肺纤维化中TGF-β1动态表达的Meta分析
作者：杨霞 丁鹏 高宏生 兰晓霞 魏茂提 王世鑫
【摘要】 目的：综合分析确定肺纤维化中TGF-β1（Transforming growth factors-β1，转化生长因子）表达的动态变化趋势。方法： 采用Meta分析方法对二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化中TGF-β1表达的进行综合分析。结果：本次检索文献中，对TGF-β1在肺纤维化中的时相性研究中，二氧化硅组时间点主要有1、3、5、7、14、28、60d，博莱霉素组时间点主要有1、3、7、14、21、28d。二氧化硅组1、3、5、60d时间点的标准化差值（Standardize mean difference，SMD）无统计学意义（P>0.05），其余时间点有统计学意义（P<0.05）。博莱霉素组，各时间点的标准化差值都具有统计学意义（P<0.05）。结论： TGF-β1在二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化过程中表达升高，呈动态变化趋势，且变化趋势相近，但二氧化硅组表达水平高于博莱霉素组。
【关键词】 二氧化硅 博莱霉素 肺纤维化 TGF-β1 Meta分析
TGF-β1由多种细胞分泌，如肺泡巨噬细胞、上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞等。它作用于多个环节，通过刺激各种细胞外基质的合成和沉积以及抑制细胞外基质蛋白的降解它作用于多个环节，通过刺激各种细胞外基质的合成和沉积以及抑制细胞外基质蛋白的降解两个方面，最终促使肺间质胶原的沉积，而且TGF-β1是刺激Ⅰ、Ⅲ型胶原基因转录的主要细胞因子［1］，在组织器官的纤维化中发挥了十分重要的作用。目前，越来越多的动物实验研究证实TGF-β1在二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化的发生、过程中发挥重要的作用。但单个研究所涉及的时间点有限, 不能整体反映二氧化硅、博莱霉素诱导的肺组织纤维化中TGF-β1表达的时间变化趋势。我们对到2007年1月为止发表的关于二氧化硅、博莱霉素诱导的肺组织纤维化中TGF-β1表达的动物实验研究文献进行Meta分析，以期获得TGF-β1在肺纤维化中调节作用的确切结论。
1 资料与方法
1.1 文献的收集
利用CNKI、维普、Pubmed、Medline等数据库检索,文献追溯等途径收集国内外公开发表的关于二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化中TGF-β1表达的动物研究文献。
1.2 文献资料的纳入与排除标准
纳入标准: ① 研究对象为wistar大鼠、SD大鼠、昆明种小鼠等；②研究的细胞因子为TGF-β1；③各文献须直接或间接提供综合的统计指标 x±s；④ 对于相同报道的文献采用信息提供最多者；⑤建模试剂为二氧化硅、博莱霉素；⑥选取样品为肺组织。
排除标准: ①检索文献是综述类文章；②检索文献没有具体的数据或仅以图表的形式表达数据。
1.3 质量控制
对重复报告、报道信息少、实验样本选择特殊等无法利用的文献予以删除。
1.4 统计学分析
阅读文献,按Meta分析的要求整理数据。采用均数,标准差值Q检验法,对研究文献进行异质性检验。若各研究间的均数,标准差齐性,选用固定随机效应模型，反之选用随机效应模型进行合并。由于各个资料的原始数据x±s数值单位不统一，故分析过程中将原始数据标准化，因此结果为标准化差值［2］。
2 结果
2.1 文献检索的结果
二氧化硅组：有3篇［3～5］符合要求，全部文献分别发表在2种杂志上，另收集到1篇未发表文章。对照组累计150只实验动物，实验组累计151只实验动物。博莱霉素组：有13篇［6～18］符合要求，其中有5篇为硕士学位，全部文献分别发表在8种杂志上。对照组累计252只实验动物，实验组累计270只实验动物。见表1。
