全自动微生物分析系统在检测产超广谱β内酰胺酶细菌方面的应用
【关键词】 ,产超广谱β
［摘 要］ 目的：了解产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的细菌在内的发生率及耐药特点，指导临床合理用药。方法：采用法国梅里埃公司生产的VITEK32全自动微生物分析系统（VITEKAMS）的GNS120药敏卡对从临床分离出的143株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌作ESBLS检测及药敏试验。结果：143例菌株共检出43例ESBLS阳性菌，其阳性率为30.1%，其中产ESBLs大肠埃希菌阳性率为29.6%，产ESBLs肺炎克雷伯菌阳性率为31.4%；各科室产ESBLs菌的检出率以ICU病区最高，各种标本产ESBLs菌的检出率以痰、尿较多；产ESBLs菌对亚胺培南全部敏感，同时对哌拉西林/他唑巴坦耐药率较低。结论：VITEK32全自动微生物分析系统的GNS120药敏卡可准确、快速地检出产ESBLs菌。临床医生应重视产ESBLs菌的检测，合理选用抗生素，避免耐药菌株的产生，有效地控制其在医院内的扩散。
［关键词］ 产超广谱β内酰胺酶；耐药性；大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌
超广谱β内酰胺酶（ESBLs）是指由质粒介导的从TEM1、TEM2和SHV1的1个或数个氨基酸突变而来的能赋予细菌对头孢菌素类、氨曲南以及青霉素类耐药的一类酶［1］，可以通过结和、转化和转导等形式使耐药基因在细菌间扩散，从而造成严重的院内交叉感染和菌株的多重耐药，给临床带来极大困难。为了解我院产ESBLs菌发生率及耐药特点，以控制产ESBLs菌的传播和流行，我们采用VITEKAMS的GNS120药敏卡检测了大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs及耐药情况，现将结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 菌株来源
所有菌株均来自2003年1月至12月本院住院及门诊患者的痰、血、尿等各类标本。
1.2 仪器和试剂
VITEK32全自动微生物分析系统、GNI+鉴定卡和GNS120药敏卡均为法国梅里埃公司产品。
1.3 质控菌株
大肠埃希菌ATCC25922，大肠埃希菌ATCC35218。
1.4 细菌培养和鉴定
菌株分离按全国检验操作规程进行，用VITEKAMS的GNI+专用卡鉴定到种，其中大肠埃希菌108株，肺炎克雷伯菌35株。
1.5 ESBLs检测
采用GNS120药敏卡，严格按说明书操作，在仪器专家系统的判断下自动给出被检菌是否为产ESBLs菌株，同时可得到药敏结果。
2 结果
2.1 菌种及产ESBLS菌阳性率
从临床感染的各类标本中分离到大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共143株，产ESBLs菌检出率为30.1%。其中大肠埃希菌108株，ESBLs阳性32株，阳性率为29.6%；肺炎克雷伯菌35株，ESBLs阳性11株，阳性率为31.4%。
2.2 143株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs与不产ESBLs的耐药情况(见表1)。表1 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs与不产ESBLs的耐药分析（略）
2.3 2种产ESBLs菌在各科室的分布及阳性率
以ICU病区为最高（41.2%），其次为呼吸科（30.6%）、其他病区（26.6%）、老年科（8.8%）、门诊（7.7%）。详细情况见表2。表2 各病区产ESBLs菌的分布病区（略）
2.4 各种标本产ESBLs菌的情况
来源于痰液、尿液中大肠杆菌和来源于痰液中的肺炎克雷伯菌ESBLs阳性比例最高，其他情况见表3。表3 各种标本产ESBLs菌的阳性率标本来源（略）
3 讨论
ESBLs由质粒介导，往往由普通的β内酰胺酶基因（TEM1，TEM2，SHV1）突变而来，主要由大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产生。ESBLs的检测方法多样，双纸片协同试验操作简单，但纸片中心间距不好控制，对结果影响很大［2］；Etest法操作简便、结果准确，但有时克拉维酸从试条扩散致使对侧的抑菌环变形，MIC值不能读取。本试验采用VITEKAMS检测产ESBLs菌方法简单快速、结果准确可靠，其阳性检出率为99.5%［3］，同时还可对14种抗生素进行耐药性分析。
本试验结果显示：产ESBLs菌株的总检出率为30.1%，其中产ESBLs大肠埃希菌的检出率为29.6%，产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为31.4%，与报道结果有差异。另外各种临床标本中产ESBLs菌株的检出率以痰液和尿液最高，各病区产ESBLs菌株的检出率以ICU病区最高。总之，不同地区、不同甚至不同病区间产ESBLs菌株的情况不同。比较产ESBLs菌与不产ESBLs菌对14种抗生素的耐药性发现，除亚胺培南和哌拉西林/他唑巴坦外，产ESBLs菌对其他12种抗生素的耐药性显著高于不产ESBLs菌。因此，凡是产ESBLs菌应提示临床不管体外是否敏感，免用所有青霉素类、头孢菌素类和氨曲南，应首选亚胺培南或加酶抑制剂类复合抗生素。综上所述，由于临床大量使用三代头孢菌素β内酰胺类抗生素，使产ESBLs的细菌逐年增多，产ESBLs细菌引起医院暴发感染也时有报道。产ESBLs细菌感染，由于其多重耐药性给临床治疗带来了困难。用VITEKAMS仪器法，能快速、准确地检出产ESBLs的细菌，尽早提示给临床医生，减少主观性、盲目性的徒劳用药，指导临床医生合理使用抗生素，有效控制产ESBLs细菌在医院内的扩散。
文献：
［1］倪语星.质粒介导的超广谱β内酰胺酶的耐药性问题及检测［J］.中华医学检验杂志，1999，22（5）：316317.
［2］徐英春，金岩，王澎.三种方法检测超广谱β内酰胺酶的敏感性比较［J］.中华医学检验杂志，1999，22（6）：355357.
［3］Sanders CC,Barry AL,Washington JA,et al.Detection of extendedspectrum betalactdmaseproducing members of the family Enterobacteriaceae with the VITEK ESBL test［J］.JClinMicrobiol,1996,34(12):2997.
