107例直肠癌Cox-2，p53及PCNA表达分析
作者：叶民 卢洪胜 干灵红 蔡菊芳
【摘要】 ［目的］ 探讨环氧化酶2(Cox-2)，p53及增殖细胞核抗原（PCNA）在直肠癌中表达的意义。［方法］ 对107例存档直肠癌标本，分别采用Cox-2，p53及PCNA三种单克隆抗体进行免疫组化染色(SP法)。［结果］Cox-2，p53及 PCNA阳性表达率在肿瘤有淋巴结转移（阳性表达率分别为80.9%、68.3%、84.1%）直肠癌病例中分别显著高于肿瘤无淋巴结转移（52.2%、47.7%、40.9%），在Dukes’C期患者阳性表达率分别显著高于Dukes’A、B期(P<0.05)。［结论］ 直肠癌 Cox-2，p53及PCNA表达与淋巴结转移和疾病进展等相关。
【关键词】 直肠肿瘤 环氧化酶2 p53 增殖细胞核抗原 预后
An Analysis of Expression of Cox-2, p53 and PCNA in 107 Cases with RectalCarcinoma
Abstract: ［Purpose］ To investigate the expression of Cox-2, p53 and PCNA in rectal carcinoma. ［Methods］ Expression of Cox-2, p53 and PCNA were detected with monoclonal antibodies by immunohistochemical SP staining in 107 cases with rectal carcinoma. ［Results］ The positiveratesofCox-2, p53 and PCNA in cases with lymphnode metastasis(80.9%、68.3%、84.1%) were significantly higherthanthosewithout lymphnode metastasis（52.2%、47.7%、40.9%） respectively andthe positve rates in Dukes’ stage C cases were significantly higher than those in Dukes’stage A and B(P<0.05).［Conclusion］ The expression of Cox-2, p53 and PCNA is closed related to lymphnode metastasis and state of illness in rectal carcinoma.
Key words: rectal neoplasms；Cox-2;p53;PCNA; prognosis
研究表明直肠癌的发生是以多个原癌基因激活和抑癌基因失活为基础的多步骤多阶段过程，并通过其表达产物作用于细胞生长、分化及代谢过程，最终导致癌变[1]。本实验采用免疫组织化学方法检测环氧化酶2（Cox-2），p53及增殖细胞核抗原（PCNA）在直肠癌中的表达。
1 材料与方法
1.1 材 料
1996～2004年间浙江省台州外科手术切除直肠癌标本107例，其中男性63例，女性44例，平均年龄56.4岁（42～76岁）。按WHO直肠癌组织学分型（1999年）：乳头状腺癌9例，管状腺癌55例，黏液腺癌16例，印戒细胞癌11例，低分化腺癌16例。其中乳头状腺癌和管状腺癌1级组织学分级为高分化，管状腺癌2级及黏液腺癌组织学分级为中度分化，低分化腺癌和印戒细胞癌组织学分级为低度分化。用Dukes’临床分期进行分期。
1.2 方 法
全部标本均经10%福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋。免疫组化染色（SP法）所用鼠抗人Cox-2，p53及PCNA单克隆抗体购自福州生物技术有限公司。
1.3 结果判定
主要考虑阳性细胞数及阳性信号出现的位置并将阳性细胞＜30%为“-”，31%~60%为“+”，≥61%为“++”，阳性信号定位：Cox-2染色阳性细胞为胞浆染成棕黄色至深棕色；p53及PCNA染色阳性细胞为胞核染成棕黄色至深棕色[1]。
1.4 统计学处理
SPSS统计软件包χ2检验。
2 结 果
Cox-2阳性表达率在不同分化程度、浸润深度的直肠癌患者中比较均无显著性差异（P>0.05），与Dukes’分期及淋巴结转移相关（P<0.05）。p53阳性表达率与分化程度及浸润深度无关，但LN（+）直肠癌的p53阳性表达率明显高于LN（-）病例（P<0.05），且Dukes’A、B期直肠癌的p53阳性表达率显著低于Dukes’C期病例（P<0.05）。PCNA阳性表达率与肿瘤分化程度、浸润深度无关，但与淋巴结转移、Dukes’分期有关（P<0.05）。见表1。
3 讨 论
环氧合酶(cyclooxygenase ,COX) 又称为环氧化酶和PG内过氧化物合成酶。COX的主要功能是将花生四烯酸转变成前列腺素(PG) 。PG参与体内的许多生理和病理过程，高水平的PG特别是PGE2对多种癌细胞的增殖、侵袭、转移具有促进作用[2]。COX家族的两个亚型在体内的表达方式不同，COX-1在体内大多数组织中持续表达,而COX-2 的表达受细胞因子、生长因子和其他物质的诱导。在正常生理状态下，COX-2 在体内处于一个非常低的水平。COX-2 的高表达与许多病理过程密切相关,机体在内毒素、生长因子、激素和肿瘤促进因子的作用下, 特异性的COX-2可高表达[3]。本研究表明伴有淋巴结转移直肠癌COX-2表达率显著高于无淋巴结转移病例，Dukes’C期病例的COX-2表达率为80.9％，支持基因在转移性癌细胞系呈高表达而非转移性癌细胞低表达，这与报道相似[4]。
p53是重要的抑癌基因，是迄今为止发现的突变率最高的抑癌基因。野生型p53有抑制肿瘤细胞生长作用，但突变型p53却失去抑癌作用[5]。本文结果证实伴有淋巴结转移病例p53蛋白表达比无淋巴结转移增强，Dukes’C期病例比Dukes’A+B期阳性率高，此结果支持文献报道结果[6]。
PCNA是一种反映出现在增殖状态细胞核内的酸性蛋白质，并且PCNA表达指标高者与淋巴结转移、肿瘤浸润深度及组织学类型有关[7]。本研究表明LN（+）直肠癌PCNA显著高于LN（-），支持PCNA表达情况与直肠癌转移有关[8]。
据此，我们可以得出，Cox-2，p53及PCNA与直肠癌的浸润及转移有关，其作用机制属于基因层面的调控，三者通过相互之间的作用共同促进肿瘤的进展。由于淋巴结转移、Dukes’分期与直肠癌的预后直接相关，而Cox-2，p53及PCNA在LN（+）、Dukes’C期中出现高表达状态，因此直肠癌Cox-2，p53及PCNA阳性病例提示预后不佳。
【文献】
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