注射用头孢替坦钠的安全性再评价
【关键词】 ,注射用头孢替坦钠；,,,安全性评价；,,,静脉注射
摘要： 目的 评价注射用头孢替坦钠的安全性。方法 将注射用头孢替坦钠配成适当浓度，观察豚鼠静脉注射后有无过敏反应(因头孢菌素类药物容易引起豚鼠中毒，所以增作大鼠过敏试验)、家兔静脉注射有无血管刺激性及热原反应、体外溶血试验中是否具有溶血和血球凝集作用。结果 大鼠静脉注射用头孢替坦钠无过敏反应，家兔静脉注射用头孢替坦钠无血管刺激性及热原反应，体外溶血试验无溶血和血球凝集作用。结论 注射用头孢替坦钠可供静脉注射试用给药。
关键词： 注射用头孢替坦钠； 安全性评价； 静脉注射
Safety evaluation of cefotetan sodium for injection
ABSTRACT Objective To evaluate the safety of cefotetan sodium for injection. Methods Four experiments were used, including allergic test induced by cefotetan sodium in guinea pigs. Allergic test by cefotetan sodium in SD rats was added as well as haemolysis and blood cell agglutination test in vitro and stimulation test to blood vessel. Results No stimulations and pyrogen reactions were seen in rabbits, earrim auricular vein after given lansoprazole. Allergic reaction was not occurred in SD rats. Conclusion Cefotetan sodium is safe for intravenous injection.
KEY WORDS Cefotetan sodium for injection; Safety evaluation; Intravenous injection
注射用头孢替坦钠为半合成的注射用第二代头孢菌素，对革兰阴性菌活性较强，临床上多用于敏感菌所致的肺炎、支气管炎、胆道感染、腹膜炎、尿路感染以及手术后或外伤引起的感染和败血症等［1］。按照药品注册申报要求，供注射用西药均应依照化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则要求进行药物的安全性研究［2］。本试验考查了沈阳普强生化技术有限公司研制的注射用头孢替坦钠是否符合静脉注射药物的安全性标准，为其进一步申报新药提供研究数据。
1 材料
1.1 药品与试剂注射用头孢替坦钠(cefotetan sodium，每支1g，批号030301)由沈阳普强生化技术发展有限公司生产；吸附百白破(每毫升含百日咳效价≥40IU、白喉效价≥30IU、破伤风效价≥40IU，每支5ml，批号20030711)由成都生物制品研究所生产；卵白蛋白(egg albumen，每瓶1g，批号SigmaA5253)由华美公司分装(临使用前用生理盐水稀释成14mg/ml)；甲醛(formaldehyde，每瓶500ml，批号20030407)由沈阳东兴试剂厂生产；1%新鲜蛋清(取1ml新鲜蛋清加生理盐水至100ml)，现用现配。
1.2 仪器HHS电热恒温水浴锅由江苏红旗医疗器械厂生产。
1.3 动物 豚鼠，雄性，体重250～350g；SD大鼠，雄性，体重120～150g；新西兰大耳白兔，雌、雄兼用，体重18～25kg。以上动物均由沈阳市双义实验动物研究所提供，合格证号：辽实动质字SCXK［辽］20030012。
1.4 剂量换算［3］人用剂量为2000mg/d；家兔血管刺激性：2000mg×007/15kg=100mg/kg；豚鼠过敏试验：2000mg×0032/04kg=160mg/kg，160mg/kg×035kg×2=120mg/只(每只豚鼠按照最大体重035kg，致敏剂量取正常给药剂量的2倍)；大鼠过敏试验：2000mg×0018/02kg=180mg/kg，180mg/kg×014kg=25mg/只(每只大鼠按平均体重014kg计算，攻击剂量为致敏剂量的2倍)。
2 实验方法与结果
