女性类风湿性关节炎患者血清瘦素水平及相关因子的检测

【摘要】  目的:探讨瘦素在女性类风湿性关节炎（RA）患者中的表达情况及其与α1-酸性糖蛋白（AAG）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、C反应蛋白（CRP）等指标的关系。方法:用放射免疫分析（RIA）法分别检测63例女性RA患者及30例正常对照者血清瘦素的水平，并与AAG、TNF-α、CRP等作相关分析。同时按有无活动、有无及病程(分≤5年和>5年)等分组分析。结果:63例女性RA患者瘦素含量为(13.18±2.29)μg/L，明显高于正常对照组的（6.92±1.91）μg/L（P <0.01）。血清瘦素水平与AAG存在相关性（P <0.05），而与其他指标无相关性。瘦素水平在活动组和非活动组中差异无显著性（P >0.05）。患者按接受治疗情况分治疗前、未使用强的松、加用强的松三组比较瘦素水平，结果差异无显著性（P >0.05）。病程≤5年组瘦素含量为(17.38±2.29)μg/L，明显高于病程>5年组的（9.55±2.09）μg/L（P <0.05）。结论:女性RA血清瘦素水平升高，与AAG存在相关性，但与病情活动等其他因素无关，推测瘦素可能是一个独立的炎症细胞因子，在RA的炎症反应中发挥一定的作用。

【关键词】  关节炎 类风湿 瘦素 糖皮质激素类

    Abstract:  Objective: To explore the expression of leptin in women with RA and its relation with other indexes such as AAG，TNF-α，CRP，etc. Methods: The concentration of leptin in 63 women with RA and 30 healthy controls was detected with RIA. The correlation was analyzed between leptin and TNF-α，CRP and ESR，etc. The patients were divided into several groups and each group was analysed. Results: The serum leptin in 63 women with RA was significantly higher than that of the controls [（13.18±2.29）μg/L versus（6.92±1.91）μg/L，P <0.01]. There was correlation between serum leptin and AAG （P <0.05）. But it did not occurr between other indexes（P >0.05）. There was no difference between active group and inactive group. There was also no difference among three groups which were divided according to the means of therapy: before therapy，without taken glucocorticoids and after taken glucocorticoids（P >0.05）. While the leptin in >5 year group was higher than that of≤5 year group [(17.38±2.29)μg/L versus (9.55±2.09)μg/L，P <0.05]. Conclusion: The serum leptin in women with RA is higher than that in the normal one. There is correlation between leptin and AAG. But it isn’t influenced by other factors，such as the activity of disease. Maybe leptin participates in the inflammation of RA as an independent factor.

    Key words:  arthritis，rheumatoid；leptin；glucocorticoids

    瘦素是由肥胖基因编码的一种由167个氨基酸组成的分泌型蛋白质，分子量为14～16 kD，主要由白色脂肪组织分泌[1]。近年来发现瘦素具有免疫调节作用[2]。类风湿关节炎(RA)是一种以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的自身免疫性疾病，有许多细胞因子参与了其病理过程，其中肿瘤坏死因子α(TNF-α)被公认为是介导RA发生、、造成滑膜损害和组织破坏的主要因素之一[3]，α1-酸性糖蛋白（AAG）可反映RA病情的活动性，可作为判断RA疾病活动性的指标之一[4]。本研究通过测定女性RA患者血清瘦素、AAG、TNF-α、C反应蛋白（CRP）及血沉(ESR)水平，并将瘦素与上述指标及病程等作相关分析，探讨瘦素在女性RA患者中的作用。

    1  材料和方法

    1.1  研究对象  病例组为2005年6月至2006年2月温州医学院第一附属门诊或住院的女性RA患者63例，均符合美国风湿病学会1987年修订的RA诊断标准，其中活动RA患者40例，非活动患者23例。年龄范围为17～78岁，平均为(35.71±9.58)岁，BMI范围为14.67～27.77 kg/m2，平均为(20.97±2.93)kg/m2。正常对照组30例，为健康体检的女性。所有病例及正常对照组均无高血压、糖尿病、肿瘤、妊娠、内分泌疾病及其他自身免疫病。对照组年龄范围为25～52岁，平均为(31.44±8.49)岁，BMI范围为17.58～26.44 kg/m2，平均为(21.08±2.81)kg/m2。两组的年龄及BMI差异无显著性（P >0.05）。

    1.2  病例组治疗方法  根据病情需要，采用非甾体抗炎药、甲氨喋呤、硫唑嘌呤等治疗，部分患者加用小剂量强的松（<15 mg/d）。按照治疗方案不同，分为未使用强的松组、加用强的松组及治疗前三组，治疗组在治疗2～3周后采集标本。

    1.3  标本采集及检测方法  受试者空腹采集静脉血3 ml，其中1 ml用15% EDTA-K2抗凝后在ALIFAXS.P.A公司的TEST-I型全自动血沉仪上测定血沉，其余2 ml离心后分离血清，置-40 ℃冰箱保存用于其他项目检测。瘦素及TNF-α测定采用放射免疫分析（RIA）法，试剂盒购自北京原子能生物技术有限公司，操作严格按照说明书进行。AAG和CRP测定采用免疫比浊法，在IMMAGE仪器上检测，试剂由美国贝克曼库尔特公司提供。

    1.4  统计学处理方法  数据用SPSS11.0统计软件分析。瘦素结果均作Lg对数转换后使其变为正态分布作统计学分析。两组比较采用t检验，三组比较采用方差分析。

