预吸氧对大鼠脑皮质神经元损伤的影响

【摘要】  观察不同浓度预吸氧、缺氧和复氧对大鼠脑皮质神经元损伤的影响。方法：７２只成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ ３组，每组又分为４个亚组。ＡⅠ～ＡⅣ（预吸氧）亚组分别吸入２１％、５０％、７５％和９５％氧３０ｍｉｎ；ＢⅠ～ＢⅣ（预吸氧?缺氧）亚组按Ａ组方法处理后再吸入５％氧２０ｍｉｎ；ＣⅠ～ＣⅣ（预吸氧?缺氧?复氧）亚组按Ｂ组方法处理后，再吸入９８％氧２０ｍｉｎ。取各组大鼠大脑皮质，测定乳酸（ＬＡ）、丙二醛（ＭＤＡ）、氧自由基（ＯＦＲ）、总抗氧化能力（Ｔ?ＡＯＣ）、总超氧化物歧化酶（Ｔ?ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ?Ｐｘ）和氨基酸的含量或活力。用免疫组化法检测诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）。在光镜下观察神经元形态学改变。结果：ＡⅠ、ＡⅡ亚组神经元无明显改变，ＡⅢ、ＡⅣ亚组神经元轻度肿胀。Ｂ组神经元肿胀明显，以ＢⅢ、ＢⅣ亚组较为严重。Ｃ组神经元胞核固缩，核仁缩小、消失，其中以ＣⅡ亚组最轻，ＣⅢ、ＣⅣ亚组最重，甚至可见核裂解、消失、只残余细胞轮廓的鬼影细胞。与ＡⅠ亚组相比，ＡⅢ～ＡⅣ亚组ＯＦＲ、ｉＮＯＳ和ＬＡ增加（Ｐ＜０.０５），提示这三种损伤因子参与了脑损伤；Ｔ?ＡＯＣ增加（Ｐ＜０.０５），可能是由于损伤因子引起了某些抗氧化因子的反馈性增加；Ｔ?ＳＯＤ降低（Ｐ＜０.０５），可能与其消耗增加有关。ＣⅠ～ＣⅢ亚组的ＯＦＲ和ＣⅠ、ＣⅣ亚组的ｉＮＯＳ以及ＣⅡ、ＣⅣ亚组的ＬＡ高于Ａ组中各对应亚组（Ｐ＜０.０５），提示复氧性脑损伤可能与这三种因子的增加有关。结论：７５％以上浓度预吸氧可引起大鼠轻微脑损伤，并使随后发生的缺氧复氧性脑损伤加重。５０％浓度预吸氧不引起大鼠脑损伤，并可使随后发生的缺氧复氧性脑损伤减轻。

