EB病毒与相关肿瘤研究的新进展

关键词： 爱泼斯坦-巴尔病毒；肿瘤；鼻咽癌 

　　摘要 Epstein-Barr病毒（EBV），是一种DNA肿瘤病毒。感染人类，可以引起鼻咽癌、Burkitt淋巴瘤，也与胃癌、肺癌、淋巴上皮癌的发生有一定的关系。本文就EBV与这些恶性肿瘤的相关性做一综述。

　　 关键词 爱泼斯坦-巴尔病毒；肿瘤；鼻咽癌

　　EBV通过人类唾液传播，有嗜人B淋巴细胞特性。首先感染人口咽部组织上皮细胞，随后播散到周围血B淋巴细胞呈潜伏感染状态。世界上大多数人在幼儿期就可感染EBV，并终身携带。近年来，越来越多的事实说明EBV与多种肿瘤发生相关。
　　1 EBV与鼻咽癌（NPC）
　　目前，在各种类型的NPC都已经检测到了EBV基因。还发现了有癌基因活性的病毒蛋白表达。Sam[1]检测26例有NPC临床症状而组织学正常的病例，其中3例EBNA1，BamH1A阳性，并且1年后这3例病人发生NPC。Yeung等[2]应用ISH证明了携带高拷贝EBV可能赋予肿瘤细胞一定的生长优势，使其成为优势细胞群，呈现转化特征。Pathmanathan等[3]研究了1811例不同类型的NPC，在11例原位癌和8例不典型增生病例中检出EBERs。应用Southern杂交出现7例中6例含克隆性EBV dNA，从而提出集中性细胞生长来源一个EBV感染细胞的假说。
　　NPC患者鼻咽粘膜非典型增生和非典型化生者IgA/VCA抗体滴度显著高于粘膜正常者、单纯增生和单纯化生者。对这两组进行追踪观察，发现前者NPC检出率明显高于后者。这表明EBV与非典型增生、非典型化生及NPC的发生有关。
　　虽然EBV与NPC的发生关系密切，但尚无动物实验证明单独EBV可引起上皮性癌。亦还须证明EBV是否是NPC的唯一病因。
　　2 EBV与胃癌
　　1990年Burke首次报道了1例与EBV相关的胃癌。1991年Shibata检测出伴有大量淋巴细胞浸润的未分化胃癌中有EBV dNA。次年[4]，他检测了没有大量淋巴细胞浸润的胃腺癌128例，其中22例含EBV dNA。同时在淋巴结、肺或肝的转移灶中也存在EBV DNA。应用ISH法对EBV进行定位，发现阳性检测例的癌细胞核内及核仁中几乎都有EBERs表达。1993年Tokunaga报道了日本人与EBV相关胃癌约占胃癌的6.9%,可发生于胃的各个部位及各种类型的胃癌中。这是最先认为EBV与胃癌相关的报道。但以上研究均未能肯定EBV在胃癌发生中的致癌作用。因为发现正常胃上皮细胞和浸润淋巴细胞中没有EBV dNA，并且胃正常粘膜上皮细胞不表达CD21。
　　Oda等[5]应用Southem杂交法检测具有淋巴细胞浸润的胃癌，发现了肿瘤细胞的克隆性增生和以一种附加体方式存在的EBV。提出感染发生在肿瘤转化之前，并与胃癌发生有关。Leoncini等[6]也提出，如果恶性转化后癌细胞才开始表达CD21，姥在肠型胃癌的非典型增生期，细胞也可因受体改变表达CD21而感染DBV，继发含EBV的癌细胞克隆性增生。Levine从而血清学角度证明癌细胞之EBV感染发生于癌变初期阶段或之前。
　　EBV相关胃癌在北美发病率为16%，日本7%～11%，（沈阳市）3.4%[7]。与普通胃癌相比发病年龄无差异，男女比例3：1。病上，EBV相关胃癌在胃上部特别是贲门部癌的阳性率为最高。
　　3 EBV与肺癌
