玉屏风散的免疫效应研究
【摘要】 就玉屏风散对特异性免疫、非特异性免疫、免疫器官、免疫细胞因子以及迟发型超敏反应等方面的作用作一综述，并对其复方药理的研究方向进行了讨论。
【关键词】 玉屏风散;免疫效应;进展
玉屏风散出自元·朱丹溪的《丹溪心法》,是中医扶正固本的经典方剂。该方疗效好，应用广泛，是国家基本中成药，被《中华人民共和国药典》所收载[1]。该方由黄芪、白术、防风三味药组成，具有益气健脾、固表止汗的功效，用于气虚肌表不固兼感风寒之自汗症。“非典”期间，北京、上海、广州、四川等地提供的“非典”防治方中,一般都包含玉屏风散中的黄芪、白术和防风,结果病死率大大降低，肯定了玉屏风散在防治“非典”中的作用[2]。免疫药理研究表明，玉屏风散对免疫系统有广泛的影响,包括对体液免疫、细胞免疫、免疫调节等。近年来对其进行了较深入的研究,并且取得了一定的进展。
1玉屏风散对非特异性免疫的作用
1.1玉屏风散对单核巨噬细胞系统的作用
张磊等[3]研究发现，玉屏风散总提物及其总多糖能对抗环磷酰胺所致的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的减弱。伍雪芳等[4]研究发现，小鼠按体质量灌胃玉屏风散,其30～90 min时相的血清对小鼠腹腔巨噬细胞均具有显著活化作用(P<0.01),说明玉屏风散中的某些成分能以较快速率吸收并转化成为对巨噬细胞有活化作用的成分。毕玉霞等[5]研究玉屏风散对小鼠腹腔巨噬细胞活化作用的实验结果表明，实验组的吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组,统计处理差异有高度统计意义(P<0.01),说明玉屏风散能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。张磊等[6]研究发现，玉屏风散多糖在连续14 d灌胃给药情况下,可对抗注射适量环磷酰胺的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的减弱。
1.2 对杀伤细胞(NK)的影响
NK细胞是机体免疫监视功能的重要执行者,可杀伤某些肿瘤细胞或病毒感染的细胞，先于T细胞发挥作用,处于机体抗肿瘤的第一道防线,对淋巴瘤、白血病细胞最为有效。梁春敏等[7]进行了血清药研究，结果表明，与正常对照组比较,1 h时相的玉屏风散含药血清对NK细胞活性有增强作用(P<0.05),30 min至2 h时相血清对小鼠IL|2的产生有促进作用(P<0.01或P<0.05),1 h时相血清作用最强,2 h时相血清作用次之。陈曙霞[8]观察60例病毒性心肌炎患者,在治疗前NK细胞活性平均为(9.75±5.44)%,服用玉屏风散为主的中药2～3月后复查,NK细胞活性平均提高至(23.23±10.88)%,治疗前后比较有高度统计意义(P<0.01)。
2 玉屏风散对特异性免疫的作用
2.1对总淋巴细胞的影响
梁春敏等[7]报道玉屏风散30 min～2 h时相含药血清对小鼠脾淋巴细胞增殖有明显促进作用, 其中1 h时相血清的促进作用表现最明显(P<0.01),2 h时相血清也有较强的促进作用(P<0.05)。毕玉霞等[5]研究了玉屏风散对小鼠脾淋巴细胞增值的影响，结果显示,实验组G0/G1期细胞百分比明显低于对照组，而S期和G2M期细胞百分率则明显高于对照组,3 h时相细胞增殖指数(PI)分别比较均有高度统计意义(P<0.01)。徐启华等[9]研究了玉屏风散对免疫抑制小鼠脾抗体形成细胞数的影响，结果玉屏风散煎剂与玉屏风散发酵液均能有效改善由环磷酰胺所致的脾抗体细胞形成数的减少，玉屏风散发酵液组与玉屏风散煎剂组相比,差异无统计意义(P>0.05)。
