怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠体重和肿瘤坏死因子-α的影响

【摘要】  目的 观察怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠体重的影响并初步探讨其可能的机制。方法 行双侧卵巢切除术制备去卵巢肥胖的动物模型，观察怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠体重、摄食、血脂及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。结果 双侧卵巢切除术后大鼠的体重、摄食量增加，总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）和TNF-α均升高（P＜0.01）。服用怀牛膝后，大鼠第10天开始体重明显低于去卵巢组（P＜0.01），总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）和TNF-α均降低（P＜0.05）。结论怀牛膝可以抑制去卵巢肥胖大鼠的体重增加，此作用可能与其抑制摄食，改善体内脂肪代谢有关。

【关键词】  怀牛膝 去卵巢大鼠 体重 肿瘤坏死因子-α

    Abstract：Objective To study the effects of Achykanthis Bidentatae（AB）from Henan of China on ovariectomized obese rats and discuss primarily its possible mechanism.Methods Female SD rats were bilaterally ovariectomized as the ovariectomized obese animal models，observe the effect of the apozem of Achykanthis Bidentatae（AB）from Henan of China on body weight，food intake,serum lipid and Tumor Necrosis Factor-alpha(TNF-α)in ovariectomized obese rats.Result Compared with sham-operated(SHAM)group，body weight，food intake,total cholesterol(TC)，triglyceride(TG)，high dendity lipoprotein(HDL)，low dendity lipoprotein(LDL)and tumor necrosis factor-α(TNF-α)increased（P＜0.01）in Ovariectomized(OVX)group.Compared with OVX group,body weight is degrade manifest from the tenth day（P＜0.01），TC，TG，HDL and TNF-a step down（P＜0.05）in OVX+AB(OVX with Achykanthis Bidentatae)group.Conclusion Achykanthis Bidentatae from Henan of China can significantly inhibit body weight gain in ovariectomized obese rats.This action probably contact with it restrain rats'food intake and improve lipid metabolism.

    Key words:Achyranthes Bidentata;ovariectomized rat;body weight;tumor necrosis factor-alpha

     随着生活水平的提高和饮食结构的变化，肥胖的患病率逐年上升，给人们的生活带来诸多不便，严重威胁人类健康。有人把肥胖、高血压、高血脂、高血糖称为“死亡四重奏”。尤其妇女进入更年期后，机体内分泌失调，植物神经功能紊乱，出现脂肪堆积体重增加而肥胖，成为高血压、冠心病、Ⅱ型糖尿病等慢性疾病的重要危险因素之一。因此预防和肥胖具有十分重要的意义，牛膝为苋科多年生草本植物牛膝(Achyranthes bidentata.bl.)的干燥根。生用散瘀血、消痛肿，熟用补肝肾、强筋骨，为临床常用中药。但其是否对去卵巢肥胖的动物有作用尚未见报道。

    1  材料和方法郭姣红，等.怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠体重和肿瘤坏死因子-α的影响

    成都医学院学报2008年6月，3(2)

    1.1  实验材料

    怀牛膝水煎剂由甘肃省药品检验所鉴定并提取，制备为1 g/ml(相当每毫升含1 g生药)水提取液存4℃冰箱备用，临用时配置成1%～12%的浓度。氯胺酮为福建古田药业股份有限公司产品，批号为050307.血脂试剂盒购于广州标佳科技有限公司，批号为070411.TNF-α试剂盒购于晶美生物工程有限公司，批号为20061201.

    1.2  实验方法

    健康三月龄雌性SD大鼠(由北京维通利华实验动物中心提供)，体重219.8±1.6 g，随机分为假手术组(SHAM)、去卵巢组(OVX)和去卵巢+怀牛膝组(OVX+AB)。手术前， 各组大鼠均禁食12～18 h，饮水不限。氯胺酮100 mg/kg腹腔注射麻醉后，去卵巢组、去卵巢组+怀牛膝组大鼠行常规手术切除双侧卵巢，假手术组大鼠重复上述手术步骤，但不摘除卵巢，只切去等体积的脂肪。手术后，各组大鼠正常饮水，第二天开始自由进食，去卵巢组+怀牛膝组术后以怀牛膝水煎剂口服，浓度从1%开始，以不影响大鼠日进食量和饮水量为标准，将浓度逐渐增加到12%，维持该浓度至第50天。每天定时测量大鼠的进食量和饮水量，每10天定时测量体重。实验结束时，大鼠空腹12 h后，股动脉取血分离血清，测定TC、TG、HDL、LDL和TNF-α.

