细胞因子在急性肺损伤_急性呼吸窘迫综合征中的作用

摘要:急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征是多病因所致的一种急性呼吸衰竭,病死率高,严重威胁人类的健康。自1967年,急性呼吸窘迫综合征首次报道以来,对其发病机制的探讨一直是研究领域的热点。大量实验和临床证据表明,促炎和抗炎细胞因子在急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征中起关键作用。现对细胞因子在急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征的发病中的作用进行阐述。
 
关键词:急性肺损伤;急性呼吸窘迫综合征;细胞因子;作用
 
急性肺损伤(acute lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)是指机体遭受严重的创伤、休克、酸中毒及严重感染等因素引起的继发性弥漫性肺实质损伤,临床表现为急性呼吸窘迫和顽固性低氧血症[1]。ALI和ARDS具有性质相同的病理生理改变,主要病理特征为肺泡渗出液中富含蛋白质的肺水肿及透明膜形成,并伴有肺间质纤维化。由肺内炎性细胞(如嗜酸性粒细胞、巨噬细胞)为主导的肺内炎性反应失控导致的肺泡毛细血管损伤,是形成肺毛细血管通透性增高、肺水肿的病理基础。病理生理改变以肺顺应性降低、肺内分流增加及通气/血流比例失调为主。严重ALI或ALI的最严重的阶段被定义为ARDS。ALI是导致重症患者呼吸衰竭的主要原因,大量实验和临床证据表明,促炎和抗炎细胞因子在ALI/ARDS中起关键作用[2]。重建促炎和抗炎细胞因子平衡,协调细胞因子的释放,阻断炎性介质的瀑布反应已成为ALI/ARDS研究的热点[3]。
1　细胞因子的概念
细胞因子是由炎性细胞刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质,代写作为细胞间信号转导分子,主要调节免疫应答、参与免疫细胞分化发育、介导炎性反应刺激造血功能并参与组织修复等。根据细胞因子在炎性反应中的不同作用分为:促炎细胞因子和抗炎细胞因子[4]。
2　细胞因子的特性
2.1　促炎细胞因子　也称前炎性因子,主要包括肿瘤坏死因子( tumor necrosis factor, TNF)、白细胞介素1( interleukin-1, IL-1)、IL-6、IL-8、干扰素γ( interferon-γ,IFN-γ),与炎症的发生密切相关[4]。
2.1.1TNFTNF是一种单核因子,主要由单核细胞和巨噬细胞产生,脂多糖是较强的诱导剂。IFN-γ、单核细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)、粒-单核细胞集落刺激因子(granulocyte macro-phage colony stmi ulating factor,GM-CSF)对单核细胞/巨噬细胞产生TNF-α有诱导作用,而前列腺素则有抑制作用。
TNF-α被认为是引起ALI/ARDS最重要的细胞炎性因子之一。其作为重要的信号因子,能启动、放大和延续全身或局部炎性反应。代写毕业论文 ALI/ARDS时, TNF-α主要来自肺泡巨噬细胞,可以激活损伤的粒细胞、内皮细胞、血小板等,进一步释放氧自由基、脂质代谢产物、溶酶体酶等介质,诱导组织细胞损害,引起ALI/ARDS。TNF-α能诱导IL-10及IL-4的合成,而二者又可强烈的抑制TNF-α、IL-1、IL-6等炎性介质的合成。TNF-α还可动员、趋化、黏附、聚集、激活多形核白细胞(polymorphonuclear, PMN),并能动员骨髓白细胞进入血液循环。TNF-α能促进PMN的吞噬能力,促进PMN脱颗粒和释放溶酶体,增强PMN呼吸爆发,产生大量脂质代谢产物,引起为血管舒缩异常和微血栓形成,促进ALI/ARDS发生。
2.1.2IL-1IL-1是另一种主要的促炎因子,与TNF一起共同启动炎性反应[5]。IL-1是由巨噬细胞产生的炎性细胞因子,分为IL-1a、IL-1β和IL-1受体拮抗剂( interleukin-1 receptor antagonist, IL-1ra)。IL-1β又名淋巴细胞活化因子、前炎性反应细胞因子,其可刺激内皮细胞表达IL-8和白细胞黏附因子, IL-8可促进中性粒细胞的跨膜游出。
IL-1可激活血管内皮细胞,增加炎性介质的释放,诱导或上调血管内皮细胞表达黏附分子,吸引PMN聚集。与TNF相似, IL-1的生物学效应都是因为其他致炎因子生成的增多而引起的。因为IL-1位于细胞表面,所以活化的巨噬细胞可以通过直接的细胞接触而使T细胞增殖。IL-1还可以增量调节环氧化酶2的表达,而增强前列腺素合成的关键阶段。
