枫叶煎剂对小鼠镇痛抗炎作用的实验研究

            作者：罗莹，韦健全，郑子敏，赖术，许小林，黄健      

【摘要】  目的 观察枫叶煎剂对小鼠的镇痛抗炎作用。方法 镇痛实验采用醋酸致小鼠扭体法和小鼠热板法。抗炎实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法和鸡蛋清致小鼠足趾肿胀法。结果 枫叶煎剂灌胃可减少醋酸致小鼠扭体的次数，扭体抑制率为67.43%，延长小鼠舔后足潜伏期，减轻二甲苯致小鼠耳廓肿胀程度和鸡蛋清致小鼠足趾肿胀程度（P均<0.01）。结论 枫叶煎剂对小鼠具有镇痛抗炎作用。

【关键词】  枫叶；镇痛；抗炎剂；小鼠；实验

　　Abstract:  Objective  To investigate the analgesic and anti-inflammatory effects of water extracts of Folium liquidambaris on mice.  Methods  The analgesic experiments including mice writhing induced by acetic acid and mice hot-plate procedures. The anti-inflammatory experiments concluded mice ear-swollen induced by xylene and egg white-induced toe swollen.  Results  The intra-gastric administration of  water extracts of Folium liquidambaris resulted in writhing reduction markedly, the  inhibitory rate was 67.43%. The water extracts could increase the pain threshold in mice induced by hot plate, and suppress the mice ears  swelling induced by xylene and mitigate the mice toes swelling induced by egg white (P<0.01).  Conclusion  The water extracts of  Folium liquidambaris have analgesic and anti-inflammatory  effects.   
   
　　Key words:  Folium liquidambaris; analgesia; anti-inflammatory agents; mice; experiments

　　枫香树叶（Folium Liquidambaris）俗称枫叶，为金缕梅科植物枫香树(Liquidambar formosana Hance)的叶，枫香树主要产于我国秦岭及淮河以南各省区［1］，［2］记载其树叶有行气止痛、解毒、止血、祛风除湿之功效。以民间应用为主，目前只见枫叶化学成分的研究报道［1］，尚未进行系统研究。为此我们对其进行药效学研究，为进一步开发枫香树及临床应用提供实验理论依据。

　　1  材料与方法

　　1.1  药品  新鲜枫叶，2007年4月采自广西壮族自治区百色市，经我院中药房刘春荣副主任药师鉴定。取新鲜枫叶于室内(25℃～30℃)阴干后粉碎，蒸馏水加过药面，浸泡60min，煮沸60min，提取3次，合并滤液，加热浓缩至每1ml溶液相当于4g生药备用。阿司匹林肠溶片，湖南新汇制药有限公司，生产批号060802，粉碎后以注射用水加吐温-80助溶配置成混悬液，备用。

　　1.2  动物  昆明种小白鼠，体重18～22g，由右江民族医学院实验动物中心提供。

　　1.3  仪器  智能热板仪（YLS-6A），山东省医学院设备站生产；分析天平(AR1140/C)，奥豪斯（上海）公司生产；足趾容积测量仪（YLS-7B），山东省医学科学院设备站生产。

　　1.4  实验方法

　　1.4.1  枫叶煎剂的镇痛实验

　　1.4.1  对醋酸致小鼠扭体反应的影响［3］  取健康小鼠36只，雌雄各半，随机分为生理盐水组，阿司匹林组（50mg/ml），枫叶煎剂组（4g/ml），每组12只，各组按0.1ml/10g剂量灌胃给药，每天1次，连续3天。末次给药1h后，各鼠分别腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml/10g（醋酸溶液临用前配制），观察、记录注射醋酸溶液后15min内各组发生扭体反应（腹部收缩内凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行）的鼠数和各鼠扭体次数。扭体反应抑制率：抑制百分率（%）=（对照组平均扭体数-给药组平均扭体数）/对照组平均扭体数×100%。　

　　1.4.1.2  对小鼠热板痛反应时间的影响［4］  实验前将雌性小鼠置于智能热板仪（55.0±0.5）℃进行筛选，以小鼠舔后足反应的潜伏期为痛阈指标，选取反应潜伏期在10～30s内的合格小鼠60只按体重随机分成生理盐水组，阿司匹林组（50mg/ml），枫叶煎剂组（4g/ml），每组20只，各组按0.1ml/10g剂量灌胃给药，每天1次，连续3天，分别测定给药前及末次给药后30min，60min，90min，120min各鼠的痛阈值。比较同组药后不同时间平均痛阈与基础痛阈的差异，判断是否有镇痛作用。

　　1.4.2  枫叶煎剂的抗炎实验

　　1.4.2.1  对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响  取健康小鼠36只，雌雄各半，随机分为生理盐水组，阿司匹林组（50mg/ml），枫叶煎剂组（4g/ml），每组12只，各组按0.1ml/10g剂量灌胃给药每天1次，连续3天。于末次给药后60min，各小鼠右侧耳廓正反面均匀涂抹二甲苯50μl（室温25℃），左耳涂抹等量生理盐水为对照，60min后断颈处死小鼠，沿耳廓对称剪下小鼠两耳，用直径6cm的小鼠耳廓打孔器在同一部位冲下耳片，用精密电子分析天平称重，以左右耳片重量（mg）差值表示炎性肿胀程度，计算肿胀率(%)及肿胀抑制率(% )。肿胀率(%)=［右耳片重(mg)-左耳片重(mg)］/左耳片重(mg) ×100%，肿胀抑制率(%) =生理盐水组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/生理盐水组平均肿胀度×100%。

