恶性肿瘤肝转移血瘀证与参三七、丹参干预作用的研究
作者：陈培丰 刘鲁明 陈震 徐颖扉 谢长生
【摘要】 ［目的］了解血瘀证及其活血化瘀中药对肿瘤转移的影响。［方法］采用两种血瘀证肝转移模型（小鼠B16黑色素瘤和大鼠W256肉瘤经脾种植肝转移模型），对血瘀证及部分活血化瘀中药对荷瘤动物肝转移的影响进行了观察。［结果］在血瘀状态下，可在一定程度上抑制原发肿瘤的生长，荷瘤肝转移小鼠血清IL?18和HGF的水平降低，可能干预了肝转移的过程，参三七醇提液对荷瘤肝转移大鼠的脾脏原发肿瘤的生长和肝转移有一定抑制作用，血小板在肿瘤增殖、浸润和转移中起着重要作用。［结论］参三七这种既能改善血瘀证又能抑制肿瘤生长和转移、又具有一定扶正作用的活血化瘀中药值得在肿瘤临床推广使用，其作用机理值得深入研究。
【关键词】 肿瘤转移；肝转移；参三七；丹参、
Abstract: ［Objective］ To understand blood stasis and TCM’s effect on cancer metastasis. ［Method］ Use two kinds of liver metastasis model of blood stasis, observe the influence of blood stasis and part of Chinese drugs activating blood circulation to remove stasis on liver matastasis of animals bearing cancer. ［Result］ Under blood stasis, it can to some extent inhibit the production of primary cancer, the serum IL?18 and HGF were reduced in mouse of liver metastasis with cancer, which may intervene the liver metastasis; Shensanqi extract had some definite function on the primary cancer of spleen and liver metastasis of rats with liver metastasis of cancer, the platelet exerted key functions in cancer hyperplasia, infiltration and metastasis. ［Conclusion］ Shensanqi can not only improve blood stasis, but inhibit cancer production and metastasis, as well as has functions of reinforcing essence. So the said Chinese drugs worth promotion clinically, whose mechanism is worthy deep research.
Key words:cancer metastasis; liver metastasis; Shensanqi; Danshen
活血化瘀中药对肿瘤转移的作用一直存在争议，故在血瘀证基础上复制肿瘤转移模型进行研究，可以部分阐明血瘀证及其活血化瘀中药对肿瘤转移的影响。我们采用两种血瘀证肝转移模型（小鼠B16黑色素瘤和大鼠W256肉瘤经脾种植肝转移模型），对血瘀证及部分活血化瘀中药对荷瘤动物肝转移的影响进行了观察，并对其作用机理作了探讨，为临床活血化瘀中药在肿瘤中的合理应用提供实验依据。
本研究旨在前期研究的基础上，通过建立两种血瘀证肝转移动物模型，观察血瘀证对荷B16黑色素瘤小鼠和荷W256肉瘤大鼠脾脏原发肿瘤及肝转移的影响，并探讨了其作用机理。选择参三七醇提液和丹参注射液为具体研究对象，观察此两种活血化瘀中药对血瘀证肝转移的干预作用，以及对荷瘤动物血凝相关指标、肿瘤病灶血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，进一步探讨参三七醇提液抑制恶性肿瘤的生长和肝转移发生的作用机理，诠释活血化瘀法在肿瘤中的作用，为活血化瘀中药在肿瘤临床中的科学合理应用提供实验依据。
1 研究内容和方法
（1）通过实验方法复制两种血瘀证肝转移模型；观察血瘀证对实验动物全血粘度等血液流变学指标的影响；（2）观察血瘀证、及在血瘀状态下，参三七醇提液和丹参注射液对肝转移动物脾脏原发肿瘤生长和肝转移的影响；（3）观察血瘀证对荷瘤动物血清白介素?18（IL?18）和肝细胞生长因子（HCG）水平的影响；（4）观察血瘀证、及在血瘀状态下，参三七醇提液和丹参注射液对肝转移动物血浆血凝相关指标（血栓素A2（TXA2）和6?酮?前列腺素F1α（6?Keto?PGF1α）的影响；（5）观察血瘀证、参三七醇提液和丹参注射液对荷瘤动物脾、肝肿瘤及在无肉眼看到转移灶的肝组织中VEGF表达的影响。
