围神经端侧吻合后靶肌肉及其运动终板的形态学研究
作者：杨家辉，洪光祥，王发斌
【关键词】 肌肉
摘 要：［目的］研究周围神经端侧吻合后靶肌肉及其运动终板的形态，为端侧吻合的应用提供进一步的形态学依据。［方法］Wistar大白鼠26只，随机分实验组和对照组，每组13只，实验组右侧腓总神经切断后，近端反转结扎，远端与胫神经外膜开窗处行端侧吻合，对照组右侧腓总神经切断后，两端均反转结扎，两组动物左侧作正常对照，不作处理。术后3个月，行双侧腓总神经、胫前肌组织学检查，胫前肌湿重测定，运动终板检查。 ［结果］实验侧胫前肌结构清晰，肌纤维较粗大，运动终板面积大，结构清晰，着色深，接近正常侧。实验侧与对照侧的胫前肌肌湿重比、肌纤维截面积比、运动终板的面积比和着色比具有极显著性差异(P<001)。［结论］神经端侧吻合能保护靶肌肉及其运动终板。
关键词：周围神经； 端侧吻合； 肌肉； 运动终板
An experiment study of target muscle and moter endplate on peripheral nerve endtoside neurorrhaphy
Abstract：［Objective］To study the effect of Endtoside neurorrhaphy for protection target muscle. ［Method］Twentysix wistar rats were divided into two groups, with 13 in each group, peroneal nerve was transacted on the right side of all the animals, in one group, the proximal end of peroneal nerve was turned back and ligated, the distal end was sutured to the side of tibial nerve with perineurial window, in another group,both ends of the transacted peroneal nerve were turned back and ligated as contrast, no operation was done on the left side. Three months after operation,the peroneal nerve and the tibial muscle were taken for histologic exmination, and the muscle's wet weight was examed. ［Result］Significant difference was seen between the two groups in the muscle wet weight, the muscle fiber cross sectional area, the moter endplate area and color (P<001). ［Conclusion］ Endtoside neurorrhaphy can protect target muscle.
Key words: Nerve； Endtoside neurorrhaphy； Muscle； Motor endplate
近年来，许多学者通过动物实验和临床应用发现神经可以通过端侧吻合再生并获得部分生理功能［1～4］。为了研究端侧吻合对靶肌肉功能恢复的形态学基础，为临床应用提供更加可靠的形态依据，作者设计了本实验。
1 材料与方法
11 动物与分组
Wistar雌性大白鼠26只(由同济医学院实验动物中心提供)，体重150～180 g，随机分实验组和对照组，每组13只。1％硫喷妥钠腹腔注射麻醉后，于右股后外侧消毒手术显露坐骨神经及腓总神经，在腓总神经分支以下5 mm处切断，实验组近端结扎并反转缝于临近肌肉上，然后，在胫神经干外膜上开一直径约1 mm的小窗，将腓总神经远端用10／0显微外科缝线端侧吻合于胫神经开窗处。分层缝合切口。对照组腓总神经切断后，两断端均反转结扎。两组动物左侧作为正常对照。
12 取材及检测
