中药复方肤灵浸膏对PCA大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a的影响
作者：周福松 王帅 关素珍 刘婷婷 韩楠 苏先华
【摘要】 目的：观察中药复方肤灵浸膏对被动皮肤过敏反应（PCA）大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a的影响。 方法：采用天花粉氧化铝凝胶混悬液致大鼠被动皮肤过敏反应动物模型，观察复方肤灵浸膏对模型大鼠血管活性物质血栓素B2（TXB2）、6?酮?前列腺素F1a（6?keto?PGF1a）及比值的影响。结果：复方肤灵浸膏能明显降低模型大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a的含量，并纠正TXB2/6?keto?PGF1a比值的平衡失调。结论：中药复方肤灵浸膏可降低PCA大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a含量，并纠正TXB2/6?keto?PGF1a比值的平衡失调。
【关键词】 大鼠 PCA 复方肤灵浸膏 TXB2 6 keto PGF1a
中药复方肤灵浸膏系导师叶品良副教授湿疹的临床经验方，由凉血散瘀汤[1]演化而来，具有凉血散瘀、清热除湿及疏风止痒的功效。研究表明，湿疹与I型变态反应关系密切[2]，而皮肤过敏反应（passive cutaneous anaphylaxis reaction）是Ⅰ型变态反应常用动物模型[3]。本研究观察中药复方肤灵浸膏对PCA大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a及其比值的影响，为复方肤灵浸膏防治湿疹的作用机制提供实验依据。
1 实验材料
1.1 药物与试剂 复方肤灵浸膏配方:生地黄、紫草、丹参、牡丹皮、薏苡仁、竹叶、土茯苓、蝉蜕、荆芥、白鲜皮等，均购自成都德仁堂。药液制备：先按照临床用药煎煮方法熬制成常规药液，再用电热恒温水浴锅40～60℃低温浓缩成3.5g生药/ml高浓度药液，相当于临床成人日用量的14倍。中、低剂量于给药时用蒸馏水分别校正药液浓度为1.75g生药/ml和0.875g生药/ml，相当于临床成人用量的7倍与3.5倍。醋酸泼尼松片(强的松，浙江仙琚制药股份有限公司，批号:061210)，药物浓度3.5mg/kg相当于《中华人民共和国药典》2005年版规定临床成人日用量的7倍。天花粉(药品生物制品检定所)；伊文斯蓝（Evans Blue，solarbio公司)；氢氧化铝凝胶(内蒙古新宏生物科技有限公司，批号：070204)；6?酮?前列腺素F1a放射免疫分析药盒(北京北方生物技术研究所，批号：070820)；血栓素B2放射免疫分析药盒(北京北方生物技术研究所，批号：070820)。
1.2 动 物 SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，由成都中医药大学实验动物研究中心提供，合格证号：scxk（川）2004－11。在成都中医药大学中西医结合实验室标准化饲养房内以颗粒饲料喂养，雌雄分笼每笼5只，室温22～24℃，相对湿度50%。
1.3 仪 器 天平PA2003(上海天平仪器厂);电热恒温水浴锅DSY?2?4孔(北京国华医疗仪器厂)；722Ｓ可见光分光光度计（上海棱光技术有限公司）；高速低温离心机(德国Biofuge公司)；GC?1200γ放射免疫分析仪(科大创新股份有限公司)。
2 实验方法
2.1 抗血清制备 用0.5%天花粉氢氧化铝凝胶混悬液(天花粉5mg混悬于1 ml 5％氢氧化铝凝胶内)于SD大鼠脚掌注射，每个脚掌注射0.1ml，4个脚掌共注射0.4m1。第14天（IgE高峰时间）处死动物采血，血液经低速离心，分离血清，置低温冰箱（－20℃）备用。
2.2 被动皮肤致敏 取健康SD大鼠，雌雄各半，体重180～220 g。随机分为6组：肤灵浸膏高剂量组、中剂量组、低剂量组，强的松组，模型组和空白组。在乙醚浅麻醉下于大鼠背中线两侧，距脊柱1.5cm处剪毛，每侧取2个点，间隔1.5cm。取上述含IgE的抗血清，用生理盐水稀释成1∶20，于剪毛的各点皮内注射0.1ml（空白组注射等体积生理盐水）。同时校正药液浓度后，灌胃给药（或蒸馏水）1.5 ml/100g。1天1次，连续3次。末次给药后1小时，尾静脉注入1％伊文斯蓝生理盐水1ml/100g（含0.1％天花粉）[4]。20min后，10%水合氯醛腹腔注射麻醉，EDTA试管腹主动脉取血，低温离心，分离血浆，按编号贮存于超低温冰箱(?80 ℃)备用；按试剂盒说明书分别测定血TXB2、6?keto?PGF1a含量。