　　有研究认为呼吸道是EBV潜伏的最大场所。1989年Burtler等应用ISH法首次从1例华裔肺淋巴上皮癌（LELC）病人中检测出了EBV dNA。Chan调查了11例肺LELC患者，发现亚裔病例都有EBV检出，而白人病例都没检出EBV，说明EBV相关肺LELC的发生存在地域和人种的差异[8]。有研究证实肿瘤来自一个EBV感染细胞的单克隆增生。 
　　在对日本人肺癌的调查中，Kasai等[9]在5例低分化癌中检出EBERs和EBV dNA，他指出EBV相关肺癌不仅仅局限于肺LELC型中。张雷等[10]检测了北京市各种类型的肺癌标本87例，发现肺癌组织中EBV感染拷贝数明显高于癌旁肺组织，并提出EBV感染与肺癌细胞的生物学特性及肺癌的有关。但贾心善等[7]用EBER-1分子杂交法检查沈阳市58例肺癌，结果均为阴性。可见EBV感染有明显的地区差。
　　Zyriranov报道，与健康者相比，非特异性慢性肺病患者血清中EBV/VCA抗体滴度水平呈有意义地升高。目前，对于非LELC型肺癌与EBV之间关系的研究还较少，肺癌与EBV之间的关系也有待进一步探讨。
　　4 EBV与淋巴瘤
　　随着Burkitt淋巴瘤和先天性免疫缺陷病伴淋巴瘤被认为是EBV相关淋巴瘤后，近来又发现了许多EBV相关淋巴瘤的新亚型[11]。
　　EBV相关淋巴瘤各亚型与EBV的关系程序存在差别：Burkitt淋巴瘤、先天性免疫缺陷病伴淋巴瘤和脓胸后淋巴瘤，大约全部病例证明与EBV相关；NK淋巴瘤/白血病、鼻腔原发T/NK淋巴瘤、川崎氏病、脂肪织炎型皮肤淋巴瘤、纵隔B细胞淋巴瘤，EBV只在大多数病例存在；AILD型淋巴瘤和未分化大细胞型淋巴瘤，只有少数病例EBV阳性。此种差别可能是由于各亚型的发生机制造成的。
　　EBV在体外可感染B细胞，使之永生化，并建立了类淋巴细胞株（LCLS）。在体内EBV感染的宿主细胞增殖能力很强，呈复数或多数细胞同时增殖。EBV相关淋巴瘤的发生机制有二个假设。第一，EBV潜伏感染基因产物可致宿主细胞永生化。这种机制主要发生在常见的淋巴瘤；第二，继发性基因异常。染色体转位可引起C-myc表达亢进。Burkitt淋巴瘤和合并免疫不全的淋巴瘤多由此机制发生。但其它类型淋巴瘤中，基因异常是多种多样的。在中、老年患者中，多处染色体异常的病例很多，多阶段的异常形成集聚产生的后果有待研究。
　　5 现存疑点及未来展望
　　5.1 EBV感染人体内上皮细胞的途径 目前，越来越多的学者认为EBV可直接感染上皮细胞，呈潜伏状态存在，随时间延长或机体免疫力低下时直接致癌。Niedobite[12]则认为，原发EBV感染是经B淋巴细胞介导，感染远处上皮细胞的。但对于一些EBV相关胃癌中没有携带病毒颗粒的B淋巴细胞浸润现象，这种说法难以解释癌细胞中EBV的由来。Sixbey[13]依据NPC患者发病前都有抗体水平升高的现象，提出EBV可先结合特异型IgA，然后通过上皮受体分泌成分（SC）进入上皮细胞，但这一实验结果未能得到重复。
　　5.2 EBV在肿瘤细胞中存在的意义 EBNA-2和LMP-1在淋巴细胞转化上具有重要作用，但在体内肿瘤中却无EBNA-2表达，LMP-1亦仅见于部分肿瘤。EBNA-1在维持EBV质粒上为必需，但无细胞转化活性。这使EBV在机体内存在的意义发生了疑问。Shimizu等[14]由Burkitt淋巴细胞成功地分离出EBV阴性细胞克隆。EBA阴性克隆与阳性克隆不同。它在低血清下不能增殖，在软琼脂中不形成集落，对裸鼠也不具致肿瘤性。以上研究结果证实，EBV在维持Burkitt淋巴瘤细胞的恶性性质上是必要的。EBV阴性细胞感染EBV后，表达所有的潜伏感染基因，这点与EBV体外转化B淋巴母细胞相似。通过对EBV阴性和阳性Akata细胞的比较性的研究，将有可能说明EBV在细胞恶生转化的哪一阶段发挥作用。
