化痰活血方对高脂血症大鼠血脂代谢的影响及其抗氧化作用

                       作者：叶勇 梅国强 刘松林 雍雪莲 张茂林 梅杰

【关键词】  化痰

    摘要：目的:观察化痰活血方对高脂血症大鼠血脂和脂质过氧化的影响。方法:采用高脂乳剂建立大鼠高脂血症模型，给予化痰活血方，检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物(LPO)等各项指标。结果:化痰活血方显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C、ApoB100、MDA水平，升高血清HDL-C、HDL2-C、ApoAI、SOD的水平，与模型组比较有显著性差异（P<0.05或P＜0.01）。结论:化痰活血方不仅对高脂血症大鼠的血脂代谢紊乱具有良好的调节作用，而且能提高高脂血症大鼠抗氧化能力。

    关键词：高脂血症；化痰活血方；脂质过氧化

    The Effect of Huatan Huoxue Fang on Blood Lipid Metabolism and Antioxidation in Experimental Hyperlipidemia Rats

       Abstract:Objective:To observe effects of Huatan Huoxue Fang on the blood lipid metabolism and antioxidation in hyperlipidemia rats. Methods:Feeding with lipidemia emulsion to establish the hyperlipidemia in model for detecting the various indexes of lipid and antioxidation including the total cholesterol (TC) , triglyceride (TG), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) , HDL2-C, apolipoprotein A (ApoAI)and apolipoprotein B (ApoB100) , superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA).Results:Huatan Huoxue Fang could obviously decrease the levels of TC, TG, LDL-C, ApoB100, MDA and increase the levels of HDL-C, HDL2-C, ApoAI, SOD in rats' blood, showing obvious difference from the model group（P<0.05 or P＜0.01）.Conclusion:The Huatan Huoxue Fang not only possess obvious effect of regulating the disorder of lipid circulation of hyperlipidemia rats,but also can increase the antioxidation against lipid peroxidein.

    Key words: Huatan Huoxue Fang;Hyperlipidemia;Lipidperoxide

    化痰活血方是在《伤寒论》小陷胸汤基础上化裁而来，具有健脾化痰清热、活血理气止痛之功效。临床应用于高脂血症、冠心病的治疗取得了满意的疗效［1］。为明确本方防治高脂血症及动脉粥样硬化的作用，我们将该法方药用于动物实验，观察化痰活血中药对高脂血症大鼠脂质代谢的影响及其抗氧化作用。

    1材料与方法

    1.1材料

    1.1.1动物清洁级健康Wistar大鼠60只，雄性，体重(230±20)g，由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供，合格证号TJLA-2003-177。

    1.1.2药物化痰活血方由法半夏、全栝蒌、黄连、当归、土鳖虫、山楂等组成(均购于武汉市药材公司)，根据各药的有效成分，用不同浓度乙醇渗漉，全部药渣合并煎煮3次，回收乙醇合并全部药液，浓缩为含生药4 g/ml浓度的药液；力平脂（法国利博福尼制药公司，批号为69660），使用前用生理盐水配成1.8 mg/ml混悬液。

    1.1.3试剂及仪器TC、TG、LDL-C、HDL-C、ApoAI、ApoB100试剂盒（宁波慈城生化试剂厂，批号分别为030215,030211，030225，030210，030508，030508）；胆固醇、胆酸钠（武汉市亚法生物有限公司进口分装）；甲基硫氧密啶（北京市燕京制药厂，批号为020922），丙二醇、吐温-80（湖北医药公司化学试剂分公司）。SOD、MDA试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号分别为20031215、20031031)。GL-20G-Ⅱ冷冻离心机（上海安亭仪器厂），721-A型分光光度计（上海第三分析仪器厂），752紫外光栅分光光度仪（上海分析仪器总厂）。

    1.2方法

    1.2.1实验分组及造模方法取上述大鼠随机分成六组：空白组、高脂血症模型组、阳性对照组(力平脂组)、化痰活血方大、中、小剂量组（简称为大、中、小剂量组），每组10只。常规饲养1周后，参照［2］方法制备高脂乳剂，即10％胆固醇、20％猪油、2％胆酸钠、1％甲基硫氧嘧啶、20％吐温-80、30％丙二醇加水至100％制成脂肪乳。除空白组外其余各组大鼠以高脂乳剂10 ml/（kg・d-1）灌胃，1次/d，灌服30 d。

    1.2.2给药方法及标本处理大鼠造模的第11 d各组分别给予相应药物灌胃。给药剂量按药理实验方法学［3］，化痰活血方大、中、小剂量组分别按20.16,10.08,5.04 g/kg的标准灌服；力平脂组按0.018 g/kg的标准灌服，空白组及模型组以10ml/kg的标准灌服生理盐水。1次/d，连续20 d。第21天起，末次给药前禁食12 h，给药1 h后，用20％乌拉坦0.5 ml/100 g体重麻醉，从腹主动脉取血，在4℃下3 000 r/min离心10 min，取血清。