【关键词】  氧吸入疗法；脑缺氧；脑损伤；神经元；大脑皮质

　　ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ，　ａｎｏｘｉａ　ａｎｄ　ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｎｅｕｒｏｎａｌ　ｉｎｊｕｒｙ　ｏｆ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｃｏｒｔｅｘ　ｉｎ　ｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：　Ｓｅｖｅｎｔｙ?ｔｗｏ　Ｗｉｓｔａｒ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｌｌｏｃａｔｅｄ　ｔｏ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｅｑｕａｌ　ｇｒｏｕｐｓ：　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　（Ａ），　ｈｙｐｏｘｉａ（Ｂ）　ａｎｄ　ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　（Ｃ），ａｎｄ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗａｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｆｏｕｒ　ｅｑｕａｌ　ｓｕｂｇｒｏｕｐｓ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　．　Ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　ＡⅠ?ＡⅣ　ｗｅｒｅ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｌｙ　ｅｘｐｏｓｅｄ　ｔｏ　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｘｙｇｅｎ　（２１％，５０％，７５％　ａｎｄ　９５％　）　ｆｏｒ　３０　ｍｉｎ，　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　ＢⅠ?ＢⅣ　ｗｅｒｅ　ｅｘｐｏｓｅｄ　ｔｏ　ｈｙｐｏｘｉａ　ａｉｒ　ｗｉｔｈ　５％　ｏｘｙｇｅｎ　ｆｏｒ　２０　ｍｉｎｓ　ａｆｔｅｒ　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ａｓ　ｇｒｏｕｐ　Ａ　ａｎｄ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　ＣⅠ?ＣⅣ　ｗｅｒｅ　ｅｘｐｏｓｅｄ　ｔｏ　９８％　ｏｘｙｇｅｎ　ｆｏｒ　２０　ｍｉｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｙｐｏｘｉａ　ａｓ　ｇｒｏｕｐ　Ｂ．　Ｔｈｅ　ｂｒａｉｎ　ｓａｍｐｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｍｏｖｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ　ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｘｙｇｅｎ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌｓ　（ＯＦＲ），ｅｘｉｔｉｎｇ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　（ＥＡＡ），　ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄ　（ＩＡＡ），ｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ）　ａｎｄ　ｌａｃｔａｔｅ（ＬＡ）　ｃｏｎｔｅｎｔ，　ｔｏｔａｌ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ｄｉｓｍｕｔａｓｅ　（Ｔ?ＳＯＤ），ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ　ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＧＳＨｐｘ）　ａｎｄ　ｃａｔａｌａｓｅ（ＣＡＴ）　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ，ｔｏｔａｌ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ｃａｐａｃｉｔｙ（Ｔ?ＡＯＣ）　ａｓ　ｗｅｌｌ　ａｓ　ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｉｎｄｕｃｅ　ｎｉｔｒｉｃ　ｏｘｉｄｅ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　（ìＮＯＳ）　　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｃｅｌｌｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｓｌｉｇｈｔｌｙ　ｅｄｅｍａ　ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　　ｉｎ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ｏｆ　ＡⅢ　ａｎｄ　ＡⅣ．Ｔｈｅ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｂ　ｗａｓ　ｍｏｒｅ　ｓｅｒｉｏｕｓ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ　ａｎｄ　ｌｅｓｓ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ｃ．　Ｔｈｅ　ｉｎｊｕｒｅ　ｄｅｇｒｅｅ　ｗａｓ　ｓｌｉｇｈｔｅｓｔ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　Ⅱ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｏｓｔ　ｓｅｒｉｏｕｓ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　Ⅲ　ａｎｄ　Ⅳ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｓｕｂｇｒｏｕｐｓ　ｏｆ　ｇｒｏｕｐ　Ｃ　ａｎｄ　ｇｒｏｕｐ　Ｂ．Ｔｈｅ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　ＯＦＲ，　ｉＮＯＳ，　ＬＡ　ａｎｄ　Ｔ?ＡＯＣ　ｗａｒｅ　　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　　Ｔ?ＳＯＤ　　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　ＡⅢ　ａｎｄ　ＡⅣ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　ＡⅠ．　Ｔｈｅ　ＯＦＲ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　ＣⅠ?ＣⅢ，ｔｈｅ　ＩＮＯＳ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　ＣⅠａｎｄ　Ｃ　Ⅳ，ａｎｄ　ｔｈｄ　ＬＡ　ｉｎ　ｓｕｂｇｒｏｕｐ　ＣⅡａｎｄ　ＣⅣ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｏｓｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ　ｓｕｂｇｒｏｕｐｓ　ｉｎ　ｇｒｏｕｐ　Ａ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　５０％　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｍａｙ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｃａｕｓｅｄ　ｂｙ　ａｎｏｘｉａ　ａｎｄ　ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈｏｕｔ　ａｎｙ　ｄｉｓａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｐｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ａｂｏｖｅ　７５％　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｍａｙ　ｃａｕｓｅ　ｔｈｅ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｍａｒｋｅｄ　ｂｙ　ｅｄｅｍａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｎｅｕｒｏｎｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｊｕｒｙ　ｒｅｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａｎｏｘｉａ　ａｎｄ　ｒｅｏｘｙｇｅｎａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ．　

