慢性肾衰的中医证型与血中内皮素、一氧化氮关系探讨
来源：岁月联盟
时间：2010-07-12
【关键词】 肾衰/诊断 辨证分型 内皮缩血管肽类/分析 一氧化氮/分析
Study on relationship between blood NO，ET & TCM syndromes
【Abstract】 Objective To investigate the changes in circulating endothelin(ET)and nitricoxide(NO)of chronic renal failure and TCM syndromes of chronic renal failure.Methods The level of plasma ET was measured using radio immuno assay， while the level of serum NO was measured using cadmium reduction bar chromatographic analysis and colorimetry.Results Compared with the control group， the plasma ET level was much higher in 150 patients with chronic renal failure (P＜0.01)， while the serum ET level did not show any significant difference between the deficiency syndrome of spleen and kidney-Yang groups and the deficiency syndrome of both Yin and Yang (P＞0.05).The rest of groups displayed the significant difference(P<0.01). The serum NO level was positively correlated with the plasma ET level (P＜0.01).The plasma ET level of different TCM syndromes decreased according to the following sequence： the control group， the deficiency syndrome of spleen and kidney-Qi， the deficiency syndrome of both -Qi and Yin， the deficiency syndrome of liver and kidney-Yin， the deficiency syndrome of spleen and kidney-Yang， the deficiency syndrome of both Yin and Yang； while the serum NO level increased according to the following sequence： the deficiency syndrome of spleen and kidney-Yang， the deficiency syndrome of both Yin and Yang ， the deficiency syndrome of liver and kidney-Yin， the deficiency syndrome of both Qi and Yin， the deficiency syndrome of spleen and kidney-Qi， the control group.Conclusion The plasma ET and serum NO may have relations with the occurrence and development of chronic renal failure. The plasma ET level can serve as an objective parameter to determine the degree of chronic renal failure. The serum NO level can reflect the degree of Zang-fu organ damage.
【Key words】 chronic renal failure/diagnosis Zheng differentiation-classfication endothelial vasoconstructive peptide/analysis nitricoxide/analysis
内皮素(endothelin，ET)是一种内皮源性收缩因子，具有强烈收缩血管的活性，大量的资料表明，肾脏不仅是内皮素的重要靶器官，也是其重要来源。一氧化氮(nitricoxide，NO)是一种内皮源性舒张因子，参与肾脏疾病的发生［1］。为了解这两种物质在慢性肾炎患者及中医证型中的变化，笔者对150例患者及30例正常人的血浆ET及血清NO值进行了检测，报告如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象 患者组：慢性肾衰患者150例，均系新疆医科大学第一附属2003年1月～2004年8月住院及门诊病人，病例参照中华内科杂志编委会肾脏病专业组诊断标准进行选择，其中男68例，女82例；年龄17～74岁，平均(42.5±18.6)岁。中医辨证分型参照《中药新药临床研究指导原则》一书分为5型，其中脾肾气虚型29例，气阴两虚型34例，脾肾阳虚型32例，阴阳两虚型28例，肝肾阴虚型27例。正常对照组30例，其中男11例，女19例；年龄20～68岁，平均年龄(42.1±16.90)岁，均为门诊健康体检者。
1.2 检测方法
1.2.1 ET测定 晨起空腹抽静脉血2ml置入含10%EDTA-Na 230μl和40μl抑肽酶的试管中混匀，4℃离心，2000r/min，离心10min，分离血浆置-20℃冰箱保存待测。用放射免疫法测量ET-1含量(解放军总医院东亚免疫研究所药盒)。以西安生产的FJ2008P型γ-放免仪测定。
