人类乳头状瘤病毒感染和食管癌发生的相关性研究路径

          作者：师晓天　路常东　王中　崔建国　柯扬　蔡虹　陈克能　宁涛

【摘要】  　　简介安阳市肿瘤与北京大学临床肿瘤学院，开展人类乳头状瘤病毒（HPV）感染和食管癌发生的相关性研究课题的设计思想，阐述立项依据、技术路线、主要研究内容以及关键问题等。

【关键词】  食管肿瘤　人类乳头状瘤病毒　感染　安阳

　　自1998年以来，北京大学临床肿瘤学院肿瘤所与安阳市肿瘤医院联合，在安阳市西部食管癌高发区，通过对村落35岁以上年龄人群采用传统的食管拉网采集食管脱落上皮细胞，并利用安阳市肿瘤医院的食管癌术后病理蜡块，用PCR和原位杂交的方法从食管癌组织、食管上皮轻度、中度到重度增生以及正常食管的脱落细胞中检测出HPV16、18DNA，且发现HPV感染率与病变程度呈正相关关系。2006年5月开始计划用5年时间对高发区10 000人群，开展相关人体器官HPV感染普查和实验室工作，以探讨人类乳头状瘤病毒（HPV）感染和食管癌发生的相关性。

    1   背   景

    食管癌是一种预后不良的常见恶性肿瘤，5年生存率仅在8%左右。华北太行山地区是食管癌高发区，安阳处于太行山脉食管癌高发核心区域，年发病率居全国之首。

    20世纪70年代研究结果认为饮食因素中缺乏起保护作用的营养因素、摄入过多霉变食物以及食用含亚硝酸盐食物是食管癌高发的重要因素。但医科院肿瘤所与美国国立癌症研究所在河南安阳（林县）的合作研究表明饮食因素与食管癌的相关性并不能完全确定。针对高发人群的流行病学调查发现，食管癌有家族聚集现象，但并不具备典型的单基因遗传病所表现的孟德尔遗传模式。这表明环境因素或共同的家庭生活习惯可能与食管癌高发相关。

    1998年以来北京大学临床肿瘤学院肿瘤所，大胆设想食管癌高发区人群HPV感染与食管癌发病有关，经与安阳市肿瘤医院共同连续多年在安阳市西部乡村采集高发人群食管脱落细胞和血液，发现高危人群中食管上皮细胞中HPV感染明显高于低发区人群，为进一步开展工作奠定了基础。

    2   立项依据

    人类乳头状瘤病毒（HPV）是第一个被确定为致肿瘤的病毒因素。宫颈癌的研究结果证明HPV具备作为肿瘤病因的所有特征。关于HPV感染与食管癌的关系是由Syrjanen于1982年首次提出，以后的相关研究进一步提供的论点有：良性鳞状细胞病变中存在HPV感染；牛感染牛型乳头状瘤病毒BPV-4可造成牛消化道良性肿瘤或癌，但有多项研究在中国人食管癌组织中检测到高危型HPV，并在多个人群的食管癌患者血清中测定出HPV抗体的存在。实验研究也表明，HPV16的两个癌基因可在体外使人食管上皮细胞发生恶性转化。

    我们此前采用食管脱落细胞学检查发现河南省高发区食管癌患者（80%）及正常志愿者（46%）以及非癌食管上皮细胞均有HPV高危型（16、18）感染。在正常志愿者中感染率随细胞癌前病变的加重而增高。先期研究中一项工作是在我国8个地区（含高发区安阳、苏州等和低发区黑龙江、甘肃等）开展的病例对照研究，在2 000例正常食管上皮中和1 500例食管癌组织中测定HPV感染率，发现癌组织HPV16、18感染率显著高于非癌正常食管上皮（OR=5.4）。高发人群和低发人群的区别在于前者的正常人群感染率亦很高。

    3   拟解决的关键问题和主要研究内容

    要确立HPV感染是这一地区食管癌发生的病因，必须解决下述问题：①HPV感染和食管癌发生在感染人群中的相对时间关系（感染的最早年龄、年龄高峰、感染的持续性和消涨）；②HPV在食管中感染的来源、传播途径；③高发区食管癌和欧美低发区食管癌中HPV的差异；④与食管HPV感染相关的行为特征。

    为了阐述以上问题，我们拟在河南安阳地区进行整体抽样进行队列研究。目的：①探讨HPV在正常人群食管中的感染率、HPV感染与食管癌癌前病变、食管癌之间的关系；②探讨HPV与食管、口腔、宫颈感染的关系，以及家族成员中感染的关系，描述传播途径及伴随的行为特征；③探讨可能存在于安阳地区HPV16型的变异体；④探讨HPV感染，血清HPV16 E6抗体阳性，及食管上皮病变间的关系；⑤对人群进行HPV疫苗预防注射，观察对食管癌发生的影响。

    主要受检者为安阳地区10 000名25岁～65岁男女居民，无肿瘤、心脏病、传染病（肝炎、艾滋病）、精神障碍等病症。

    现场流程：确定参加本项目的村民名单(参加者应占合格人员的85%以上)。课题主要在安阳现场、安阳市肿瘤和北京大学肿瘤中心分别进行。现场工作包括：受检人员的确定、登记、问卷、采血、口腔检查及脱落细胞收集，胃镜检查及活检标本的收集，宫颈检查及宫颈脱落细胞的收集。安阳市肿瘤医院主要承担部分现场组织工作，血液临床检测，宫颈和胃镜临床检查，以及食管活检的病检查。北京大学肿瘤中心承担课题设计，现场标本收集、实验室检测以及统计学分析。预定跟踪时间为6年/人。期间需要对每名被调查者进行4次面谈和体检。4次时间为：首次检查，2年随访，4年随访，6年随访。

    4   组织结构和资金投入

    2006年3月北京大学医学部与安阳市肿瘤医院共同商定，在安阳市肿瘤医院建立北京大学临床肿瘤学院肿瘤中心安阳现场食管癌研究基地，设有中心主任1人和现场相关负责人若干。中心工作为组织一支联合现场工作队，聘用相关学科专家和工作人员，掌握项目要求和操作规程。建立现场被普查村落所在当地乡政府和村委会的联络协调机制，特别是加强对村委会的组织协调工作，认真做好宣传工作。

    课题预计2006年～2010年共5年完成，课题预算600万~900万元人民币，主要资金来源于北京大学医学部肿瘤临床学院申请的国家基金项目，部分资金来源于安阳市肿瘤医院、肿瘤所资助，其余部分资金争取安阳市人民政府市校合作项目支持。课题完成总资金中，用于安阳现场所需资金在200万元以上。