    2  结果

    2.1  RA组与对照组血清瘦素、TNF-α、CRP及ESR水平比较  表1显示，RA组血清瘦素、AAG、TNF-α、CRP及ESR水平均明显高于正常对照组（P <0.01或P <0.05）。

    2.2  RA组血清瘦素水平与TNF-α、AAG、CRP、BMI、ESR之间的关系  血清瘦素水平与AAG有相关性（r =0.520，P <0.05），与BMI有相关性（r =0.368，P <0.01），而与其他指标间均无相关性（P >0.05）。

    2.3  RA患者按照情况、有无病情活动及病程分组分别比较瘦素水平  见表2。按照病程分为≤5年和>5年两组，按照病情分活动组和非活动组，组间比较采用t检验。活动组和非活动组间差异无显著性（P >0.05）。≤5年组瘦素为（17.38±2.29）μg/L，高于>5年组（9.55±2.09）μg/L（P<0.05）。按治疗情况分组后的三组间比较，以BMI为协变量作协方差分析，瘦素水平间差异无显著性（P >0.05）。

    3  讨论

    瘦素是一个具有多种效应的细胞因子，具有促进能量消耗、调节机体能力平衡、抵抗β细胞分泌胰岛素、维持生殖功能和骨矿量的功能，此外，瘦素还具有增强免疫力等作用。深入研究发现，瘦素在炎症反应的应答、修复等过程中发挥重要作用。瘦素及其受体表达缺陷的小鼠对内毒素攻击的敏感性增强，而直接使用瘦素可对抗内毒素的致死作用[5]。Hultgren等[6]实验证明，在关节存在炎症或感染的情况下，瘦素水平升高，并且能通过其抗炎作用，对关节病变起到改善作用。瑞士Bokarewa等[7]研究显示，RA患者血液中瘦素水平较正常人群要高，而且通过自身比较发现，血清中瘦素水平较关节液中高，在未出现关节侵蚀的关节炎患者中，其关节液中瘦素水平和血清中相比，下降尤其明显。国内齐菲等[8]研究显示，RA患者血清瘦素高于正常对照者。RA是一种系统炎症性的免疫性疾病，患者关节压痛、肿胀都与炎症存在一定关系。其中α1-酸性糖蛋白与RA病情的活动性有关，是作为判断RA疾病活动性的指标之一[4]。

    本研究结果显示，女性RA患者血清瘦素、AAG水平均高于正常对照者，但瘦素与反映疾病进展指标的TNF-α及反映疾病活动的相关指标CRP、ESR等并无相关性，与病情也无关，仅与AAG水平呈正相关。分析其升高原因，可能为：①RA易并发感染性关节炎，而由革兰氏阴性菌感染所引起的内毒素血症，可诱导瘦素的合成和分泌，维持机体内环境的稳定。②关节炎所致的高代谢状态引起脂肪酸水平的上升，诱导瘦素入血。③全身性神经内分泌调节可能存在一种正反馈，通过释放瘦素而维持机体内环境稳定[8]。因此，瘦素在一定程度上参与RA的炎症反应。瘦素与RA活动程度及疾病进展并无直接关系，推测其可能是一个独立的炎症应答因子。本研究还发现，病程≤5年RA患者血清瘦素水平高于病程＞5年者，其原因可能是：RA患者关节的破坏具有保护作用，瘦素能在关节腔内消耗[7]，RA病程长的患者中，瘦素为阻止关节腔组织的破坏而消耗性降低，超过了机体的代偿能力。本研究通过对未治疗、是否加用糖皮质激素患者进行分组研究，显示RA患者血清瘦素水平与有无激素治疗无关，这与以往研究糖皮质激素能影响瘦素分泌[9，10]不符，我们推测其原因可能是RA患者加用强的松的量相对较低（每天使用量在15 mg以下，一般为5 mg，每天1次），而小剂量的糖皮质激素可能对血清中瘦素水平影响不大。

【】
  [1] Zhang F,Basinski MB,Beals JM,et al.Crystal structure of the obese protein leptin-E100[J]. Nature,1997,387(6629):206-209.

[2] 黄火高,韩星海.瘦素在风湿病中的研究进展[J].中华风湿病学杂志,2004,7(8):427-429.

[3] 孙铁铮,吕厚山,药立波.IL-1β和TNF-α诱导RA成纤维样滑膜细胞ICAM-1 和 VCAM-1表达调控的机制研究[J].中华风湿病学杂志,2005,3(9):133-137.

[4] 段贞,陈玮.α1-酸性糖蛋白在类风湿关节炎患者中的临床意义[J].实用预防医学,2004,11(3):452-453.

[5] Ceranowicz P,Warzecha Z,Dembinski A,et al.Protective and therapeutic effect of Leptin in acute pancreatitis evoked by ischemia reperfusion[J].Folia Med Cracov,2003,44(1-2):93-108.

[6] Hultgren OH,Tarkoski A.Leptin in septic arthritis decrease levels during infection and amelioration of disease activity upon its administration [J]. Arthritis Res,2001,(3):389-394.

[7] Bokarewa M,Bokarew D,Hultgren O,et al.Leptin consump-tion in the inflamed joints of patients with rheumatoid arthritis [J].Ann Rheum Dis,2003,62(10):952-956.

[8] 齐菲,颜光涛,林季,等.类风湿关节炎患者急性期患者血清中瘦素及相关因子水平的变化[J].中华风湿病学杂志,2006,10(6):353-355.

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