2.1 血管刺激性实验［4］取20～25kg家兔6只，随机分为2组，每组3只。3只家兔耳静脉注射注射用头孢替坦钠100mg/kg，给药容积为5ml/kg。3只家兔耳静脉注射等容积的生理盐水，每天1次，连续3d，给药后肉眼观察注射处及远离注射处的血管反应，结果给药后未见血管有异常反应，与对照组血管比较无明显差别。依照Tab.1标准对血管刺激性进行评分，给药组及生理盐水组各个家兔的得分均为0。末次给药后24h，将家兔处死，于注射处和远离注射处约5cm处各取一段血管，固定于10%的甲醛溶液中，石蜡包埋，HE氏染色，光镜检查(40×32)，观察其病理组织学改变(Tab.2)。病理组织学检查结果表明注射用头孢替坦钠连续给药3d，家兔注射处血管和远离注射处血管组织均未见明显异常改变，与生理盐水对照组家兔血管比较无明显差别，两组光镜观察评分均为0，结论为无血管刺激性。
2.2 过敏实验［3］(1)豚鼠过敏试验 取雄性豚鼠，体重250～350g，随机分为3组，每组8只。实验组腹腔注射注射用头孢替坦钠，每只120mg/05ml，隔日1次，共3次；阳性对照组同法注射等容量1%新鲜蛋清；空白对照组同法注射等容量生理盐水。首次给药后14d，每组取3只(头孢替坦钠组取存活动物中的1/2)静脉注射注射用头孢替坦钠每只240mg/10ml，空白对照组和阳性对照组分别静脉注射生理盐水和1%蛋清(每只10ml)，给药后立即观察动物有无喷嚏、搔鼻、干呕或咳嗽、竖毛、抽搐、呼吸困难、大小便失禁、休克和死亡等过敏反应，观察1h。注射头孢替坦钠组于第二次腹腔注射给药后，豚鼠即出现中毒症状，并在d4、d6、d7、d10各死亡1只，死亡动物尸检可见肺和肠组织均有大面积出血点；生理盐水及1%蛋清对照组未到攻击日期无异常改变。给药后14d进行攻击试验，头孢替坦钠组豚鼠少动、腹胀、竖毛，生理盐水组无一过敏症状，蛋清阳性对照组100%休克。头孢替坦钠组余下的2只及其余两组余下的3只豚鼠21d后同法处理，观察相同指标，结果同14d(Tab.3)。注射用头孢替坦钠腹腔注射致敏阶段有死亡，余下4只豚鼠虽然未见死亡，但均表现为腹胀等中毒症状，于14和21d攻击时均未发现有蛋清样过敏症状，而表现出肠胀气、少动等中毒症状，与有关［5～8］报道一致。(2)大鼠过敏试验［9，10］ 取SD大鼠，雄性，体重120～150g，随机分为注射用头孢替坦钠组(25mg/ml)、生理盐水组(空白对照)和卵白蛋白组(阳性对照，14mg/ml)三组，每组8只。d1各组大鼠分别肌肉注射相应受试液06ml，四脚掌皮下注射各01ml，同时腹腔注射百白破疫苗15ml； d5各组大鼠分别肌注上述相应的受试液06ml，腹腔注射04ml，以加强致敏。d13各组动物分别静注以上相应的受试物2ml进行攻击，观察记录动物注射后有无抓鼻、末梢血管充血、不安、静卧、反应迟钝、呼吸困难、休克直至死亡等过敏症状。结果显示(Tab.4)，注射用头孢替坦钠和生理盐水组大鼠均未出现任何异常反应，无过敏症状。而卵白蛋白组大鼠经受试液攻击后均立即出现静卧，四肢松弛，反应迟钝直至死亡等过敏反应症状，过敏发生率达100%。
Tab.1 （略）
Tab.2 （略）
2.3 体外溶血试验家兔耳缘静脉采血，依方法［3］，玻璃珠搅拌去纤维蛋白，用生理盐水洗涤后离心(1000r/min，10min)，反复数次直至上清液无红色，然后按体积比用生理盐水配成20%红细胞混悬液供试验用。溶血试验肉眼观察标准参照Tab.5。每组取试管7支，按Tab.6所示各管分别加入注射用头孢替坦钠不同体积药液和红细胞混悬液，管6不加药，加生理盐水作空白对照，管7加蒸馏水作完全溶血对照。轻轻摇匀后，各管置370C水浴中放置3h，分别于15、30、45min和10、20、30h各记录一次，共6次。依照Tab.5标准肉眼观察有无溶血现象。末次观察后，将各试管充分振摇，观察有无沉淀和凝集现象，结果见Tab.6。注射用头孢替坦钠体外溶血试验未见溶血及血球凝集现象，与生理盐水比较无明显差别。蒸馏水组则完全溶血，产生红色透明溶液。常规方法作红细胞镜检，未见红细胞破裂及形态异常。
Tab.3 （略）
Tab.4 （略）
Tab.5 （略）
3 讨论
注射药物的安全性评价是药物临床试验的一个重要组成部分，主要由体外溶血试验、过敏性试验、血管(肌肉)刺激性试验等组成。只要其中任何一项试验出现阳性结果，则表明该药不符合安全性评价的标准，不能予以生产及上市销售。本试验的受试药物注射用头孢替坦钠对红细胞无溶血和凝集作用、家兔静脉注射给药后无血管刺激性及热原反应、豚鼠过敏试验中有中毒症状，但存活的动物在过敏试验中未见过敏症状，大鼠试验未见过敏现象，故可认为该药无过敏反应。上述结果表明，该药可供静脉注射试用给药。由于本类药物有过敏的报道，临床用药仍需慎重，过敏体质不易应用。
文献
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