    1.3  统计方法

    采用SPSS11.5统计软件进行数据处理，实验结果以±s表示，用两组样本均数比较的t检验比较组间差异的显著性。P＜0.05认为差异有显著性。

    2  结果

    2.1  怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠体重的影响

    术后第10天，去卵巢组大鼠体重即明显高于假手术组，而去卵巢组+怀牛膝组大鼠的体重明显低于手术组，随着实验进程体重差距愈大（P＜0.01）。表明怀牛膝明显抑制了去卵巢大鼠的体重增加（见图1）。表1  怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠摄食量(g) 的影响

    2.2  怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠摄食量的影响

    与假手术组相比，行双侧卵巢切除术后大鼠摄食明显增加（P＜0.05～0.01），去卵巢大鼠服用怀牛膝后摄食量明显降低（P＜0.05～0.01）（见表1）。

    2.3  怀牛膝对去卵巢肥胖大鼠血脂、雌激素和TNF-α的影响    去卵巢后大鼠血清TC、TG、HDL、LDL和TNF-α均明显升高（P＜0.01），同时雌二醇（E2）浓度明显降低（P＜0.01）。去卵巢大鼠口服怀牛膝后血清TG，TC、HDL和TNF-α下降（P＜0.05）；LDL和E2变化不明显（P＞0.05）（见表2）。

    3  讨论

　　表2  怀牛膝对去卵巢大鼠血脂、雌二醇（E2）和TNF-α的影响肥胖病是由于脂肪代谢紊乱，使多余热量以脂肪形式在脂肪组织中过多蓄积所致。女性更年期卵巢功能逐渐衰竭，体内雌激素水平下降，雌激素能降低脂蛋白脂肪酶(LPL)的活性抑制脂肪的形成；诱导激素敏感性脂肪酶的活性或通过增加肾上腺素的脂解作用来间接地增加脂肪的分解［1］；能使脂肪酸的β氧化增加，从而减少脂质在脂肪组织中沉积［2］。除此之外，雌激素可直接影响下丘脑来减少摄食［3］，从而减少能量的摄入。Heine PA等报道雌激素受体a敲除的小鼠表现出能量消耗减少［4］。围绝经期的妇女，由于体内雌激素水平降低，故易出现肥胖或有肥胖倾向。本实验切除大鼠的双侧卵巢，模拟妇女更年期状态，发现大鼠进食量和体重明显增加，血脂升高，同时雌激素水平降低，说明肥胖的动物模型是可靠的。

    TNF-α是一种多潜能的细胞因子，脂肪组织是内源性TNF-α的一个重要来源，在肥胖者的脂肪组织中过度表达，随着脂肪细胞体积增加，TNF-α表达增多［5］。报道，血浆中TNF-α水平升高，脂肪细胞合成并分泌的TNF-α经血循环作用于下丘脑，通过中枢神经系统影响机体的脂肪储存；TNF-α能增加激素敏感性脂肪酶(HSL)活性，促进脂肪分解，减少脂肪细胞体积［6］；TNF-α可直接抑制蛋白脂肪酶(LPL)活性，从而抑制脂肪细胞对外源性脂质的摄取，减少脂肪细胞中脂质合成［7］；TNF-α可促进白色前脂细胞和脂肪细胞的凋亡，使其数目减少［8］。这些作用可能是机体的一种自我保护的调节反应［9］。但研究发现，肥胖患者中存在血清TNF-α升高［10］，在肥胖大鼠中，TNF-α升高并不会使体重下降，因此有学者认为可能在肥胖时存在着TNF-α受体敏感性下降或受体后缺陷，即TNF-α抵抗，因此导致肥胖加重［11］。本研究发现去卵巢肥胖大鼠血清中TNF-α明显升高、体重和进食量增多，同时血清TC、TG、LDL和HDL明显升高，这可能与肥胖者体内存在TNF-α受体不敏感或受体后环节障碍，即肥胖个体可能存在一定程度的“TNF-α”抵抗，导致TNF-α作用异常，使血清TC、TG、LDL和HDL明显升高。饮用怀牛膝后TNF-α的浓度降低，血清TC、TG和HDL也有不同程度的降低，可能是由于TNF-α浓度下降，导致受体敏感性增强和通过受体后途径来调节脂质代谢，因而体重降低。怀牛膝对去卵巢大鼠血清LDL变化不明显，这与郭盛［12］等研究的高热量、高脂肪引起肥胖大鼠的TNF-α与循环LDL水平无明显相关性是一致的。同时饮用怀牛膝后去卵巢大鼠体内的雌激素水平没有明显改变，说明怀牛膝无雌激素样作用。

    怀牛膝可抑制去卵巢肥胖大鼠的体重增加，抑制摄食。这种作用可能主要是通过血清TNF-α对脂代谢的调节作用实现的。但怀牛膝成分复杂， 作用繁多，其对去卵巢肥胖的许多作用机制尚不明确，具体作用成分尚不清楚，还有待于进一步研究。

【文献】
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