1.2.2 NO测定 晨起空腹抽静脉血2ml(试管斜放，血液顺管壁缓慢流入，防止溶血)，37℃温育1h，2000r/min，离心5min，分离血清，置-25℃冰箱保存待测，用镉活化还原比色法测定血清NO-3含量(解放军总医院东亚免疫研究所提供药盒)。
1.2.3 统计学分析 采用F检验，q检验，直线相关分析。所有数据用均数±标准差(x±s)表示。
2 结果
2.1 慢性肾衰病人血中ET、NO与正常人的关系 慢性肾衰组血浆ET为(162.96±5.84)ng/L，显著高于正常对照组(50.237±8.53)ng/L(t=1.654，P＜0.01)，但血清NO水平为(162.06±6.56)μmol/L，与正常人组(63.55±11.47)μmol/L差异显著(t=1.65，P＜0.01)。
2.2 慢性肾衰病人血ET、NO与中医证型的关系 见表1、2。
表1 慢性肾炎患者中医证型及正常人血ET、NO含量的关系
2.2.1 慢性肾衰各中医证型及正常人血浆ET比较 6组经F检验(F值=215.3)有显著差异(P＜0.01)，经进一步q检验后，除阴阳两虚与脾肾阳虚组差异不显著外，其余各组两两比较均有显著差异(P＜0.01)，且ET的值正常人组<脾肾气虚组<气阴两虚组<肝肾阴虚组<脾肾阳虚组<阴阳两虚组。
2.2.2 慢性肾衰各中医证型及正常人血清NO比较 6组经F检验(F值=77.9)有非常显著差异(P＜0.01)，经进一步q检验之后，除脾肾阳需组与阴阳两虚组比较无显著差异外，其余各组两两比较均有显著差异，且脾肾阳虚组>阴阳两虚组>肝肾阴虚组>气阴两虚组>脾肾气虚组>正常组。
2.3 相关性分析
2.3.1 慢性肾衰患者(150例)ET与NO的相关性分析 二者呈显著正相关(r=0.9124，P＜0.01)。
2.3.2 脾肾气虚组(29例)ET与NO的相关性分析 二者有相关性(r=0.7348，P＜0.01)。气阴两虚组(34例)ET与NO的相关性分析：二者有相关性(r=0.9125，P＜0.01)。脾肾阳虚组(32例)ET与NO的相关性分析：二者呈显著正相关(r=0845，P＜0.01)。阴阳两虚组(28例)ET与NO的相关性分析：二者呈显著正相关(r=0.78，P＜0.01)。
表2 慢性肾衰患者中医各证型及正常人 血ET、NO含量比较
3 讨论
ET为血管内皮细胞合成的一种生物活性多肽，由21个氨基酸组成。众多研究表明，ET不仅具有极敏感的收缩肾血管，使肾小球滤过率降低的作用，它还可以刺激系膜细胞产生血小板活化因子及血小板源性生长因子，从而促进系膜细胞增殖，引起肾小球纤维化。本研究显示慢性肾衰患者血ET含量较正常对照组高，与国外报道的研究结果一致［2～4］，当肾脏的内皮细胞受损后，局部ET的合成增多，且通过刺激其他部位的血管内皮细胞，使其ET的合成增多并释放入血，与肾脏特异的受体结合，通过血管张力参与其病理过程［5，6］，而增高的ET可进一步收缩阻力血管，加重血液动力学障碍［6］。已有研究表明，NO可抑制平滑肌细胞和系膜细胞增殖，起调节和维持肾脏血流动力学的作用。本研究结果显示，慢性肾衰患者总体血NO与正常人组有显著差异，表明慢性肾衰患者血中NO水平处于相对不稳定状态，在脏腑病损较轻的脾肾气虚型中NO水平增高可能是由于肾脏局部缩血管物质如ET等生成增多刺激内皮细胞分泌NO等因素有关［6］，从而对抗ET等物质的缩血管作用，在脏腑病损较重的各型中NO水平显著升高可能是由于肾衰患者长期处于高血管张力和高容量状态，刺激NO生成增加；肾功能减退使NO降解和排泄减少；多种因素引起NO受体活性下降，组织对其敏感性降低，促其进一步释放。然而NO的异常升高可引起：(1)阻碍线粒体内呼吸链的传递、三羧酸循环的运转和组织细胞糖的酵解及DNA的复制；(2) NO可通过与超氧阴离子结合成为更具细胞毒性的羟自由基和二氧化氮阴离子；(3) NO可以直接与环氧酶反应抑制PGE2，使血管紧张素Ⅱ对肾血管和肾小球系膜细胞的收缩作用得以加强。以上机制又加重肾功能进行性损害。由此可见，患者过高浓度的NO可能是肾功能进行性减退的原因之一。本研究表明ET与NO呈显著正相关，支持二者可能与慢性肾衰的发生有关。
本研究又从中医阴阳偏颇与脏腑病损的角度，探讨中医证型与内皮素、一氧化氮变化的关系。通过研究资料分析，笔者认为内皮素的增高是慢性肾衰患者由于病理损害导致人体阴阳平衡失调的结果，所以5组不同中医证型的慢性肾衰患者血浆ET均高于正常人组，且存在正常人组<脾肾气虚组<气阴两虚组<肝肾阴虚组<脾肾阳虚组<阴阳两虚组。可以看出阴阳两虚的患者，其内皮素增高的幅度尤其显著，可见血浆内皮素的增高是人体阴阳虚损程度的客观反映。笔者认为一氧化氮的变化，是由于脏腑病损的程度与正邪相争的结果。5组中医证型中，脾肾气虚组NO值略高于正常人组，表明在脏腑病损尚轻的阶段，人体的机能处于亢奋状态，全力与外邪抗争，故具有舒张血管功能的NO比正常人组升高，但当病情继续发展加重，到了脏腑病损较重的脾肾阳虚与阴阳两虚的阶段，NO水平明显高于正常人组。笔者认为，NO的变化可以反映出脏腑的病损轻重程度，对中西医结合医辨证论治，提高临床疗效，提供重要依据。
【参考】
1 Palmer RMJ， Ferrige AG， Moncada S.Nitrcoxide accounts for the biological activity of endothelium deriver relaxing factor.Nature，1987，327(2)：524.
2 Shechter H， Grunener N， Shural HI.A micromethod for determination of nitrite in blood. Annal Chen Acta，1972，60(3)：93.
3 伊藤贞嘉.肾脏疾病和NO.最新医学，1997，52（5）：992.
4 Salremini D， Misk TP， Masterrer JL，et al. Nitricoxide accibates cycloxygenase enzymes. Pro Nat Acand Sci， 1993，90(2)：7240.
5 吴祥声.缩血管肽-内皮素.国外医学·临床与生化检验分册，1993，14(5)：224.
6 StadleJ， Harbrecht BG， Disilvio M，et al. Nitricoxide inhibits the synthesis of Cycloxygenase products and interleubin-6 by rat Kupffer cell.J Leukoc Biol，1993，53(1)：165.
