细胞分泌蛋白；肺功能；哮喘；儿童

　　0引言

　　Clara细胞分泌蛋白（CCSP）具有抗炎症、抗纤维化作用［1-2］，它与哮喘等呼吸系统疾病的关系日益受到重视. 而肺功能检测和结果判断是哮喘诊断和疗效判断的重要指标. 200407/200510，我们检测29例哮喘儿童血清CCSP水平，并探讨CCSP与肺功能的关系及临床意义.

　　1对象与方法

　　1.1对象29例患儿均为我院儿科住院或哮喘专科病人，符合支气管哮喘诊断标准［3］. 年龄3.5~11(平均5.8)岁；男18例，女11例；首次就诊未使用糖皮质激素. 对照组20(男13，女7)例；年龄3~12(平均6.2)岁；无喘息性疾病或特应体质；无糖皮质激素使用史. 哮喘组和对照组儿童均否认肝、肾、心疾病及内分泌疾病；第二性征均未发育；近1 mo无肺炎病史.
 
　　1.2方法所有29例哮喘儿童在急性发作期采集静脉血5 mL, 37℃水浴20 min, 1500 r/min离心10 min，取上清液分管置-70℃冰箱备检. 按GINA方案（全球哮喘防治的创议）治疗3~5 mo，患儿至少1 mo无咳嗽、气喘，进入临床缓解期的16例患儿抽血复查. 对照组儿童抽静脉血3 mL，标本处理及保存条件如前述. 同步测定肺功能，测试前首先指导患儿正确的呼吸、屏气及用力呼气；取站位，全身放松，含口嘴，夹鼻，连续测定3次，取患儿配合最佳的1次结果，并测定身高、体质量. CCSP采用酶联免疫吸附法（ELISA）法检测，试剂盒由Biovendor公司生产，严格按说明书操作. 肺功能采用德国JAEGER公司Master Screen系列肺功能仪，由专人负责检测.
 
　　统计学处理：  用SPSS11.0软件进行统计学处理，计量数据采用x±s表示，多组间比较用方差分析，两量间比较用LSD法，数据相关性采用Peason法行直线相关分析. P<0.05为有统计学差异.

　　2结果

　　2.1哮喘急性发作期、缓解期患儿及对照组CCSP水平三组间血清CCSP浓度比较有统计学意义（F=26.61, P<0.001）；与对照组比较，哮喘儿童急性发作期、缓解期CCSP水平均明显降低，差异有显著性（P均<0.001）；哮喘急性发作期CCSP水平较缓解期下降更为明显（P<0.001，表1).

　　表1哮喘急性发作期、缓解期患儿与对照组血清CCSP比较（略）

　　P<0.001 vs对照; dP<0.001 vs哮喘缓解期.

　　2.2CCSP与肺功能相关性哮喘急性发作期： CCSP与FEV1, FEV1/FVC,  FEF25, FEF50, FEF75, PEFR成正相关，r值分别为0.566, 0.596, 0.49, 0.5, 0.532, 0.447，前5项P均<0.01，最后一项P<0.05. 哮喘缓解期： CCSP与FEV1, FEV1/FVC,  FEF25, FEF50, FEF75, PEFR也成正相关，r值分别为0.536, 0.576, 0.594, 0.569, 0.668, 0.553，除了CCSP与FEF75比较P<0.01 ，其余P均<0.05.

　　3讨论

　　支气管哮喘发病机制尚未完全阐明，但“炎症学说” 得到医学界公认，其实质是无论在哮喘急性发作期还是缓解期，无论是何种类型哮喘，其气道慢性炎症都持续存在. 该种炎症是由嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞等炎症细胞，气道组织细胞以及这些细胞分泌产生的细胞因子、炎症介质相互作用而形成；在气道炎症反复的损伤和修复过程中会导致气道结构改变，形成气道重塑，导致不可逆的损害. 炎症机制的增强和/或抗炎机制的减弱在气道炎症的形成和加剧中起促进作用.
 
　　动物实验表明［4-6］，CCSP基因缺陷哮喘鼠之气道中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等炎症细胞浸润较野生鼠明显，白介素4, 5, 9, 13等炎症介质的基因表达也较野生鼠显著升高；并且气道黏膜增厚，黏膜下纤维增生；提示CCSP在哮喘气道炎症形成和气道重塑过程中起保护作用.
 
