双波长比值光谱法测定复方益康宁片二组分的含量

               作者：黄喜茹，刘伟娜，周亚君，曹冬

【关键词】  双波长比值光谱法

    Dualwavelength  ratio  spectrophotometry  for determination of procaine hydrochloride and vitamin B6 in compound Yikangning  tablets

　　【Abstract】 AIM: To establish dual-wavelength ratio spectrophotometry for determination of  procaine hydrochloride and vitamin B6 in compound Yikangning tablets.  METHODS: The ratio spectra was determined and the wavelength pair were selected at the peak point or valley point of ratio spectra , to eliminate the interference of other components.  RESULTS:  Linearity between the absorbance and concentration of  procaine  hydrochloride and vitamin B6 was obtained in the range of 5.0-50.0 mg/L under the optimum conditions . The average recoveries and relative standard deviations(RSD) of procaine  hydrochloride and vitamin B6 were 99.5%, 1.2% and  98.3%, 0.8%, respectively. CONCLUSION: The method  was simple , rapid and reproducible ,  the interference  of  two components on each other may be eliminated and the results were satisfactory.

　　【Keywords】 dualwavelength ratio spectrophotometry; procaine hydrochloride; vitamin B6; Yikangning tablet

　　【摘要】 目的：建立复方益康宁片中盐酸普鲁卡因和维生素B6的双波长比值光谱测定法. 方法：绘制盐酸普鲁卡因和维生素B6的比值光谱，选择其峰点或谷点作为测定波长对有效地消除共存组分的干扰，以实现对被测组分的准确测定. 结果：在选定的实验条件下，盐酸普鲁卡因和维生素B6在5.0～50.0 mg/L范围线性关系良好，平均回收率分别为99.5%, 98.3%和相对标准偏差(RSD)分别为1.2%, 0.8%. 结论：该方法简便、快速、重现性好，结果满意.

　　【关键词】 双波长比值光谱法; 盐酸普鲁卡因；维生素B6; 复方益康宁

　　0引言

　　复方益康宁片是用于神经系统平衡与调节的药物，临床用于更年期综合征、神经衰弱和植物神经功能失调等症. 它的主要成分是盐酸普鲁卡因和维生素B6. 山东省药品标准［1］采用比色法测定二组分的含量，操作繁琐费时. 另报道有二阶导数分光光度法［2］和联立方程组新解法［3］,我们采用双波长比值光谱法［4］同时测定二组分的含量，可有效消除共存组分的干扰，操作简便快捷，结果准确，重现性好.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　岛津UV2201型全自动紫外分光光度计; 十万分之一天平. 盐酸普鲁卡因、维生素B6对照品（河北省药检所提供，105℃干燥至恒重），溶剂为0.1 mol/L盐酸(下称溶剂), 其他试剂均为分析纯，复方益康宁片（本院药剂室制备）.

　　1.2方法

　　1.2.1基本原理在含有a和b的复方药物中，如二组分在整个波长范围服从朗伯比耳定律，则混合组分的吸收光谱可用方程表示为：Aλi=KaλiCa+KbλiCb①Aλi为混合物在λi处的吸光度；Kaλi，Kbλi为a，b在波长λi处的吸收系数；Ca，Cb为混合物中a和b的浓度. 若b为干扰组分，在对应波长处用标准浓度为Cb′的干扰组分吸收光谱去除①式：Aλi〖〗KbλiCb′=Kaλi〖〗Kbλi・Ca〖〗Cb′+Cb〖〗Cb′②
②式为混合物相对于浓度为Cb′的b组分的比值光谱，可看出在混合物中，b组分（任意浓度）对比值光谱的贡献是一组平行于波长轴的直线，在任意波长处的吸光度比值R都相等，即为Cb/Cb′. 因此，可选择两个合适的波长测定ΔR，消除b的干扰，对a进行定量，即：ΔR=R2-R1=(Kaλ2〖〗Kbλ2-Kaλ1〖〗Kbλ1)1〖〗Cb′・Ca=K・Ca③同样，如将a视为干扰组分，b为被测组分，可得到混合物相对于a（Ca′）的比值光谱，对b进行定量.

　　1.2.2对照品储备液的配制精确称取盐酸普鲁卡因116.95 mg，用溶剂溶解后定容于100 mL容量瓶中，摇匀，精确吸取该溶液10 mL置100 mL容量瓶中，用溶剂稀释至刻度并摇匀,得盐酸普鲁卡因储备液①. 精确称取维生素B6对照品118.23 mg，同法配制维生素B6储备液②.

　　1.2.3比值光谱的绘制及测定波长的选择精密吸取对照品储备液①和②适量，分别置10 mL容量瓶中，用溶剂稀释定容摇匀，以溶剂作参比，在400～200 nm扫描，得盐酸普鲁卡因和维生素B6的紫外吸收光谱(Fig 1). 并在217.7~300.0 nm波长区间约间隔1.2 nm测定各溶液的吸光度（A），各波长处盐酸普鲁卡因对维生素B6吸光度的比值Rp, 以Rp对λ作图，得到盐酸普鲁卡因的比值光谱；同样，计算各波长处维生素B6对盐酸普鲁卡因吸光度的比值RV, 以RV对λ作图，得到维生素B6的比值光谱(Fig 2). 由Fig 2知，盐酸普鲁卡因的比值光谱在232.2 nm波长处有最大峰值，维生素B6有最小谷值；而维生素B6的比值光谱在292.7 nm波长处有最大峰值，盐酸普鲁卡因有最小谷值，经精选，确定232.2 nm和292.7 nm为测定波长.

