十二烷基苯磺酸钠对Wistar大鼠肝损害及血清酶逆向变化的影响

         作者：李胜联，周英琼，欧超燕，李成功　叶祖杨，黄翔，陆日美

【关键词】  十二烷基苯磺酸钠；肝损害；血清酶逆向变化

    【Abstract】 AIM: To study the possible hepatotoxicity of Wistar rats induced by sodium dodecyl sulfate（SDS）. METHODS: SDS was added into the drinking water for getting the final concentrations as 1000, 100, 10  and 0 g/L respectively. Then let the rats drink the contaminated water freely for 7 weeks. After the experiment, the rats were killed and ALT, AST, LDH, ALP and  γGT in the serum were assayed, and then the hepatic cells of the rats were examined in the way of pathomorphology. RESULTS: The activities of AST, LDH, ALT and γGT in 100 g/L group increased (P<0.05 vs the control group), and then decreased in 1000 g/L group (P<0.01 vs 100 g/L group); the activity of ALP in the experimental groups made no statistical significance compared with that of the control group.The pathological examination showed that the pathologic change of the liver tissues in the 10 g/L group made no difference from that in the control group, and the hepatic cells suffered from mild edema, fatty degeneration in the 100 g/L group; while the hepatic cells suffered from moderate edema and fatty degeneration and sporadic necrosis lesions in the 1000 g/L group. CONCLUSION: Longtime drinking the water containing SDS will do harm to the liver and cause reverse change of enzymes in the serum.

    【Keywords】  sodium dodecy/benzene sulfonate; hepatic lesion; reverse change of  seroenzyme

    【摘要】 目的：  探讨十二烷基苯磺酸钠(SDS)对Wistar大鼠肝脏的影响. 方法：  在饮水中加入SDS，使其终浓度分别为1000 g/L, 100 g/L, 10 g/L, 0 g/L，持续让动物自由饮用7  wk. 实验结束后，处死动物，测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）和γ谷氨酰转肽酶活性（γGT），并作肝组织病理形态学检查. 结果： 100 g/L SDS剂量组的ALT, AST, γGT与LDH活性升高（与对照组比较，P<0.05），而1000 g/L SDS剂量组的酶活性减低（与100 g/L剂量组比较，P<0.01）；各实验组的ALP活性与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）.  肝组织病理检查显示，10 g/L SDS剂量组肝组织病理形态学变化与对照组相似，100 g/L SDS剂量组肝细胞轻度水肿、脂肪变性，1000 g/L SDS剂量组肝细胞中度水肿、脂肪变性，有散在灶性坏死. 结论： 长期饮用含SDS的水对肝脏会有一定的损害，并产生血清酶的逆向变化现象.

    【关键词】 十二烷基苯磺酸钠；肝损害；血清酶逆向变化

       合成洗涤剂是常见的环境污染物. 洗衣粉是洗涤剂中比例最大、使用量最多、接触人群最广的一种. 而洗衣粉中的主要原料是十二烷基苯磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,  SDS). 因此,研究SDS对人体健康的影响具有十分重要的意义. 目前，国内有SDS对机体健康影响有些报道［1-9］,但结论不一致. 我们通过探讨SDS对Wistar大鼠肝功能的影响，为洗衣粉对人体健康影响的评价提供毒依据.

    1材料和方法

    1.1材料雌性Wistar大鼠36只，体质量(220±15) g，由广西医科大学实验动物中心提供，实验动物生产许可证号： SCXK桂20030003. SDS(上海化学试剂采购供应站联营中心化工厂，CP)，血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）及γ谷氨酰转肽酶活性（γGT）活性测定试剂盒(上海科华东菱诊断用品有限公司). 全自动生化分析仪（亚培，日本）.

    1.2方法

    1.2.1动物分组将动物随机分为4组，每组9只. 在饮水中加入SDS，使其终浓度分别为1000 g/L, 100 g/L, 10 g/L, 0 g/L，持续染毒7  wk. 染毒结束后断头处死动物，取血分离血清.