　　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓｏｘｙｇｅｎ　ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ　ｔｈｅｒａｐｙ；ｃｅｒｅｂｒａｌ　ａｎｏｘｉａ；ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｎｊｕｒｙ；ｎｅｕｒｏｎｓ；ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｃｏｒｔｅｘ

    急性脑缺氧是围术期死亡及中枢神经系统并发症的主要原因。预防缺氧的主要方法之一是吸氧（简称预吸氧）。然而，预吸氧时脑细胞形态学和内源性损伤或保护因子发生何种变化以及这种变化对随后发生的缺氧复氧性脑损伤有何影响少有研究。本研究拟观察不同浓度预吸氧、缺氧及复氧对大鼠脑皮质神经元损伤的影响。

　　１  材料和方法

　　１.１  实验方法 

　　成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠７２只（医科大学实验动物部提供），体重２５０～３００　ｇ，随机分为预吸氧（Ａ）、预吸氧?缺氧（Ｂ）和预吸氧?缺氧?复氧（Ｃ）３组（ｎ＝２４），每组再随机分为４个亚组（ｎ＝６）。将各组大鼠置于含有新鲜空气、经过标定、内放钠石灰的氧舱中。Ⅰ亚组（对照组）舱口开放，不吸氧；Ⅱ～Ⅳ亚组吹入纯氧，使舱内氧浓度分别维持衡定在５０％、７５％和９５％，计时３０　ｍｉｎ（预吸氧实验）；然后向Ｂ、Ｃ组大鼠舱内通入氮气，使氧气浓度降到５％，计时２０ｍｉｎ（缺氧实验）；再将Ｃ组大鼠移入盖有双通气管橡皮塞的广口瓶中，吹入纯氧，使氧浓度达到９８％以上，计时２０　ｍｉｎ（复氧实验）。氧浓度监测采用Ｄａｔｅｘ?ＣＡＲＤＩＯＣＡＰⅡ气体监测仪（芬兰）。实验结束后，腹腔注入１０％水合氯醛３５０ｍｇ／ｋｇ，开颅取大脑皮质待检。

　　１.２  检测方法 

　　（１）将标本超声粉碎［１］，制成匀浆，用台式高速离心机１０　０００　ｒ／ｍｉｎ离心５　ｍｉｎ，取出上清液，－２０℃保存待测。用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒测定乳酸（ＬＡ）、丙二醛（ＭＤＡ）和氧自由基（ＯＦＲ）含量、总抗氧化能力（Ｔ?ＡＯＣ）以及总超氧化物歧化酶（Ｔ?ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ?Ｐｘ）活力；用反相高效液相色谱（ＰＩＣＯ?ＴＡＧ）法测定谷氨酸（Ｇｌｕ）和天门冬氨酸（Ａｓｐ）两种兴奋性氨基酸以及苯丙氨酸（Ｐｈｅ）、牛磺酸（Ｔａｕ）、丙氨酸（Ａｌａ）和γ?氨基丁酸（ＧＡＢＡ）等抑制性氨基酸含量。（２）将脑组织修材后常规脱水，石蜡包埋，切片（厚约４　μｍ），用免疫组织化学法检测诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）；行ＨＥ染色、封片，在４００倍光镜下观察神经元形态学改变。神经元肿胀和形状改变为轻度损伤；胞核固缩、核仁缩小为中度损伤；核裂解、消失为重度损伤。

　　１.３  统计学处理 

　　采用ＳＰＳＳ８.０统计学软件，数据以均数±标准差表示，差异显著性检验用配对ｔ检验，Ｐ＜０.０５为差异有统计学意义。

　　２  结果

　　２.１  神经元形态学观察结果
 
　　ＡⅠ、ＡⅡ亚组无明显变化，ＡⅢ、ＡⅣ亚组神经元轻度肿胀，丧失典型的多形性形状，变为圆形；Ｂ组神经元肿胀明显，其中ＢⅡ亚组肿胀最轻，Ｂ　Ⅲ、ＢⅣ亚组肿胀最为严重，但胞浆着色淡，胞核及核仁仍清晰可见，细胞周围间隙无明显增大。Ｃ组神经元胞浆深染，胞核固缩，核仁缩小、消失，细胞周围间隙增大。ＣⅡ亚组损伤程度轻于其它各亚组，偶见噬神经现象，ＣⅢ、ＣⅣ亚组噬神经现象增多，ＣⅣ亚组可见核裂解、消失、只残余细胞轮廓的鬼影细胞。