2.1.3IL-6　又名B细胞刺激因子,具有广泛生物活性和免疫调节作用。IL-6主要由T细胞、内皮细胞、单核细胞产生。
当创伤、休克、感染、手术等刺激因素作用于机体时, IL-6可异常增高,其激活补体及C-反应蛋白的表达,产生细胞损害,同时可诱导产生黏附因子,还可激活星形胶质细胞、血管内皮细胞,引起淋巴细胞活化,进一步导致炎性反应的加剧。另外, IL-6可以激活中性粒细胞,使其释放一系列超氧化合物,损伤细胞[6]。研究表明, IL-6作为炎性细胞分化的主要调节因子,在ALI中浓度非常高,促进激活巨噬细胞分化和浸润,还可以上调黏附分子和其他细胞因子的表达,从而加强炎性反应[7]。
2.1.4IL-8IL-8是第一个被发现的具有活化趋化作用的细胞因子,有由多种参与炎性反应的细胞产生,如巨噬细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和内皮细胞等,是最强的PMN和T淋巴细胞激活和趋化因子,它的血浆水平被认为是严重组织损伤的标志[8]。它的主要作用是激活和趋化吸引中性粒细胞到炎症部位,而且能够促进中性粒细胞激活,触发脱颗粒,表面黏附分子的表达及活性氧分子产物释放,是中性粒细胞激活和迁移的重要调节因子[9]。有研究表明,在ARDS时血清IL-8水平显著升高,而在发病早期的血清IL-8水平可以作为ARDS的预后指标[10]。
2.1.5IFNIFN参与固有免疫应答。在19世纪50年代,人类第一次发现IFN时,把它当作是白细胞分泌的与病毒感染有关的因子。深入研究后发现, IFN-γ除了有抑制病毒感染的作用外,还有广泛的促炎性反应效能。IFN-γ是由Th1细胞(CD+4、CD+8)及杀伤细胞生成。它还能促进CD+4T细胞分化成Th1细胞,能通过正反馈扩增其产物。其主要作用似乎是启动循环及阻止巨噬细胞,诱导自然免疫应答中其他促炎蛋白的表达,包括TNF及IL-1。ALI可能是由IFN-γ激活肺泡巨噬细胞所介导产生的。另外, IFN-γ阻止CD+4T细胞分化为Th2细胞,从而阻止抗炎因子IL-4、IL-10的分泌。
2.2　抗炎因子特性　主要包括IL-4、IL-10、IL-13、IL-1ra,有拮抗炎性介质的作用,抑制炎症的发展加剧[4]。
2.2.1IL-10IL-10在小鼠主要由Th2细胞产生,而人IL-10主要来源于CD+4、CD45RO+记忆性T细胞,另外B细胞、单核巨噬细胞及正常气道上皮细胞也可产生IL-10。代写硕士论文 IL-10是一种重要的抗炎因子和免疫抑制剂,通过多种机制下调炎性反应[11]。IL-10能抑制单核巨噬细胞产生TNF-α、IL-1、IL-8、GM-CSF、G-CSF,抑制Th1产生IL-2和IFN-γ,并下调单核细胞表达主要组织相容性复合物Ⅱ类分子[12];抑制缺血再灌注损伤小鼠肺核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)活性,从而抑制细胞因子转录;对抗TNF-α、GM-CSF、G-CSF抑制中性粒细胞凋亡;另外, IL-10能增强受脂多糖刺激的中性粒细胞释放IL-1ra,从而和IL-1竞争受体。有实验表明,抗IL-10可以使IL-6 mRNA表达增强[13]。因此, IL-10在全身性炎性反应过程中起保护作用。气管吸入外源性IL-10能降低ALI小鼠模型支气管肺泡灌洗液中的TNF-α,血管通透性降低,同时降低细胞黏附分子的表达, IL-10保护ALI的作用明显高于IL-13、IL-14、IL-12。
2.2.2IL-4IL-4是由Th2细胞生成并通过正反馈作用促进CD+4细胞分化为Th2细胞,是重要的抗炎因子之一,在体液免疫及抗原呈递中起关键作用。另外, IL-4对于Th1细胞的生成有下调作用,并能抑制TNF、IL-1、IL-8、前列腺素E2的生成。
2.2.3IL-13IL-13和IL-4生物学作用相似,但并不直接作用于T细胞。IL-13抑制环氧化酶2的活性,抑制前列腺素的生成,促进抗炎介质脂氧素A4的生成。IL-13还可增加IL-1ra的生成并可以减弱白细胞内皮细胞的相互作用,从而抑制炎性反应。
3　细胞信号转导通路的作用