2 研究结果
2.1 采用的两种血瘀证肝转移动物模型，既模拟了肿瘤转移的，又体现了传统中医的血瘀证候特点，适合中医血瘀证肿瘤转移的实验研究。从有关实验数据（对实验动物全血粘度等血液流变学指标、血凝相关指标及肝转移的影响）来看，本实验复制的两种血瘀证肝转移模型是成功可靠的。
2.2 研究显示，在血瘀状态下，可在一定程度上抑制原发肿瘤的生长（抑瘤率为53.28%，与对照组比较，有非常显著差异，P<0.01）及肝转移的发生（肝转移的抑制率分别为65.41%和30.77%，与对照组比较均有显著差异，P<0.01和P<0.05）。
2.3 在血瘀状态下，荷瘤肝转移小鼠血清IL?18和HGF的水平降低，可能干预了肝转移的过程；其机理可能为IL?18水平降低，抑制了肿瘤细胞与肝血窦内皮细胞的粘附；HGF水平降低有可能抑制肿瘤细胞在肝内的生长、运动、侵袭，从而使荷瘤小鼠在血瘀状态下的肝转移受到抑制。
2.4 在血瘀状态下，参三七醇提液对荷瘤肝转移大鼠的脾脏原发肿瘤的生长和肝转移有一定抑制作用（抑瘤率、肝转移阳性率和肝转移抑制率分别为23.02%、30%、65.39%，与对照组比较，均有显著差异，P<0.05）。参三七醇提液组在肉眼未见肝转移病灶的肝组织中VEGF表达率较低。显示参三七醇提液有较好的干预肿瘤生长和肝转移的作用。
2.5 同样在血瘀状态下，丹参注射液对荷瘤肝转移大鼠的脾脏原发肿瘤的生长和肝转移的抑制作用不明显（抑瘤率和肝转移抑制率分别为19.9%、23.08%）、且肝转移阳性率较高（达90%）。
2.6 参三七醇提液和丹参注射液均有降低血瘀证荷瘤肝转移大鼠血浆血栓素B2（TXB2）和6?酮?前列腺素F1α（6?Keto?PGF1α）的作用，而参三七醇提液的作用更为明显。此结果似与两者的抑制血瘀证肝转移的作用相一致。
3 讨论
大量的研究表明肿瘤与血瘀密切相关。血瘀是中医对疾病病因、病机的概念，而各种病邪作用于机体时，血瘀又是疾病的一种病理变化。肿瘤血瘀证的本质可能与血液循环障碍有关，外周循环异常、血液黏滞性和凝血功能的亢进等可能是其很重要的表现形式。这些医学研究方法，为揭示中医血瘀证的本质提供了可靠的客观标准。
肿瘤的发生，从中医传统理论和病因病机分析来看，多表现为“血瘀”，即“肿块”、“疼痛”和相应的舌象和脉象等。但活血化瘀的临床疗效并不令人满意，而副作用则较明显。出于临床实践的需要，近20年来，扶正固本法肿瘤逐渐占据优势地位，这从报告的数量上可见一斑。从临床疗效来看，似乎扶正固本法亦好于活血化瘀法，且无明显的副作用。究其原因，我们认为“血瘀”可能是机体发生肿瘤时的一种自我保护状态，有些活血化瘀中药有可能影响或干扰了这种“自我保护状态”，起到了促进浸润和转移的作用。而扶正固本法较少影响或维护了肿瘤机体的这种“自我保护状态”，故起到了“养正积自消”的疗效。
参三七传统功效主要为活血止血、化瘀定痛。主要应用于各种出血之证及跌打损伤、瘀滞肿痛。近年来随着对参三七药理研究的进一步深入开展，有关参三七尚具有调节机体免疫力，抗癌防癌功效的报道逐年增多［1］。国内临床治疗中发现，参三七对肿瘤放射治疗有增效作用［2］。但尚未见到有关参三七抗肿瘤机理研究的系统报道。在本课题前期研究实验结果表明［3］，参三七醇提取液对小鼠恶性肿瘤肝转移具有较强的抑瘤和抑制转移的作用，呈现良好的临床应用前景。
丹参是常用的活血化瘀药之一，化学成分有脂溶性的二萜醌和水溶性的酚性酸两大类。主要含丹参酮甲、丹参酮乙、丹参酮丙、丹参醇Ⅰ、丹参醇Ⅱ等。能改善外周循环，促进组织的修复与再生、抑制过度增生的纤维母细胞和肿瘤的生长。也有较多的报道丹参有促进肿瘤扩散和转移的作用。曾有报道丹参酮Ⅱ?A碘酸钠对Lewis癌的生长及转移都不表现为促进作用。
4 结论
4.1 采用在血瘀证基础上，复制小鼠B16黑色素瘤和大鼠W256肉瘤经脾种植肝转移模型研究血瘀证及部分活血化瘀中药对血瘀证肿瘤肝转移的作用，具有一定创新性。对推进传统活血化瘀法则治疗恶性肿瘤领域的研究颇有价值。
4.2 在实验重复证实及对机理作了较深入探讨的基础上，作者认为在“血瘀”状态下，对肿瘤机体可能有一定的保护作用。这一观点丰富了传统血瘀证的内涵，并对临床有重要的指导意义，在国内尚属首创。
4.3 参三七这种既能改善血瘀证又能抑制肿瘤生长和转移、又具有一定扶正作用的活血化瘀中药值得在肿瘤临床推广使用，其作用机理值得深入研究。而丹参在肿瘤临床中的应用值得引起注意，应慎用或少用，对预防或治疗肝转移，更应慎用。
4.4 参三七、丹参对肿瘤生长和肝转移的不同影响，并对机理进行了较全面的探讨。对临床合理运用活血化瘀中药治疗肿瘤具有重大价值和实用意义。
【参考文献】
［1］ 胡勇.论三七的功效［J］.中药天地，2000，9（2）：44?45.
［2］ 梁培根.田七对放射治疗效应的影响［J］.癌症，1982，（2）：26.
［3］ 陈培丰、刘鲁明、陈震，等.三七醇提液对恶性肿瘤肝转移的干预作用［J］.中西医结合学报，2006,4（5）：500?503.