2.2 TGF-β1在肺纤维化中动态表达趋势的研究
从检索到的文献来看，二氧化硅组选取的时间点为1、3、5、7、14、21、28、30、45、60d；样品种类为肺组织、肺匀浆、血浆、血清、支气管上皮细胞、肺间质细胞、肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞；检测方法为免疫组化、组织芯片微阵列、ELISA。博莱霉素组选取的时间点为1、3、7、14、21、28、30、60d；样品种类为肺泡支气管灌洗液、血清、血浆、血管内皮及周围间质、炎性细胞、支气管上皮细胞；检测方法为免疫组化、ELISA、定量EIA。但由于有的时间点、检测方法或样品种类只有1篇文献报道，因此本研究最终选取样品种类为肺组织，实验方法为免疫组化，二氧化硅组选取的时间点为1、3、5、7、14、28、60d，博莱霉素组选取的时间点为1、3、7、14、21、28d。二氧化硅组SMD值在1、5、21、60d差异无统计学意义，其余时间点有统计学意义。博莱霉素组SMD值，各时间点差异都具有统计学意义。各文献资料的分析结果见表2、3。
表1 纳入的基本情况（略）
表2 二氧化硅诱导的肺纤维化中TGF-β1表达的Meta分析结果（略）
表3 博莱霉素诱导的肺纤维化中TGF-β1表达的 meta分析结果（略）
图1 肺组织中TGF-β1 SMD值的动态变化趋势（略）
3 讨论
1991年，由Gross［19］和Fleiss给Meta分析做了定义：“Meta分析是一类统计方法，用来比较和综合针对同一问题所取得的研究结果，比较和综合的结论是否有意义。”肺纤维化疾病包括特发性肺纤维化、结节病、尘肺、过敏性肺炎、药物和放射线导致的纤维化,以及与胶原血管疾病有关的致纤维化肺泡炎等，在动物模型中，常用的主要为二氧化硅、博莱霉素来所致的肺纤维化。二氧化硅、博莱霉素致肺纤维化动物模型的研究表明肺纤维化发病过程可概括为肺损伤和肺纤维化两个阶段,两种实验模型相近。但以往关于二氧化硅、博莱霉素诱导的肺组织纤维化中TGF-β1表达的单个研究所涉及的时间点有限, 不能从整体水平反映TGF-β1表达的时相性，甚至会出现研究结论不一致的情况。为此本研究在文献检索的基础上,对二氧化硅、博莱霉素诱导的肺组织纤维化中TGF-β1表达的相关文献进行了Meta分析。
TGF-β1广泛分布于正常大鼠的肺组织，其免疫活性主要位于II型肺泡上皮细胞、细支气管上皮细胞、肺泡内巨噬细胞。Meta分析结果表明，TGF-β1在二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化动物模型肺组织中表达随时间延长都呈现先升高而后逐渐降低的趋势，二氧化硅组，第7d达到表达高峰, 14d、28d逐渐下降；而博莱霉素组是第14d达到表达高峰，28d逐渐下降,但二氧化硅组TGF-β1表达有高于博莱霉素组的趋势，这种趋势可能由于二氧化硅和博莱霉素理化性质不同,博莱霉素易于扩散进入肺间质,并经毛细血管进入循环,使肺泡中博莱霉素量逐渐减少,对肺的损伤作用减弱。
异质性检验是检验研究间效应量、研究质量与样本含量等方面的差别是否有统计学意义。根据异质性检验的结果来选择统计分析模型（固定效应模型、随机效应模型）［20］。本研究中我们根据采用了随机应模型降低异质性程度。
Meta分析中最见的偏倚有发表偏倚和查询偏倚。为降低发表偏倚，本研究通过多种途径尽可能全面的收集有关文献。对于重复发表的文献，一律剔除其中质量较差文献，使重复发表发表偏倚得以控制。
综上所诉, TGF-β1在二氧化硅、博莱霉素诱导的肺纤维化过程中表达升高，参与了肺间质纤维化的形成。TGF-β1表达呈动态变化趋势，在二氧化硅、博莱霉素组表达趋势相近，但早期二氧化硅组表达水平高于博莱霉素组。
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