最新研究发现,一些细胞信号转导通路与ARDS发病密切相关,如Toll样受体(Toll like receptor,TLRs)G蛋白、肾上腺素受体、NF-κB、各种蛋白激酶家族(MAPK等)、JAR激酶信号转导α-转录激活因子( JAK/STAT)等,特别是TLRs(尤其是TLR4、TLR2),在机体免疫应答和防御过程中可能起到十分重要的作用,但其在ARDS发病中的确切机制有待进一步阐明[14]。另外, NF-κB的激活与ALI/ARDS关系密切,NF-κB能与多种基因启动因子和增强子特定的κB序列结合,参与机体急性炎性反应的发生和发展。TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、M-CSF、GM-CSF、细胞间黏附分子1、E-选择素(ELAM-1)、血管内皮细胞间黏附分子1等因子均受NF-κB调节。TNF-α、IL-1β、脂多糖/细菌毒素、自由基/氧化剂、放射线、病毒及其代谢产物等可促进NF-κB的活化,激活的NF-κB进入细胞核内,与靶基因κB位点结合,迅速诱导靶基因的转录,调控细胞因子、化学趋化因子、黏附分子协同刺激分子的相关的基因表达,从而引起上述炎性介质的释放,导致肺泡内炎性细胞浸润,致肺损伤[15-17]。Le Tultzo等[18]研究证实,在ALI大鼠模型中,肺组织中NF-κB被激活的同时,伴有IL-1、TNF-α等细胞因子mRNA表达增强,抑制NF-κB的活化可减轻ALI损伤程度。目前证实,NF-κB是一个重要的转录因子,广泛参与机体免疫、炎症、应激反应的生理病理过程[19]。
4　细胞因子在ALI/ARDS中的变化
自1967年Ashbaugh等首先报道ARDS以来,经过几十年的研究,对ARDS的本质和发病机制有了较为深刻地认识,但ALI/ARDS发病机制错综复杂,迄今尚未完全阐明,随着失控的炎性反应引发多脏器功能不全综合征理论的出现,使人们对ALI/ARDS认识转向对炎症发生、调控的认识, ALI/ARDS是全身炎性反应在肺部的表现,也是机体正常炎性反应过度的结果,是炎症瀑布反应发展过程中的一个阶段。其中炎性介质构成了ALI/ARDS炎性反应和免疫调节的“细胞因子”,通过不同的信号转导途径,调控机体的炎性反应。机体内复杂的细胞因子网络中,细胞因子之间相互作用形成了许多正负反馈。在炎性反应中,促炎性介质与抗炎介质经常处在此消彼长动态变化之中,深入研究促炎因子和抗炎因子在炎性反应中的变化,有助于对ARDS发病机制的研究。
细胞因子之间存在复杂的相互作用,如促炎因子TNF-α可刺激IL-4、IL-10等抗炎因子的分泌,而后者被激活后又可强力抑制TNF-α、IL-1、IL-6等促炎因子的合成,相互作用。
近年的研究证实,在ALI/ARDS患者中可检测到多种细胞因子,例如ARDS患者肺泡强灌洗液中前炎性因子(TNF、IL-1、INF-γ、IL-6)和抗炎因子( IL-4、IL-10、IL-13、IL-1ra等)均明显升高。代写职称在兔ALI模型中, TNF-α首先增高,于0. 5h达到高峰,随后IL-1β和IL-8增高,并于2h达高峰,也因此认为TNF-α是启动因子[20]。另有研究发现,ARDS患者血浆IL-1升高[21]。ALI患者血浆IL-6、IL-8、IL-10,水平升高,而且IL-6、IL-8血浆水平与ALI的发病率和病死率密切相关。
ALI/ARDS患者前3d IL-6、IL-8、TNF受体、肺表面活性相关蛋白D产生过多提示临床预后不佳[22]。研究也证明,促炎介质和抗炎介质的不平衡是加重炎性反应,促进ALI/ARDS发生的重要因素。在ALI/ARDS中促炎因子和抗炎因子均增高,但抗炎因子相对浓度低,且时间滞后。研究发现, ALI大鼠肺组织中TNF-αmRNA表达2h达高峰,随后迅速下降;IL-1βmRNA表达2h显著增高, 6h达高峰,随后迅速下降; IL-1ramRNA表达晚于前者, 6h开始升高且为峰值, 24h仍高于对照组[23]。表明在ALI时,TNF-α及IL-1βmRNA表达明显早于IL-1ramRNA,提示ALI早期存在炎性介质/抗炎介质失衡。国外研究发现,有ARDS危险患者第1d和第3d支气管肺泡灌洗液中IL-10浓度偏低,但ARDS患者第1d和第3d支气管肺泡灌洗液中IL-10浓度显著升高,而持续ARDS患者的支气管肺泡灌洗液中IL-10浓度在21d几乎测不到[24]。同时,在ARDS开始期支气管肺泡灌洗液中TNF-α/IL-10比值减小,而在ARDS进展期上升。
 
5　展　望
通过对ALI/ARDS相关细胞因子的研究发现,代写工作促炎和抗炎细胞因子的失衡是关键,因此重建细胞因子的平衡有望成为ALI/ARDS的突破点,通过补充外源性抗炎因子,抑制炎性细胞因子的产生,以及补充促炎细胞因子特异性抗体等,在阻止ALI/ARDS的发生、发展中是至关重要的。但目前关于细胞因子的研究和针对性治疗大多局限于动物试验阶段取得很大成功,应用到临床后并未取得预期的疗效。分析主要原因是由于细胞因子种类及其数量繁多,且相互作用形成了一个级联的系统,单单针对几种细胞因子治疗难以阻断ALI/ARDS的进一步发展。因此,需要对细胞因子及其网络信号机制进行深入研究,争取在ALI/ARDS治疗上取得突破。
 
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