    1.2.3血脂及SOD、MDA的测定采用酶法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）；采用免疫比浊法测定载脂蛋白A1（apoA1）、载脂蛋白B（apoB）；采用黄嘌呤氧化酶法测定血清SOD的含量，硫代巴比妥酸（TBA）法测定血清MDA的含量。

    1.2.4统计学处理 用SPSS10.0统计软件进行统计，数据以均数±标准差（±ｓ）表示，采用单因素方差分析，以P＜0.05为有统计学意义。

    2结果

    2.1化痰活血方对高脂血症大鼠血脂的影响模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平明显高于空白组，HDL-C、HDL2-C水平明显低于空白组（P＜0.05或P＜0.0l），说明模型组大鼠存在着血脂代谢紊乱，提示高脂血症模型被复制成功。化痰活血方各剂量组血清TC、TG、LDL-C水平明显低于模型组，HDL-C、HDL2-C水平明显高于模型组（P＜0.05或P＜0.0l）。表明化痰活血方具有显著的降低血脂和调节脂蛋白作用。结果见表1。

    表1化痰活血方对高脂血症大鼠血脂的影响(±ｓ)（略）

    2.2化痰活血方对高脂血症大鼠载脂蛋白的影响模型组大鼠血清ApoB100水平显著高于空白组，ApoAI水平明显低于空白组(P＜0.01)。化痰活血方各剂量组血清ApoB100水平低于模型组，ApoAI水平高于模型组（P＜0.0l）。表明化痰活血方有明显调节载脂蛋白的作用。结果见表2。

    表2化痰活血方对高脂血症大鼠载脂蛋白的影响(±ｓ)（略）

    2.3化痰活血方对高脂血症大鼠血清MDA、SOD水平的影响模型组大鼠血清MDA值显著高于空白组，SOD值显著低于空白组（P＜0.0l）。化痰活血方各剂量组血清MDA值均显著低于模型组，SOD值均显著高于模型组（P＜0.0l）。表明化痰活血方具有抗氧化的作用，且作用优于力平脂。结果见表3。

    表3化痰活血方对高脂血症大鼠血清MDA、SOD水平的影响(±ｓ)（略）

    3讨论

    高脂血症是动脉粥样硬化的重要危险因素。因此，调整血脂对防治动脉粥样硬化及心脑血管疾病是十分有效措施。中医将高脂血症归属于“痰浊”、“瘀血”范畴。长期观察发现，痰瘀互结是高脂血症临床常见证型之一。中医认为，在多种因素作用下，水谷精微的运化、输布失常，停积于内，形成痰浊；停积之痰浊阻碍气机，气滞而血行不畅，常可进一步导致瘀血的产生，形成痰瘀互结证。研究证实［4］过氧化脂质是血管内皮损伤的重要因素，并是中医痰瘀相关理论的中心环节；内皮损伤则可能是由痰致瘀的主要病理特征；脂质代谢紊乱及引起脂质代谢紊乱的内外因素是痰瘀共同为病的病因所在。采用痰瘀同治，防止作为痰瘀的主要成分-脂质的质变，是高脂血症及动脉粥样硬化症中的首要环节。根据以上理论，立法组方，拟定了以“化痰活血”为大法的中药复方，方中半夏燥湿化痰；黄连清热化痰；全瓜蒌清热理气化痰；当归补血活血；山楂行气散瘀，消食化积；土鳖破血逐瘀；茯苓健脾补中，利水渗湿。诸药合用，标本同治，消补兼施，共奏健脾化痰清热、活血理气止痛之功。

    实验结果显示：化痰活血方可以显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C、ApoB水平，升高血清HDL-C、HDL2-C、ApoAI的水平，具有较好的降脂作用；同时该方显著降低高脂血症大鼠血清MDA水平，升高SOD的水平，表明该方中药能提高机体抗氧化能力，抑制脂质过氧化反应及LDL的氧化修饰。

    结果提示该方可有效调节脂类代谢的紊乱状态，并通过提高自由基清除酶的活性，维护体内自由基稳态与平衡，增加LDL的抗氧化能力，减少脂质过氧化物的产生，改善血管内皮细胞功能。从根本改善了产生“痰瘀”的病理状况。因此，在高脂血症及动脉粥样硬化治疗中具有重要意义。

    ：

    ［1］叶勇,梅国强.梅国强教授运用化痰活血法治疗高脂血症［J］.光明中医,2003, 18(6):2222.

    ［2］刘明,董超仁,苏静怡. 一种简便实用的大鼠高脂血症模型［J］.药通报, 1989,5(2):119119.

    ［3］徐叔云. 药理实验方法学，第2版［M］.北京:人民卫生出版社,1991:11361136.

    ［4］周瑕菁,宋剑南,王宇辉,等. 痰瘀同治对实验性高脂血症大鼠血管内皮的保护作用［J］.中国中医基础医学杂志,1997,3(4):2626.