Podoplanin和血管内皮生长因子?C 在结肠癌中的表达及与淋巴结转移的关系

             作者：彭亦良,梁后杰,刘丽梅,杨景,段光杰

【摘要】  目的 探讨结肠癌组织中Podoplanin、血管内皮生长因子?C (VEGF?C) 表达的相互关系及其在淋巴结转移过程中的作用和可能机制。方法 应用免疫组化法检测48 例结肠癌组织和10 例癌旁组织中Podoplanin及VEGF?C 的表达水平。结果 (1) 结肠癌组织中Podoplanin、VEGF?C 阳性表达率分别为56.3%、64.6%，显著高于癌旁非癌组织的10%(P<0.05) 。(2) Podoplanin、VEGF?C的表达与结肠癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM 分期相关(P<0.01或P<0.05)，与结肠癌的分化程度、远处转移无关(P>0.05)。(3) Podoplanin、VEGF?C 之间表达呈正相关(r=0.425,P<0.01) 。结论 结肠癌组织中Podoplanin、VEGF?C 表达均增高且呈正相关，两者在结肠癌淋巴结转移中有协同效应，共同促进结肠癌的淋巴转移。

【关键词】  结肠肿瘤; Podoplanin;血管内皮生长因子?C;淋巴结转移

    The Expression of Podoplanin/VEGF?C and Lymph Node Metastasis in Human Colon Carcinoma

      Key words：Colon neoplasm;Podoplanin;Vascular endothelial growth factor?C (VEGF?C);Lymph node metastasis

    Podoplanin是新近发现的一个淋巴管内皮细胞特异性标志物[1，2]，但目前国内外关于Podoplanin与肿瘤淋巴结转移之间关系的研究报道少见，也未见有关Podoplanin、VEGF?C表达的相互关系及与结肠癌淋巴结转移的相关研究。本研究着重探讨Podoplanin、VEGF?C 表达在结肠癌淋巴结转移过程中的作用和可能机制及其临床意义。

    1资料和方法

    1.1标本收集本院2004年1月～2004年12月间资料完整的手术切除的结肠癌标本48 例，癌旁非癌组织10 例。其中男性36 例，女性12 例。年龄28～72 岁，中位年龄58.7岁。

    1.2主要试剂兔抗人Podoplanin多克隆抗体(Santa Cruz,USA) 工作浓度为1∶50,兔抗人VEGF?C 多克隆抗体(Zymed,USA) 工作浓度为1∶25。SP 试剂盒购于北京中山生物技术有限公司。

    1.3免疫组化染色按试剂盒说明操作。

    1.4结果判断以胞浆呈现棕黄色为阳性细胞，5个高倍镜视野中阳性细胞所占的比例，以定位明确、染色明显，平均20%以上细胞染色的组织切片视为表达阳性。

    1.5统计学处理数据用SPSS 10.0统计软件包进行处理，以

    2结果

    2.1Podoplanin、VEGF?C 的表达在癌旁组织中Podoplanin、VEGF?C 仅在少量上皮细胞中表达， 阳性率均为10%(1/10) 。癌组织中Podoplanin、VEGF?C阳性表达率分别为56.3%、64.6%(27/48、31/48)，明显高于癌旁非癌组织，差异均有显著性(P<0.01),见图1、2。

    2.2结肠癌Podoplanin、VEGF?C 蛋白的表达与临床病理参数的关系  Spearman 等级相关分析表明：Podoplanin与淋巴结转移呈正相关(r=0.396,P<0.01) ， VEGF?C与淋巴结转移亦呈正相关(r=0.430,P<0.01)；而且Podoplanin与VEGF?C表达之间呈明显的正相关(r=0.425,P<0.01),见表1。

    2.3Podoplanin蛋白表达与VEGF?C 蛋白表达的关系Podoplanin阳性表达组中VEGF?C 阳性表达率为74.1%(20/27)，Podoplanin阴性表达组中VEGF?C 阳性表达率为45.6%(5/11)，有显著性差异(P<0.05)。Spearman等级相关分析表明两者呈正相关(r=0.425,P<0.01)。表1结肠癌Podoplanin、VEGF?C表达与临床病理参数的关系

    3讨论

    目前对肿瘤淋巴转移的分子调控机制所知甚少，本研究结果表明：56.3%的结肠癌中存在Podoplanin蛋白的表达，并且淋巴结转移组Podoplanin表达显著高于淋巴结无转移组，两者差异有显著性，Podoplanin表达与淋巴结转移相关。由于淋巴结转移是影响预后的独立因素，Podoplanin表达增高常提示预后较差。

    报道， VEGF?C与其受体VEGFR?3结合后可通过MEK/ERK和PI3/Akt途径引起发育中的淋巴管内皮细胞增生、迁移及抑制内皮细胞的凋亡，从而发挥促淋巴管新生的作用[3，4]。同时，VEGF?C在很多肿瘤中均有阳性表达，其在肿瘤中的高表达与肿瘤淋巴管新生及淋巴结转移密切相关[5?7]。实验也证实了VEGF?C 高表达与结肠癌淋巴结转移呈正相关，研究还发现，在淋巴结转移组Podoplanin、VEGF?C阳性表达率均显著高于淋巴结无转移组，两组之间差异有显著性(P<0.01)，而且，Podoplanin与VEGF?C 表达呈正相关，提示两者在结肠癌淋巴结转移中起协同作用，可能在它们的共同作用下，癌细胞的侵袭力及向淋巴管的渗透能力增强，使得癌细胞更容易转移至局部淋巴结并形成转移灶。因此，Podoplanin、VEGF?C 抑制剂的研究将有可能为结肠癌的预防和开辟新的途径。

【文献】
  ［1］ Breiteneder GS,Soleiman A,Kowalski H,et al.Podoplanin as a specific marker for lymphatic endothelium［J］.Am J Pathol,1999,154(2):385?394.

［2］ Schoppmann S,Brirner P,Studer P,et al.Lymphatic microvessel density and lymphovascular invasion assessed by anti?podoplanin immunostaining in human breast cancer[J].Anticancer Res,2001,21 (4A):2351?2355.

［3］ Alitalo K，Carmeliet P. Molecular mechanisms of lymphangiogenesis in health and disease［J］.Cancer Cell,2002,1 (3):219?227．

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［7］ Kajita T,Ohta Y,Kimura K,et al.The expression of vascular endothelial growth factor C and its receptors in non?small cell lung cancer［J］.Br J Cancer, 2001,85 (2): 255?260.