    1.2.2血清酶活性检测分别测定ALT（IFCC法）, AST（IFCC法）, LDH（LP法）, ALP（IFCC法）及γGT（IFCC法），酶活性单位以nkat/L表示.

    1.2.3肝脏组织病理学检查染毒结束后处死动物，取肝组织常规染色及光镜病理检查.

    统计学处理： 各组间方差齐则采用方差分析，否则采用秩和检验，所用统计软件为PEMS3.1 for Windows.

    2结果

    2.1不同剂量的SDS对饮水染毒大鼠血清酶活性的影响100 g/L SDS剂量组的ALT, AST, γGT与LDH活性升高（与对照组比较，P<0.05，表1），而1000 g/L SDS剂量组的酶活性减低（与100 g/L剂量组比较，P<0.01）；各实验组的ALP活性与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）. 表1十二烷基苯磺酸钠（SDS）饮水染毒Wistar大鼠血清酶活性

    2.2光学镜病理组织检查10 g/L SDS剂量组肝组织病理形态学变化与对照组相似. 100 g/L SDS剂量组肝细胞轻度水肿、脂肪变性. 1000 g/L SDS剂量组肝细胞中度水肿、脂肪变性，有散在灶性坏死(图1).

    3讨论

    虽然SDS易于被微生物降解，但由于SDS的使用量大，涉及面广以及环境污染等问题严重，必然会通过饮水饮食和皮肤吸收等途径进入人体. 以往SDS对机体作用的报道不一致，甚至有的结论正相反.有学者的结论主要是报道SDS对机体的有益作用，如李阳等［1］报道一定浓度(20 mg/L)的SDS在复合污染体系中能减弱涕灭威的毒性. 海春旭等［2］报道SDS对四氯化碳激发的微粒体脂质过氧化反应、细胞色素P450、细胞色素C还原酶和NADPHADPFe2+活化的耗氧量及氨基吡琳脱甲基酶有一定影响，主要表现为抑制作用，即抗氧化作用. 王红兵等［3］报道400 mg/kg剂量的SDS可抑制小鼠体液免疫功能. 张莹辉等［4］报道SDS使猪肝脏SOD酶活性减低，肝组织丙二醛、NO和胆固醇含量升高. 李少群等［5］发现SDS实验组睾丸组织病理形态学改变随着染毒剂量和时间的增加而明显加重，生精细胞线粒体凝聚性空泡变性；SDH, LDH, ACP酶活性显著下降. 雷鸣等［6］报道SDS对澎泽鲫鳃、肝脏中的Na+K+ATPase和Mg2+ATPase活性影响均表现出抑制作用，当SDS质量浓度为2.0 mg/L时，对鱼鳃中ATPase活性有显著抑制，对肝脏ATPase活性的抑制达到极显著水平. 用量低于4.0 mg/L时，SDS对澎泽鲫鳃、肝脏组织中SOD具有激活作用；在SDS用量不低于4.0 mg/L时，对鳃、肝脏组织中SOD活性的影响却表现出抑制作用. 即对鳃和肝脏组织中SOD活性的影响表现为双向性.

    这种SDS的生物反应的双向性也体现在本实验中. 我们的研究结果表明，饮用水中的SDS在100 g/L剂量以内，会导致肝细胞轻度水肿、脂肪变性，同时使血清AST, LDH, γGT和ALT活性升高；而1000 g/L SDS剂量组肝细胞组织学病理形态变化比10 g/L及100 g/L SDS剂量组发生较重的病理形态学变化，如肝细胞水肿、脂肪变性和散在灶性坏死，但血清AST, LDH, γGT和ALT活性却减低. 这种在肝损害发生时，ALT， AST， LDH， γGT及胆碱脂酶等血清酶的活性并非均升高，有时甚至个别发生降低的现象，或无肝损害时，出现血清酶活性持续升高的现象可称为血清酶活性逆向变化现象. 该现象在有些学者的实验数据中也有所反映，如夏清林等［7］用蔬果洗涤剂625, 1250, 2500 mg/kg对SD大鼠连接经口染毒3 mo，发现血清LDM同功酶在中剂量组最高.  该实验结果也与本研究结果相似，即中剂量组酶活性最高（与对照组比较，P＜0.05），而高剂量组酶活性反而比中剂量组酶活性低. Todorovic等［8］报道血清ALP活性在大鼠铅中毒时，比对照组低（P＜0.05）. 崔京伟等［9］报道TNT组血清ALT和AST活性明显低于对照组. 韦耀东等［10］在观察亚急性砷中毒对大白鼠部分生化指标影响时也发现血清ALT活性低于A： 0 g/L SDS；B： 10 g/L SDS组；C： 100 g/L SDS组；D： 1000 g/L SDS组.