　　1.4.2.2  对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响  取健康小鼠36只，雌雄各半，测定各小鼠给药前的足趾容积，然后随机分为生理盐水组，阿司匹林组（50mg/ml），枫叶煎剂组（4g/ml），每组12只，各组按0.1ml/10g剂量灌胃（ig）给药每天1次，连续3天。末次给药60min 后，各小鼠右后足趾皮下注射0.1ml鸡蛋清（室温24℃），于注射后1h、2h、4h、6h分别测定各鼠右后足趾容积，比较各组小鼠药后不同时间右后足趾肿胀率。按下式计算肿胀率(%)=(致炎后足趾容积值-致炎前足趾容积值)/致炎前足趾容积值×100%，肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀率-给药组平均肿胀率)/对照组平均肿胀率×100%。

　　1.4.3  统计学分析  计量数据以±s表示，采用t检验。

　　2  结果

　　2.1  枫叶煎剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响  见表1。

　　表1  枫叶煎剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响（略）

　　与生理盐水组比较，a:t=10.76,b:t=10.55,P均<0.01

　　表1数据显示，枫叶煎剂能显著减少醋酸所致小鼠扭体次数，扭体抑制率为67.43%，与生理盐水组比较差异有高度显著性，但扭体抑制率较阿司匹林组稍低。

　　2.2  枫叶煎剂对小鼠热板痛反应时间的影响  见表2。

　　表2  枫叶煎剂对小鼠热板痛反应时间的影响（略）

　　与基础痛阈值比较，a:t=3.95,b:t=5.56,c:t=6.85,d:t=7.02,e:t=2.79,f:t=3.42,g:t=4.60,P均<0.01；与生理盐水组比较，h:t=3.41,P<0.05,i:t=4.50,j:t=6.09,k:t=5.62,P均<0.01,l:t=2.55,m:t=3.12,P均<0.05

　　表2数据显示，在本实验条件下，枫叶煎剂能延长小鼠热板痛反应时间，与生理盐水组比较差异有显著性。与阿司匹林组比较作用较弱且起效稍慢。

　　2.3  枫叶煎剂对对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响  见表3。

　　表3  枫叶煎剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（略）

　　与生理盐水组比较，a:t=7.80,b:t=6.86,P均<0.01

　　表3数据显示，枫叶煎剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用显著，肿胀抑制率为39.92%，与生理盐水组比较差异有高度显著性，与阿司匹林组比较差异无显著性(P>0.05)，但阿司匹林组的肿胀抑制率稍高。

　　2.4  枫叶煎剂对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响  见表4。

　　表4  枫叶煎剂对鸡蛋清致小鼠足趾肿胀的影响（略）

　　与生理盐水组比较，a:t=9.18,b:t=9.99,c:t=10.59,d:t=11.39,e:t=7.23,f:t=8.53,g:t=9.96,h:t=10.43,P均<0.01

　　表4数据显示，枫叶煎剂对鸡蛋清引起小鼠足趾肿胀有显著的抑制作用，与生理盐水组比较差异有高度显著性。

　　3  讨论
   
　　广西多产枫树，药源充足，价廉，枫香树的果实路路通具有镇痛抗炎作用［5］，临床上用于湿疹皮炎［6］，枫树的叶目前以民间应用为主。为探讨枫叶是否具有镇痛抗炎药理作用，本实验采用2种镇痛实验模型和2种实验性炎症模型对枫叶煎剂进行了镇痛抗炎作用的药效学研究，实验结果显示，枫叶煎剂能显著减少醋酸所致小鼠扭体次数，扭体抑制率为67.43%，延长小鼠热板痛反应时间，但作用较阿司匹林组温和，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用，肿胀抑制率为39.92%，对鸡蛋清引起小鼠足趾肿胀有抑制作用，随时间增加肿胀抑制率增大。阿司匹林为临床常用的镇痛抗炎药之一，枫叶煎剂与阿司匹林具有相同的药理效应，对实验动物模型具有镇痛抗炎作用，其镇痛抗炎作用的活性成分及其作用机制有待进一步研究。

【】
  　　［1］ 蔡亚玲,阮金兰.枫叶化学成分的研究［J］.中药材,2005,28(4):294-295.

　　［2］ 宋立人.中华草本(第9卷)［M］.上海:上海技术出版社,1999:2380-2381.

　　［3］ 陈奇.中药药理研究方法学［M］.北京:人民卫生出版社,2000:355-379.

　　［4］ 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京:人民卫生出版社,2002：882-886.

　　［5］ 刘婷,孙玉茹,秦彩玲,等.路路通酸的抗炎镇痛作用［J］.实验方剂学杂志,2006,12(12):45-47.

　　［6］ 鲁建修.路路通洗剂治疗湿疹皮炎30例［J］. 河南中医,1994,14(2):86.