2.2对T细胞的影响
马振亚[10]研究发现玉屏风散对风寒刺激导致的小鼠末梢血中T淋巴细胞非特异性酯酶(ANAE)阳性率下降有预防作用。玉屏风散加味对正常小鼠和注射氢化可的松引起的免疫低下小鼠可提高玫瑰花环形成细胞数，能提高淋巴细胞转化百分率，增加正常小鼠和注射环磷酰胺引起的免疫低下小鼠的T淋巴细胞数。张磊等[3]研究结果表明,环磷酰胺能使CD+4/CD+8和对Th有促进作用的IL|2分泌显著降低，而玉屏风散总提物及总多糖均能使这些指标向正常状态恢复,显著改善免疫低下。
江忠等[11]对哮喘患儿用玉屏风颗粒治疗并观察其对T淋巴细胞亚群的影响,结果表明,CD+4/CD+8比值明显下降(P<0.01),纠正了哮喘患儿体内T 淋巴细胞亚群的失调。杨晨炜等[12]也观察到反复发作呼吸道感染的患儿血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL|2R)水平下降,CDs下降,CD+3、CD+4、CD+4/CD+8增高。张磊等[6]报道了玉屏风散多糖在连续14 d灌胃给药情况下,可恢复注射适量环磷酰胺所降低的CD+4/CD+8比值，按灌胃给药量的10 %静脉注射玉屏风散多糖14 d,可使CD+4/CD+8比值提高。
2.3对体液免疫的影响
玉屏风散水煎服能使反复上呼吸道感染动物和病人的血清免疫球蛋白IgA由治疗前(1.82±0.07)g/L上升为(2.32±0.06)g/L,差异有高度统计意义(P<0.01)[13]。对腹腔内注射环磷酰胺的免疫抑制小鼠，玉屏风散能提高其IgG,IgG1数值(P<0.05),而对IgG2,IgG2b,IgG3均无显著影响[14]。超敏反应性鼻炎患者经玉屏风散治疗后,临床症状基本控制,血清IgE明显下降(P<0.01)[15]。玉屏风散临床用于治疗慢性支气管炎和易感患者结果表明,治疗前后IgM无明显改变[16-17]。但玉屏风散在同时使用免疫抑制剂的情况下,能使各类肾小球肾炎患者低于正常或高于正常的IgM恢复正常[18]。血清溶血素水平及血空斑形成细胞是检测体液免疫功能的重要指标,玉屏风散加味对这二项指标均有显著的增强作用[19]。也有报道玉屏风散能使绵羊红细胞致敏小鼠脾脏溶血空斑数(PFC)基础水平偏低的增高,偏高的降低,呈现双向调节作用[20]。
3对红细胞免疫的影响
红细胞具有很强的免疫黏附功能，通过此种功能可清除血循环中的免疫复合物(IC)，促进吞噬，捕获抗原及增强机体的免疫力。免疫黏附功能的结构基础是Cab受体，因此检测Cab受体活性是检测红细胞免疫黏附功能的重要指标。张红军等[21]实验研究结果表明，玉屏风散能明显提高免疫抑制小鼠红细胞的黏附功能，提高C3bR花环形成率，有效地降低IC花环形成率。章惠陵等[22]对120例反复上呼吸道感染患儿治疗并观察结果表明，90例患儿经玉屏风散治疗2月后，红细胞Cab受体花环率有明显提高，与治疗前相比差异有高度统计意义(P<0.01)。
4对免疫器官的影响
4.1对免疫器官超微结构的影响
毕玉霞等[5]观察玉屏风散煎剂对胸腺超微结构的影响结果表明,实验组小鼠胸腺小叶结构清晰,皮质明显厚于对照组,淋巴细胞数量增多,髓内的淋巴细胞多于对照组。电镜下对照组胸腺组织中淋巴细胞的数量减少,细胞核的间隙明显扩张,胞浆中有空泡,说明出现内质网扩张,溶酶体残余增多,提示上皮样网状细胞退化。实验组中淋巴细胞发育良好,细胞密度增大,上皮样网状细胞亦未见异常,并多见淋巴细胞分裂相。
4.2对免疫器官重量的影响
侯林江[23]报道，提前灌服玉屏风散可以预防风寒刺激介导的免疫器官萎缩和重量减少,从而有效地预防淋巴细胞免疫功能的抑制。徐启华等[9]研究了玉屏风散煎剂与玉屏风散发酵液对小鼠脾指数、胸腺指数的影响，结果玉屏风散煎剂与玉屏风散发酵液均能有效改善由环磷酰胺所导致的脾指数、胸腺指数下降,使之基本恢复到正常水平。玉屏风散发酵液对抗环磷酰胺所致的脾指数下降作用显著强于玉屏风散煎剂。