　　２.２  指标检测结果 

　　与ＡⅠ亚组比较，ＡⅢ、ＡⅣ亚组ＯＦＲ、ｉＮＯＳ、ＬＡ和Ｔ?ＡＯＣ，ＡⅡ亚组Ｔａｕ，ＡⅢ亚组ＭＤＡ、Ａｓｐ和ＡⅡ～ＡⅣ亚组ＣＡＴ均（Ｐ＜０.０５）升高，ＡⅡ～ＡⅣ亚组Ｔ?ＳＯＤ降低（Ｐ＜０.０５）。与ＢⅠ亚组比较，ＢⅢ亚组ＬＡ和Ｔ?ＡＯＣ以及ＢⅣ亚组ＯＦＲ和ｉＮＯＳ升高（Ｐ＜０.０５）。与ＣⅠ亚组比较，ＣⅡ和ＣⅣ亚组ＬＡ升高（Ｐ＜０.０５）。ＣⅠ～ＣⅢ亚组的ＯＦＲ和ＣⅠ、ＣⅣ亚组的ｉＮＯＳ以及ＣⅡ、ＣⅣ亚组的ＬＡ高于Ａ组中各对应亚组（Ｐ＜０.０５）（表１）。表１  三组大鼠预吸氧、缺氧和复氧时脑损伤和脑保护相关指标的变化（略）注：与亚组比较，１）Ｐ＜０.０５  ２）Ｐ＜０.０１；与Ａ组对应亚组比较，３）Ｐ＜０.０５  ４）Ｐ＜０.０１

　　３  讨论

    过氧化损伤是一个非常复杂的病理生理过程，诸多的损伤和保护因子参与其中发挥各自的作用，并且通过正、负反馈机制密切地联系在一起。在不同浓度预吸氧及其后的缺氧、复氧过程中，这些相关因子的变化也有所不同。因此，仅仅以这些因子的变化为依据难以准确判断组织细胞的损伤及其损伤程度。　

　　３.１  预吸氧对脑皮质的影响 

　　本研究发现，７５％以上浓度预吸氧可使ＯＦＲ、ｉＮＯＳ和ＥＡＡ等重要的内源性脑损伤因子［２～４］以及过氧化反应的终末代谢产物ＭＤＡ升高。其原因可能是高氧可促进ＯＦＲ的生成，也为ＯＦＲ和ＮＯ的合成提供了充足的底物［２，４］；ＯＦＲ可引起ＥＡＡ堆积和细胞内钙超载，钙超载可使突触前ＥＡＡ释放并可激活ｉＮＯＳ和活性氧合成酶类；ＯＦＲ、ＥＡＡ及其引起组织损伤后产生的白细胞介素１和肿瘤坏死因子均可活化核转录因子κＢ，而后者可促进ｉＮＯＳ基因的表达使ＮＯ大量产生［４，５］。ＬＡ作为重要的损伤因子［２，３］，在７５％浓度预吸氧时升高，但在９５％预吸氧时却显著降低，其原因尚不清楚，可能与糖代谢复杂的调节机制有关。Ｔ?ＡＯＣ反映体内抗氧化物质和抗氧化酶的活性，在本研究中随着预吸氧浓度的升高而增加，可能与高氧使过氧化反应增强而启动了机体负反馈机制有关；然而，在Ｔ?ＳＯＤ、ＣＡＴ和ＧＳＨ?Ｐｘ这三种主要的内源性抗氧化酶中，仅ＣＡＴ随之而增加，说明ＣＡＴ在负反馈性脑保护机制中生成较多或消耗较少，而Ｔ?ＳＯＤ有所降低，ＧＳＨ?Ｐｘ则没有显著变化。因此，Ｔ?ＡＯＣ的增加可能还与其它抗氧化酶和抗氧化物质的变化有关。四种ＩＡＡ在预吸氧后没有明显变化，说明其未参与脑保护。因此，７５％以上浓度预吸氧引起的脑损伤可能由ＯＦＲ、ＮＯ和ＥＡＡ所引起，ＯＦＲ和ｉＮＯＳ的增加与氧浓度的关系较为密切，可能在脑损伤中起主要作用；而两种ＥＡＡ的增加多无统计学意义，可能在脑损伤中不起重要作用。尽管高浓度预吸氧使Ｔ?ＡＯＣ增加，但并没有减轻脑损伤，说明此时负反馈性保护机制不发挥关键性的脑保护作用。５０％浓度预吸氧未引起脑损伤，损伤因子也无显著变化，提示预吸氧能否引起脑损伤主要与吸入氧浓度有关。