大鼠常规饲养3个月。腹腔麻醉后，打开胸腔，胸主动脉插管，右心耳切开放血，肝素生理盐水灌注至灌注液清亮。按原切口找出双侧腓总神经，沿腓总神经分离至其所支配的小腿前外侧肌群，将其一并切下，观察其外观。切取吻合口远端3 mm处腓总神经节段行半薄横切片，甲苯胺蓝染色，光学显微镜检查。完整分离切取双侧胫前肌，于万分之一分析天平上称重，行肌湿重检查。切取称重后胫前肌中下段肌条，行横切片，HE染色，光学显微镜下观察肌纤维形态。切取称重后胫前肌中上部肌腹，行纵切片， ACHE染色，光学显微镜下观察运动终板的形态和着色。北航医学图象管理分析系统测量腓总神经横切面再生神经纤维数目、胫前肌肌纤维横截面积、运动终板的面积及着色。
13 统计学处理
实验数据采用右侧测得值与左侧的比值，用均数及标准差(±s)表示，结果用t检验进行统计学分析。
2 结 果
21 大体观察
实验组右侧腓总神经圆润、丰满、光泽度好，与之相连的小腿前外侧肌群饱满、有弹性。而对照组右侧腓总神经菲薄、纤细，与之相连的小腿前外侧肌群明显萎缩。
22 胫前肌湿重
称量胫前肌湿重，将右侧测得值除以左侧测得值，得胫前肌肌湿重比。结果显示实验组胫前肌肌湿重比明显大于对照组，统计学有极显著性差异。(表1)
23 组织学检查
231 神经组织
实验侧腓总神经横切面显示再生神经纤维数目较多，神经纤维较粗大，髓鞘厚，束间结缔组织少，与正常侧比较接近。而失神经侧神经纤维大多崩解、纤维化，束间结缔组织增生，无明显髓鞘结构。
232 肌肉组织学检查及肌纤维横截面积测定
实验侧胫前肌结构清晰，肌纤维粗大，呈正常肌肉形态结构(图1)，失神经对照侧肌纤维萎缩变细，胞核集中，甚至出现肌纤维变性(图2)。肌纤维横截面积比显示实验组与对照组有极显著性差异。(表1)
233 运动终板检查
实验侧运动终板面积大，结构清晰，着色深，接近正常侧(图3)。而失神经侧运动终板面积小，结构模糊，着色浅(图4)。实验组运动终板的面积比及着色比明显大于对照组，统计学结果显示极显著性差异。(表1) 表1 胫前肌肌湿重比、肌纤维横截面积比、运动终板面积及着色比(略)
3 讨 论
肌肉失去神经支配后，功能丧失，形态学表现为肌肉萎缩变性和纤维化，运动终板也出现变性。神经修复后，随着功能的恢复，肌肉和运动终板也得到不同程度的恢复［5］。
近年来，很多学者对神经端侧吻合进行了大量而系统的研究，基本肯定了端侧吻合侧支发芽理论，并肯定了对功能恢复的作用［1～4］。
本实验在以上研究的基础上，更进一步的研究了端侧吻合后靶肌肉及其运动终板形态。结果显示实验侧胫前肌结构清晰，肌纤维粗大，呈正常肌肉形态结构。实验侧运动终板面积大，结构清晰，着色深，接近正常侧。为了消除实验动物的个体差异，增强可比性。作者在实验数据的处理上，采用右侧测得值与左侧的比值(即恢复率)表示，结果显示实验侧胫前肌在肌湿重比、运动终板的面积比及着色比上均明显优于失神经侧，两组间具有极显著性差异。说明端侧吻合对失神经肌肉及运动终板具有保护作用。同时，本实验通过对腓总神经横截面的观察，显示实验侧有较多再生神经纤维，而失神经侧无明显神经再生，说明端侧吻合后通过侧枝发芽使变性神经再神经化，再神经化的神经对肌肉及运动终板起到了营养作用。
神经端侧吻合简单易行，不损害供体神经［2,3］，可能成为处理神经缺损一种可行性方法。
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［1］ Ierbo F,Trindade JCS，HoshinoK,et al．Endtoside neurorrhaphy with removal of the epineural sheath: experimental study in rats［J］．Plast reconstr surg,1994,94：1038-1047．
［2］ Undborg G, Zhao Q，Kanje M,et al．Can sensory and motor collateral sprouting be induced from intact peripheral nerve by endtoside anastomosis［J］? J Hand Surg(Br)，1994,19：277-282．
［3］ 洪光祥，郑毅，王发斌，等．周围神经端侧吻合后神经再生的研究［J］．中华手外科杂志，1998，14：42-44.
［4］ 罗永湘，王体沛，方煌．神经端侧吻合尺神经缺损的初步探讨［J］． 修复重建外科杂志，1997，11:338-339.
［5］ 殷琦，胡蕴玉，李稔玉，等.运动终板退变的量化分析［J］.中华实验外科杂志，1996，13：55.