　　人类Clara细胞主要存在于小气道，随着气道分级Clara细胞密度逐渐增加，但肺泡不存在Clara细胞；哮喘主要病变部位在小气道，即哮喘病变部位Clara细胞最为丰富. CCSP是Clara细胞最主要分泌产物. 我们的资料显示，哮喘儿童急性发作期血清CCSP明显低于正常对照组，吸入糖皮质激素3～5 mo后CCSP水平有所回升，但仍低于正常儿童；说明CCSP与儿童哮喘的发生、相关. Shijubo等［7］研究发现，成人哮喘患者气道中CCSP阳性细胞比对照组少，并且CCSP水平与气道炎症细胞浸润程度呈反比，提示CCSP也有抗人类哮喘气道炎症的作用.
 
　　肺功能检测是一项非创伤性诊断技术，是临床判断哮喘患者病情程度、动态观察病情进展、推测预后、评价治疗措施及疗效的重要客观指标，在临床工作中具有重要价值［8-9］. 部分哮喘患者临床症状尚未出现前肺功能已有改变，因此，检测肺功能有利于早期诊断，早期用药，防止气道的不可逆损害. FEV1, FEV1/FVC, PEFR, FEF25～75是常用的肺功能测定指标，FEF25～75与FEV1相比更能反映小气道阻力. 我们研究发现，无论是哮喘急性发作期还是缓解期CCSP与肺功能均呈正相关，提示CCSP可能对肺功能有保护作用，这在哮喘动物实验中已得到证实，CCSP减少，气道反应性增高［4］.
 
　　吸入糖皮质激素是目前哮喘首选治疗方法，长期大剂量吸入激素对机体有潜在的危害. 肺功能检测对调整激素用量及决定激素疗程均具有临床指导意义. CCSP有抗哮喘气道炎症的作用，人重组CCSP有望成为哮喘治疗的新方法. 吸入糖皮质激素后CCSP有增加趋势，推测激素与CCSP可能有协同作用，作用机制是什么？这就是今后研究需解决的问题.

　　【】

　　［1］   Broeckaert F,ernard A.Clara cell secretory protein (CC16): Characteristics and perspectives as lung   peripheral biomarker ［J］. Clin Exp Allergy, 2000,30(4):469-475.

　　［2］   Yoshikawa s, Miyahara T, Reynolds SD, et al. Clara cell secretory protein and phospholipase A2 activity modulate acute ventilator induced lung injury in mice ［J］. J Appl Physiol, 2005,98(4):1264-1271.

　　［3］   中华医学会儿分会呼吸学组. 儿童支气管哮喘防治常规（试行）［J］. 中华儿科杂志，2004,42（2）:100-104.

　　［4］   Wang SZ, Rosenberger CL,  Espindola TM, et al. CCSP modulates airway dysfunction and host responses in an Ovachallenged mouse model ［J］. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2001,281(5):L1303-1311.

　　［5］   Daly HE, BaecherAllan CM, Barth RK, et al. Bleomycin induces straindependent alterations in the pattern of epithelial cellspecific marker expression in mouse lung ［J］. Toxicol Appl Pharmacol, 1997,142(2):303-310.

　　［6］   罗凤鸣，王曾礼，刘小菁，等. Clara细胞分泌蛋白在实验性气道炎症中的表达［J］. 华西医科大学,2002,33(4):511-514.

　　［7］   Shijubo N, Itoh Y, Yamaguchi T, et al. Clara cell proteinpositive epithelial cells are reduced in small airways of asthmatics ［J］. Am J Respir Crit Care Med, 1999,160(3):930-933.

　　［8］   Spahn JD, Cherniack R, Paull K, et al. Is forced expiratory volume in one second the best measure of severity in childhood asthma［J］? Am J Respir Crit Care Med, 2004,169(7):784-786.

　　［9］    Gilliland FD, Berhane K, Li YF, et al. Effects of early onset asthma and in utero exposure to maternal smoking on childhood lung function ［J］. Am J Respir Crit Care Med, 2003,167(6):917-924.