参芪降糖颗粒对实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞、C肽及血浆胰岛素释放的影响
【关键词】 参芪降糖颗粒
Effect of ginsengmilkvetch declining sugar granule on islet β cells, peptide C and the release of insulin in diabetic rat
【Abstract】 AIM: To study the effect of ginsengmilkvetch declining sugar granule (GMDSG) on islet β cells, peptide C and the release of insulin in diabetic rats, and to investigate the mechanism of declining blood glucose. METHODS: The diabetic rats were formed with injection of streptozotocin (STZ). We studied the effect of GMDSG by determining blood glucose, peptide C and insulin. The ultrastructure of islet β cells was also observed. RESULTS: After treatment with GMDSG (2.0 g・kg-1), fasting blood glucose of the diabetic rats was decreased gradually while peptide C and serum insulin were increased. Besides, GMDSG exerted obvious protective effect on islet β cells in diabetic rats. CONCLUSION: GMDSG exerts a good therapeutic effect on high blood glucose in diabetic rats and its mechanism may be related to the protective effect on islet β cells, thereby increase the insulin secretion.
【Keywords】 ginsengmilkvetch decling sugar granule; diabetes; streptozotocin; islet β cells; peptide C; insulin
【摘要】 目的: 观察参芪降糖颗粒对实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞、C肽及血浆胰岛素释放的影响，并初步探求其降糖机制. 方法: 用链脲霉素（streptozotocin, STZ）制作糖尿病大鼠模型，观察参芪降糖颗粒对上述模型动物胰岛β细胞、C肽及血浆胰岛素释放的作用. 同时观察参芪降糖颗粒对实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞超微结构的影响. 结果: 参芪降糖颗粒大剂量（2.0 g・kg-1）对STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖水平有明显降低作用. 并能同时升高Ｃ肽含量，增加糖尿病大鼠的胰岛素的水平；参芪降糖颗粒对实验性糖尿病大鼠胰岛β细胞有明显保护作用. 结论: 参芪降糖颗粒对STZ引起的动物高血糖有较好的作用，其作用机制可能与修复、改善受损的胰岛细胞功能，促进胰岛素分泌有关.
【关键词】 参芪降糖颗粒；糖尿病；链脲霉素；胰岛β细胞；C肽；胰岛素
0引言
参芪降糖颗粒是由人参（茎叶）皂甙、五味子、山药等组成的复方制剂，临床用于治疗气阴两虚、脾肾不足型糖尿病及其并发症，取得了较好疗效，为了研究其降糖效果及机制，我们进行了动物实验.
1材料和方法
1.1材料SD品系大鼠，体质量200~250 g，雌雄各半，由西安大学医学院实验动物中心提供. 质量合格证：陕医动证字08005号. 参芪降糖颗粒由鲁南制药股份有限公司提供，批号：（95）Ｚ１6. 每袋相当于生药３ g；临用前用蒸馏水配制成所需浓度的混悬液. 链脲霉素（streptozotocin, STZ）为美国Sigma公司产品(批号：81K1240); 降糖灵由江苏金坛制药厂生产(批号：030130); 胰岛素放射免疫测试药盒由北京北方生物技术研究所生产; BASIC微量血糖测定仪和血糖试纸，由LIFSCAN公司生产; FJ2008P型γ放射免疫计数器由国营二六二厂生产.
1.2方法
1.2.1糖尿病大鼠模型的制备［1,2］选取健康SD大鼠，禁食不禁水12 h，按55 mg・kg-1的剂量腹腔注射STZ溶液，STZ溶液临用前在低温避光的条件下用0.1 mol・L-1的柠檬酸柠檬酸钠缓冲液（pH 4.4）新鲜配制. 于腹腔注射5 h后灌胃给予250 g・L-1的葡萄糖，每只2 mL，以预防造模早期出现严重的低血糖反应. 注射后5 d，在禁食不禁水12 h后，眼眶后静脉丛取血测量空腹血糖、空腹C肽值及胰岛素水平. 选择血糖在11.1 mmol・L-1以上的大鼠为造模成功者，作为糖尿病模型组.