　　5.3 EBV与促癌因素的协同作用 成年人普遍存在EBV潜伏感染，但只有少数人发生EBV相关肿瘤。并且这些肿瘤的发生存在人种、地区和性别的差异。这是否与环境等因素有关？TPA和丁酸能激活EBV，并可与EBV在裸鼠体中诱发未分化癌[15]。Weiss报告中国南方树种含巴豆油等促癌剂。因此，EBV与促癌物等其它因素的协同作用值得进一步研究。
　　5.4 EBV潜伏感染的存在与逃逸免疫监视 
　　EBV潜伏感染依据基因表达不同可分为四型。除EBNA-1以外的EBNA都是细胞性免疫（CTL）作用靶。故体内肿瘤首先是Burkitt淋巴瘤在CTL存在下依然增殖。在正常免疫情况下，EBV转化淋巴细胞可为CTL作用靶而被杀灭，但在AIDS，骨髓移植等重度免疫缺陷状态下，虽有全部EBNA表达，仍可形成淋巴瘤。非免疫缺陷情况下，EBV相关肿瘤逃逸机体免疫监视系统的机制须进一步研究。
　　5.5 EBV潜伏感染激活 呈潜伏感染状态的EBV，在潜伏感染Ⅲ型中，可有少数细胞自发进入溶解感染状态，而在Burkitt淋巴瘤中，则需TPA和抗血清特殊处理。Rowe提出了EBV的三种激活途径：①快反应形式：直接进入溶解感染状态；②迟发反应形式：细胞转化成淋巴母细胞样形态；③不进入溶解感染状态。EBV潜伏感染仅少量病毒复制，溶解感染状态下，则有大量病毒颗粒产生。EBV相关肿瘤都能检出EBV潜伏感染状态基因产物，而血清学检查抗体水平升高，说明有EBV溶解感染。Rowe的研究解释了后种现象的发生。但癌前阶段的EBV存在形式及两种感染状态间的相互关系还需进一步阐明。

　　01 Sam CK et al.Int J Cancer,1993;53:957-962
　　02 Yeung WM et al.Int J Cancer,1993;53:746
　　03 Pathmanathas R et al.N Engl J Med,1995;333:693-398
　　04 Shibata D et al.Am J Pathol,1992;140:769-774
　　05 Oda K et al.Am J Pathol,1993;143:1063-1071
　　06 Leoncini L et al.Int J Cancer,1993:53:898-901
　　07 贾心善等。日本病会会志，1998；87：352
　　08 Chan et al.Cancer,1995;76:413-422
　　09 Kasai K et al.J Pathol,1994;174:257-265
　　10 张雷 等。中华病理学杂志，1996；24：132-135
　　11 森茂郎 等。日本临床，1997；55：121-123
　　12 Niedobite G et al.Lancet,1994;343:333-335
　　13 Sixbey JW et al.Science,1992;255:1578-1580
　　14 Shimizu N et al.J Virol,1994;68:6069-6073
　　15 刘振声 等。病毒学报，1996；12：1-8