甲氧苄啶与茜素的荷移反应研究
【摘要】 通过甲氧苄啶与茜素的电荷转移反应来测定甲氧苄啶氯化钠注射液中的有效成分。在乙醇与水介质中，甲氧苄啶与茜素形成1：1型络合物，产物最大吸收波长545nm，表观摩尔吸光系数为4.84×103L·mol-1·cm-1,药物浓度在10～70mg·L-1范围内呈线形关系。方法简便快捷，易于操作，在实际工作中具有应用价值。
【关键词】 甲氧苄啶； 茜素； 电荷转移反应； 分光光度法
甲氧苄啶是一种抗菌广谱药，主要用于肺部感染、尿道感染、肾炎、肠炎和伤寒等疾病。目前测定甲氧苄啶药物的方法有HPLC法［1～3］、荧光分光光度法［4］、分光光度法［5］、毛细管电泳法［6］、非水滴定法［7］等。本研究首次利用甲氧苄啶与茜素之间的电荷转移反应来测定甲氧苄啶的含量，此方法简便快捷，条件易于控制，灵敏度高，在可见光区即可完成测定，用拟定方法测定药物含量与结果［5］一致。
1 实验部分
1.1 主要仪器与试剂
7590型UV?VIS单光束自动扫描分光光度计（山东高密分析仪器厂）；752S紫外分光光度计（上海棱光技术有限公司）；HH?S数显恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器厂）；超级恒温器（重庆试验设备厂）；FA1104N 天平（上海精密仪器有限公司）。
3×103mol·L-1茜素乙醇溶液：准确称取0.1440g茜素，用乙醇充分溶解后转移至200ml定量瓶中，定容，备用。
0.5g·L-1甲氧苄啶乙醇液：准确称取甲氧苄啶对照品50mg，加入乙醇，充分溶解，定容于100ml容量瓶中，备用。
本实验所用试剂均为分析纯。
1.2 实验方法
准确量取0.5g·L-1甲氧苄啶适量（≤0.7ml）于5ml比色管中，加入茜素乙醇溶液2.5ml，用溶剂稀释至刻度（控制乙醇?水的体积比为7：3），溶液混匀，待充分反应，以相应的试剂空白作参比，于室温下用1cm比色皿在545nm处测吸光度。
2 结果与讨论
2.1 实验条件的选择
2.1.1 吸收光谱 按照“实验方法”所示配制溶液，以相应的试剂空白做参比，将配制好的溶液在7590型分光光度计上扫描，测得络合物的λmax=545nm, 茜素的λmax=435nm，甲氧苄啶在可见光区没有吸收，见图1。
图1 络合物（2）与试剂（1）的吸收光谱（略）
2.1.2 反应时间的选择 按照实验所确定的方法配制一组溶液，分别于反应后不同时间测定反应液的吸光度值，测定的结果见表1。数据显示，反应不随反应时间的变化而变化，而且吸光度值可以稳定12h以上。因此，反应液配制好以后即可进行测定。
2.1.3 反应温度的选择 按照实验方法配制一系列溶液，分别将其放入不同温度的恒温水浴中保温10min，取出后以流水冷却至室温，然后测定其吸光度值，数值如表2。结果表明，反应基本温度的变化而变化。因此，配制好溶液，在室温下即可进行比色反应。
表1 反应时间的选择（略）
表2 反应温度的选择（略）
2.1.4 试剂用量的选择 在确定其它反应条件不变的情况下，改变茜素的用量，分别于一定量的甲氧苄啶溶液中加入不同量的茜素溶液，配制一系列的反应液，然后测定其相应的吸光度值，结果如表3。数据表明，当茜素的用量为2.5ml时，反应进行完全。当试剂用量超过此用量时，由于背景颜色的加深，吸光度值反而随着颜色的加深而降低。
表3 试剂用量的选择（略）
2.1.5 溶剂的选择
分别选用甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、水、二氯甲烷等试剂做此反应体系的溶剂，通过实验发现，选用乙醇与水的混合溶液的做溶剂，反应体系的灵敏度增高。又通过进一步的实验证实，当乙醇与水的体积比为7：3时，反应的吸光度值最高，随着乙醇量的减少，溶液出现混浊，甲氧苄啶析出。因茜素是酸碱指示剂，加入酸碱即变色，所以整个反应体系尽管用水做溶剂，也无须调节酸度。
表4 溶剂的选择（略）
2.2 方法的重现性考查
按照实验方法所示，平行配制6组溶液，于实验确定的最佳条件下反应。当甲氧苄啶的浓度为20mg·L-1，相对标准偏差为1.06%（n=6)。
2.3 比尔定律线性范围
按实验确定的最佳条件进行反应，分别加入不同浓度的甲氧苄啶溶液。实验得出，甲氧苄啶的浓度在10～70mg·L-1范围内与吸光度呈线性关系，其回归方程为A=-0.001714+0.3829C，相关系数为0.9996，表观摩尔吸光系数为4.84×103L·mol-1·cm-1，桑德尔灵敏度为0.05998ug·cm-2。
2.4 络合物组成的测定
甲氧苄啶中含有一个嘧啶二氨基，是一个良好的给予体，而茜素又是良好的电子接受体，因此两者能发生电荷转移反应，形成n?π型络合物。应用摩尔比法和等摩尔连续变换法测得茜素与甲氧苄啶反应生成的络合物的组成比为1：1，反应式可推测如下：
2.5 回收率测定
按照实验方法，取已测得实际含量的适量样品于5ml比色管中，配制反应溶液，然后向反应液中加入0.2mg甲氧苄啶标准液，测定其吸光度值，然后根据测定值与实际含量的结果回收率。其中样品1的回收率为99.6%（n=3），样品2的回收率为100.2%（n=3）。
2.6 试样的测定
甲氧苄啶氯化钠注射液为一复方制剂，它的另一成份为氯化钠，对此反应无干扰，因此可直接测定注射液中药物的有效含量。
表5 样品中甲氯苄啶的测定结果（n=3）（略）
3 小结
甲氧苄啶中含有一个嘧啶二氨基,可与茜素这一缺电子物质发生反应,颜色发生改变，便于用分光光度法测定。本方法简便快捷，样品处理简便，利用本方法测定样品，测定结果与方法［5］基本一致，可用于药品制剂含量的快速测定。
【文献】
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