1.2.2动物分组取65只大鼠，适应性喂养1 wk，随机分为2组：空白对照组（n=10）及STZ糖尿病模型组（n=55）. 动物禁食不禁水12 h，眼眶后静脉丛取血测量空腹血糖、空腹C肽值及胰岛素水平后，按上述方法制备糖尿病大鼠模型，造模成功者按造模后血糖水平重新分组(5只未造模成功)，每组10只，且各组大鼠血糖值接近. 空白对照组注射等容量生理盐水. 动物分组具体为：空白对照组（C），模型对照组（D1），降糖灵（80 mg・kg-1）对照组（D2），参芪降糖颗粒大剂量（2.0 g・kg-1）治疗组（D3），参芪降糖颗粒中剂量（1.0 g・kg-1）治疗组（D4），参芪降糖颗粒小剂量（0.5 g・kg-1）治疗组（D5）. 各组动物每日给药1次，按10 mL・kg-1等容量灌胃给药或生理盐水. 给药剂量同前. 连续给药14 d.
1.2.3空腹血糖、C肽值及胰岛素的测定于第5日，第14日分别测定各组大鼠的空腹血糖、C肽值及胰岛素水平.
统计学处理：所有数据均采用x±s表示，采用SPSS 10.0统计软件进行重复测量数据的方差分析.
2结果
D2~D5组后第5日与治疗后第14日与治疗前的差异均有显著性意义(P<0.05), D2~D5组第5日与第14日的差异无显著性意义(Tab 1~3). D2~D5组与D1组比治疗后的差异均有显著性意义(P<0.05),除D3与D2治疗后的差异有显著性意义(P<0.05)外，其余各剂量组与D2的差异均无显著性意义.
表1－表3 (略)
3讨论
参芪降糖颗粒的功能为：益气养阴，滋补脾肾. 糖尿病中医辨证分型气阴两虚居多［3,4］. 本研究用STZ破坏大鼠胰岛β细胞，使机体内胰岛素分泌不足［5,6］，血糖值持续稳定升高而导致糖尿病. 结果表明，参芪降糖颗粒能使STZ诱导的高血糖大鼠的血糖水平明显降低，与报道相一致［7,8］. 且能增加C肽水平，促进胰岛素的分泌，提高糖尿病大鼠血浆中胰岛素的含量.
孟毅等［9］研究表明，降糖安脉胶囊在血糖降低的同时，血浆胰岛素含量也有所增加，推测参芪降糖颗粒的降糖作用是通过改善、修复受损的胰岛素β细胞，促进胰岛素分泌而实现的. 周庆伟等［10］天芪胶囊的作用机制为促进残存的胰岛素β细胞释放胰岛素，在血糖降低的同时，血浆胰岛素含量也明显增加. 参芪降糖颗粒与上述两药君药相同，且在降糖的同时胰岛素水平增加，故推测参芪降糖颗粒的降糖作用与上述机制有关. 并可通过胰岛素组织切片电镜切片作进一步研究.
鉴于参芪降糖颗粒的上述药作用，且其为纯中药制剂，将为治疗糖尿病及其并发症的中药新药开发提供新的思路.
【文献】
［1］ 林兰， 郭力. 中药糖微康对糖尿病大鼠肾皮质MMP9表达的影响［J］. 山西中医学院学报，2003；4（2）：8-10.
［2］ 顾永昊， 张昨明， 李莉. 链脲霉素诱导糖尿病大鼠的早期视觉电生理改变［J］. 第四军医大学学报，2002；23（11）：990-993.
［3］ 周国英， 武雪萍， 衡先培， 翁玲. 2型糖尿病中医辨证分型与胰岛素抵抗的关系［J］. 福建中医学院学报，2002；12（4）：3-5.
［4］ 陈芳， 丁学屏. 2型糖尿病的中医辨证分型与生化指标关系的探讨［J］. 湖南中医药导报，2003； 9（7）：5-6.
［5］ Herold KC, Vezys V, Sun Q. Regulation of cytokine production during development of autoimmune diabetes［J］. J Immunol, 1996; 156（9）：3521-3527.
［6］ 陈文良， 黄萍， 吴清和， 徐鸿华， 荣向路， 韩坚. 复方灵芝降糖胶囊对胰岛β细胞形态学的影响［J］. 广州中医药大学学报，2000；17（1）：51.
［7］ 孙光， 胡中梁， 林哲章. 参芪降糖颗粒治疗Ⅱ型糖尿病35例临床观察［J］. 福建中医学院学报，1999；9(1):14-15.
［8］ 施炜， 苏如松. 参芪降糖颗粒对初期糖尿病肾病保护作用研究［J］. 中医药学刊，2001；19：496-500.
［9］ 孟毅， 崔应岷， 王倩嵘. 降糖安脉胶囊治疗II型糖尿病的实验研究［J］. 医药学报， 1998;13(4):19-21.
［10］ 周庆伟， 宗瑞义， 谢湘林. 天芪胶囊降糖作用的实验研究［J］. 中草药， 1997;28(2):95-97.