　　３.　２  预吸氧对缺氧复氧性脑损伤的影响 

　　本研究结果显示，缺氧和复氧后，在各组出现或加重神经元损伤的同时，ＯＦＲ、ｉＮＯＳ和ＬＡ等主要的损伤因子多有增加或维持在较高水平。其中以５０％预吸氧组损伤最轻，可能是由于该浓度预吸氧未引起脑损伤，却提高了脑氧含量，在吸入低氧气体后，仍可维持一段时间的氧供，与未吸氧组相比实际缺氧时间缩短；该浓度预吸氧时，ＯＦＲ和ｉＮＯＳ均有较大幅度的增加（差异无统计学意义可能是因为样本数较少），但这种水平的增加可能不足以造成脑损伤，却可能激活负反馈性保护机制，使随后发生的缺氧复氧性损伤减轻。而７５％以上浓度预吸氧两组损伤较重，其原因可能为该浓度预吸氧即可引起神经元损伤，同时使机体暂时适应了高氧代谢状态，此时再发生缺氧复氧，其反应可能会更为强烈，损伤因子的增加更为明显，使缺氧复氧性脑损伤更为严重。Ｔ?ＡＯＣ在预吸氧、缺氧和复氧三个阶段，Ⅰ、Ⅱ亚组逐渐升高，Ⅲ亚组先升后降，而Ⅳ亚组逐渐降低，可能是因为缺氧复氧引起脑损伤后，启动了负反馈机制使Ｔ?ＡＯＣ增加；损伤较轻时抗氧化因子消耗较少，故Ｔ?ＡＯＣ呈增高趋势；当损伤较重时，由于蛋白合成障碍引起酶类生成减少等因素使负反馈性调节机制受到影响以及各种抗氧化因子消耗加剧，又使Ｔ?ＡＯＣ逐渐降低。另外，ＧＡＢＡ作为最重要的ＩＡＡ，缺氧和复氧时，在Ⅰ、Ⅲ亚组有所升高，可能也参与了负反馈性脑保护机制。

    本研究结果提示：７５％以上浓度预吸氧可引起大鼠脑损伤，并且使随后发生的缺氧复氧性脑损伤加重。５０％浓度的预吸氧不引起脑皮质神经元明显的病改变，并且有减轻随后缺氧复氧性脑损伤程度的倾向。机体自身反馈性保护机制在预吸氧应激刺激下可被激活，在仅引起过氧化反应增强而未造成脑损伤时，可能发挥脑保护作用；但在引起脑损伤后，并不能发挥关键性的保护作用。因此，在临床麻醉及其它医学领域采用高浓度预吸氧方法的合理性值得商榷。

【】
  　　［１］汪谦．医学实验方法［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，１９９７．３８８．

　　［２］孙存普，张建中，段绍谨．自由基生物学导论［Ｍ］．合肥：技术大学出版社，１９９９．２４０－２４３．

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