PCA抑制百分率＝100-用药组平均值直径/模型组平均值直径×100[4]
2.3 统计学方法 使用SPSS13.0 FOR WINDOWS统计软件包处理数据，采用方差分析。
3 实验结果
与空白组比较，模型组大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a的含量均明显升高（P均<0.01）；与模型组比较，肤灵浸膏高、中剂量组TXB2、6?keto?PGF1a的含量明显降低（P<0.05或P<0.01）; 肤灵浸膏中剂量组能明显调节模型大鼠血TXB2/6?keto?PGF1a比值（P<0.01），见表1。表1 各组TXB2、6?keto?PGF1a含量比较
4 讨 论
中药复方肤灵浸膏能明显降低模型大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a血管活性物质的含量，并能调节其比值平衡，通过对血管活性物质的调节达到抑制Ⅰ型变态反应的作用。
TXA2是血小板表面激活后产生的花生四烯酸经环氧化酶作用后的产物，由血小板微粒体合成并释放，其稳定形式是TXB2，能强烈地收缩血管和促进血小板凝集。PGI2是花生四烯酸经环氧化酶代谢后生成的另一产物，由血管壁内皮细胞合成和释放，其作用与TXA2相反，具有舒张血管，抑制血小板活化、聚集的作用。TXA2 和PGI2的性质不稳定，在水溶液中很快降解成为TXB2和6?keto?PGF1α。TXA2(TXB2)与PGI2(6?keto?PGF1a)形成一对生物活性作用相反，但又互相制约，是维持内环境稳定的重要物质[5]。测定其稳定的代谢产物TXB2和6?酮?PGF1a能较好地反映TXA2和PGI2的比例关系。
在正常生理状态下，血浆或组织中TXA2和PGI2失调是造成血小板聚集，血管痉挛收缩或血栓形成的原因之一[6]。因此，TXB2和6?keto?PGF1α常作为一组活血化瘀的指标。本实验研究表明，中药复方肤灵浸膏能明显降低模型大鼠血TXB2、6?keto?PGF1a的含量，并纠正TXB2/?keto?PGF1a比值的平衡失调。说明中药复方肤灵浸膏对血小板凝集、血管痉挛收缩或血栓形成有一定遏制作用，这与肤灵浸膏的凉血散瘀的功效相吻合；对TXA2和PGI2的变化和失衡有明显的调节作用，从而对Ⅰ型变态反应有一定的抑制作用，有助于缓解或预防湿疹的发生。
【】
1 关素珍，苏先华，周福松，等.凉血散瘀汤湿疹的临床疗效观察.新疆中医药，2007,39(10):68?69
2 李林峰.皮炎湿疹的发病机制.北京: 人民军医出版社，2006:64?85
3 陈子珺.抗过敏实验方法及过敏反应动物模型研究进展.云南中医学院学报,2000,23(3):11?17
4 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学.第3版.北京:人民卫生出版社，2005:1407?1409
5 Serebruany VL,Herzog WR,Gurbel PA.Serial changes of the plasma prostanoids during myocardial ischemia?reperfusion in swine.Effects of magnesium,diltiazem,and a novel Mac?l inhibitor.Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids,1997,56(2):135?142
6 Tosaki A,Hellegourch A,Braquet P.Cicletanine and reperfusion injury:is there any correlation between arrhythmias,6?keto?PGF1 alpha,thromboxane B2,and myocardial ion shifts (Na+,K+,Ca2+and Mg2+)induced by ischemia/reperfusion in isolated rat heart.J Cardiovasc Pharmacol,1991,17(4):551?559