　　1.2.4工作曲线的绘制精密吸取对照品储备液① 1.04 mL、对照品储备液② 1.00 mL, 分别置10 mL容量瓶中，用溶剂定容摇匀，作为标准对比溶液. 在232.2 nm和292.7 nm处测定A值. 精确吸取对照品储备液①和②适量，用溶剂稀释定容摇匀. 配成含盐酸普鲁卡因和维生素B6的系列混合标准溶液，分别在232.2 nm和292.7 nm处测定A值，依式③△R, 以△R对C建立回归方程为：
盐酸普鲁卡因：△Rp=0.2906C+0.07867      r=0.9974维生素B6： △RV=0.5986C+0.1696       r=0.9998其中   ΔRp=RP 232.2 nm-RP 292.7 nmRp232.2 nm=A232.2 nm〖〗0.137RP292.7 nm=A292.7 nm〖〗0.497      ΔRV=RV 292.7 nm-RV 232.2 nmRV232.2 nm=A232.2 nm〖〗0.515RV292.7 nm=A292.7 nm〖〗0.065

　　2结果

　　2.1回收率实验按处方配比配制模拟片粉，精确称取适量用溶剂溶解后定容于100 mL容量瓶中，摇匀，过滤，精确吸取续滤液10 mL置100 mL容量瓶中，加溶剂稀释定容并摇匀，制得模拟样品储备液. 精确吸取该储备液适量置10 mL容量瓶中，加溶剂稀释定容并摇匀，配成含盐酸普鲁卡因和维生素B6的模拟样品系列混合溶液，分别在232.2 nm和292.7 nm处测定A值，计算△RP和△RV，代入线性回归方程，分别计算出盐酸普鲁卡因和维生素B6的浓度，再计算回收率，盐酸普鲁卡因和维生素B6的平均回收率和相对标准偏差分别为99.5%，1.2%和98.3%，0.8% (Tab 1).
表1盐酸普鲁卡因和维生素B6的回收率（略）

　　2.2样品测定取复方益康宁片10片，去糖衣，精确称定，求出平均片质量，研细. 精确称取其细粉适量（约相当于盐酸普鲁卡因140 mg与维生素B6 40 mg）, 用溶剂溶解后定容于100 mL容量瓶中，摇匀，滤过；精确吸取续滤液10 mL置100 mL容量瓶中，加溶剂稀释定容并摇匀，得样品溶液. 精确吸取样品溶液适量至10 mL容量瓶中，加溶剂稀释定容并摇匀, 在232.2 nm和292.7 nm波长处测定A值，计算△Rp和△RV，代入线性回归方程，计算盐酸普鲁卡因和维生素B6的标示量百分含量(Tab 2).表2样品测定结果（略）

　　3讨论

　　3.1测定波长的选择为有效地提高方法的灵敏度和准确度，测定波长应选择比值光谱的峰处（对应另一组分为谷）. 盐酸普鲁卡因的比值光谱在232.2 nm处有最大峰值，而维生素B6的比值光谱在此波长下有最小谷值；在292.7 nm处盐酸普鲁卡因有最小谷值，而维生素B6有最大峰值. 故确定232.2 nm和292.7 nm为测定波长.

　　3.2采用比值光谱法的条件对于二组分复方药物而言，理想的被测组分比值光谱应该至少出现一峰一谷，选择峰谷最大的两个波长作为测定波长，以提高方法的灵敏度和准确度；在普通光谱中表现为二组分的吸收曲线至少有三个交点，能满足此条件的药物较少. 在实际工作中，如比值光谱只有一个峰或一个谷，即普通光谱的吸收曲线只有两个交点，此种情况下可将峰点或谷点处的波长作为一个测定波长，在峰或谷以外再选择一个波长作为测定波长. 如二组分的普通光谱只有一个或无交点，不能使用本法.

　　【】

  ［1］ 山东省药品标准［S］. 山东省卫生厅，1986：445-446.

  ［2］ 何卫民. 复方益康宁片二阶导数分光光度测定法［J］.医药杂志, 1992;23(8):363-364.

　　He WM. Determination of Procaine  hydrochloride  and  vitamin B6 in compound Yikangning tablets by the second derivative spectrophotometry ［J］. Chin J Pharm, 1992;23(8): 363-364.

  ［3］ 叶青,黄河舟,骆望美. 联立方程组新解法测定复方益康宁二组分含量［J］. 海军医高专学报, 1999；21(2):73-75.

  Ye Q, Huang HZ, Luo WM. New solution pertinent to simultaneous equations for determination of Procaine  hydrochloride and vitamin B6 in compound Yikangning tablets ［J］. J Nav Med Coll, 1999;21(2):73-75.

  ［4］ Basilio M. Simultaneous determination of ceftriaxone and streptomycin in mixture by "ratiospectra" 2nd   derivative and "zerocrossing" 3rd derivative spectrophotometry［J］. Talanta, 1994;41(5):673-676.