    对照. 这些实验数据均说明了血清酶活性逆向变化现象的发生决非偶然. 产生血清酶活性逆向变化现象的机制可解释为血清酶活性受到某些物质的抑制、激活或蛋白合成能力降低等原因. 其中血清酶活性的抑制应该是产生血清酶活性逆向变化现象机制的主要原因. 我们推测很有可能是SDS的代谢产物或SDS中毒产生的机体内源性物质如NO等的抑制作用，有必要进一步研究. 体外血清酶活性受到抑制的现象已经有人报道，血清ALT活性在体外可受铅的抑制［11］. 覃甲仁［12］报道ALT和AST活性受其他因素如NO等因素抑制，当NO2-浓度＞0.01 mmol/L时，对ALT及AST完全抑制；即使终浓度为0.0001 mmol/L时仍具有抑制作用(对ALT, P＜0.05；对AST, P＜0.01）.

    综上所述，我们认为SDS对生物体的影响在一定的剂量范围内表现为双向性，而这种双向性在本实验具体体现为同时出现了血清酶活性顺向与逆向变化现象. 后者的存在使有些指示肝损害血清酶的活性在大剂量SDS中毒时，掩盖了肝损害的真相，这应引起我们的重视.

       【】

    ［1］ 李阳，张清敏，戴树桂，等. 涕灭威及其复合污染对斑马鱼胚胎DNA的影响［J］. 应用生态学报,2003,14(6):982-984.

    ［2］ 海春旭，Slat TF. 十二烷基硫酸钠对肝微粒体系统的抗氧化作用［J］. 公共卫生学报,1993,12(3):175-176.

    ［3］ 王红兵，谈行健. 十二烷基苯磺酸钠的免疫毒性［J］. 环境与健康杂志,1991,8(2) :76-82.

    ［4］ 张莹辉，王艳国，刘松年，等. 合成洗涤剂对猪肝脏的损伤作用［J］. 中国公共卫生, 2005,21(3):346.

    ［5］ 李少群，莫自耀，梁晓芸，等. 直链烷基苯磺酸钠对小鼠睾丸细胞毒性作用研究［J］. 职业医学,1994,21(5):24-25.

    ［6］ 雷鸣，廖柏寒，娄敏，等. LAS对澎泽鲫鳃及肝脏ATPase和SOD活性的影响［J］. 湖南农业大学学报,2004,30(3):272-274.

    ［7］ 夏清林，李少群，惠霞，等. 蔬果洗涤剂的亚慢性毒性研究［J］. 预防医学，2000,27(1):62,66.

    ［8］ Todorovic T, Vujanovic D. The influence of magnesium on the activity of some enzymes(AST, ALT, ALP) and lead content in some tissues［J］. Magnes Res,2002,15(34):173-177［PMID:12635869］.

    ［9］ 崔京伟，常元勋，郭群，等. 大鼠枯否细胞活化与TNT肝毒性的关系［J］. 卫生毒杂志,2000,14（2）:103-107.

    ［10］ 韦耀东，邓如平，陈婉兰，等. 亚急性砷中毒对大白鼠部分生化指标影响［J］. 右江民族医学院学报，2004,26(5):631-632.

    ［11］ 李胜联，胡万达，肖茂磊，等. 血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性与铅的肝毒性关系的研究［J］. 中华劳动卫生职业病杂志,1999,17（1）:46-47.

    ［12］ 覃甲仁. NO含量与NOS活性对ALT与AST活性影响的研究［J］. 广西医科大学学报,1999,16(5):608-610.