5对免疫细胞因子的影响
梁春敏等[7]观察了玉屏风散试验血清对小鼠IL|2产生的促进作用，结果30 min至2 h时相血清可促进脾淋巴细胞产生IL|2,与正常对照组比较,差异均有统计意义(P<0.01或P<0.05),1 h时相血清最为明显。张磊等[6]报道，玉屏风散多糖在连续14 d灌胃给药情况下,可恢复小鼠注射适量环磷酰胺所致的外周血IL|1、IL|2浓度的降低。按灌胃给药量的10 %静脉注射玉屏风散多糖1 d即可使外周血IL|2水平上升，3 d可使IL|1升高,去蛋白含药血清连续注射14 d,可使血清IL|1和IL|2水平提高。
6 对环核苷酸的影响
环核苷酸(cAMP,cGMP)是影响免疫功能的重要物质。陈新等[24]研究表明,玉屏风散对风寒刺激导致的小鼠胸腺组织cAMP含量及cAMP/cGMP比值升高有预防作用,从而有效地预防淋巴细胞免疫功能的抑制。进一步地观察发现玉屏风散对小鼠脾细胞cAMP呈现双向调节作用,即使cAMP低者升高,高者则降低,且cAMP变化与PFC变化呈逆相关,即cAMP升高则PFC降低，cAMP降低则PFC升高；与cGMP呈正相关,与cAMP/cGMP变化则呈逆相关。由此证明玉屏风散具有双向调节性免疫药理活性[25]。
7 对迟发型超敏反应的影响
迟发型超敏反应(DTH)实验是反应机体细胞免疫功能的一个经典指标,玉屏风散加味可显著增强小鼠绵羊红细胞(SRBC)所致迟发型超敏反应,并拮抗氢化可的松引起的小鼠DTH反应抑制,使之恢复至正常水平,说明它能刺激细胞免疫功能,并使小鼠受抑制的细胞免疫功能恢复正常[26]。张磊等[3，6]研究表明：玉屏风散多糖能显著对抗DNFB(2,4-二硝基氟苯)所致的迟发型超敏反应的减弱。玉屏风散多糖在连续14 d灌胃给药情况下,可对抗注射适量环磷酰胺引起的迟发型超敏反应减弱。
8结语
由上述可见,玉屏风散对免疫系统效应的可靠性是得到明确论证的，近年药研究也围绕对机体免疫功能的影响,初步揭示了本方“益气固表”的药效学基础。但对本方药理作用的物质基础,即其调节免疫功能的活性成分的研究成果尚不显著。由于效应成分群不明确，大多玉屏风散制剂采用水提醇沉最一般的提取工艺，用药剂量大，限制了剂型的选择，限制了制剂新技术、新工艺的实施。而质量控制采用黄芪甲苷等几个成分的鉴别方法也难以代表全方。
目前,中药复方化学成分组成的高度复杂性和中药复方药效物质基础不明确，是中药药理学和复方化学研究共同的难点。针对此，在中药复方药理的方法学上出现了新的研究思路和设想。近年来对玉屏风散的血清药理学有较多报道，但血清药理学方法作为复方的一种体外研究方法仍具有很大的局限性:血清中成分复杂，血清本身的多种成分都可能与中药成分或实验中的外加酶系、培养细胞等相互作用，很难认识其真正的作用机制。而化学分离方法带有很大的盲目性，容易造成复方成分的丢失。生物色谱法是一种崭新的生物活性成分研究方法，它通过中药中多种效应成分与细胞膜上的已知及未知的靶点相结合，从而对其色谱行为进行解析，得到效应成分或成分群。目前笔者正采用该方法对玉屏风散进行研究，并初步取得了一些进展。总之，研究玉屏风散的免疫功能、调节机体免疫状态的作用靶点（或靶点群）、有效化学成分（有效化学成分群）对防治病毒感染的中医药理论与临床实践、对防治病毒感染的药物开发均有重要意义。因此，这是今后研究需要努力的方向。对玉屏风散深层次的开发，能更好地为人类健康服务。
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