东川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
【摘要】 ［目的］探讨东川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用.［方法］将Wistar大鼠随机分为5个组，即假手术组、缺血再灌注模型组、东川芎小剂量组（8.1g/kg），东川芎大剂量组（16.2g/kg）及丹参药物组（13.5g/kg）.采用线栓法建立大脑中动脉可逆性脑缺血再灌注模型，检测神经功能缺损程度和脑组织含水量.［结果］与模型组比较，东川芎大剂量组脑缺血再灌注损伤大鼠的神经行为状态明显改善，脑组织含水量明显降低.［结论］东川芎可减轻大鼠脑缺血再灌注损伤程度，对脑组织有一定的保护作用.
【关键词】 再灌注损伤;脑;植物,药用
ABSTRACT:OBJECTIVETo explore the protective effects of the Cnidlum offcinale Makino(COM) on cerebral ischemia?reperfusion injury in rats.METHODSWistar rats were randomly divided into 5 groups: sham operated group, ischemia?reperfusion group, small dosage group of the COM (8.1g/kg), large dosage group of the COM (16.2g/kg) and the salvia miltiorrhiza group (13.5g/kg). The cerebral ischemia reperfusion model of the reversible middle cerebral artery was made by the thread epistom method, and the extent of neurologic impairment and the water content of cerebral tissue were measured.RESULTSAs compared with model group, the neural behavior conditions of cerebral infarction of ischemia?reperfusion injury in rats was significantly reduced in the large dosage group of the COM.CONCLUSIONThe COM can lessen the injury extent in rats of cerebral ischemia?reperfusion injury in the cerebral tissue and has some of protective effects.
Key words:reperfusion injury;brain;plants, medicinal
缺血再灌注损伤是指机体某器官组织人为缺血一段时间后再恢复血液循环，使器官组织损伤程度进行性加重.脑缺血再灌注损伤是复杂的病理生理过程，其发病机制有若干学说，如氧自由基大量生成学说、钙超载学说、兴奋性氨基酸大量释放学说、能量代谢障碍及酸中毒学说等,还有内皮素的作用及一氧化氮的合成等.东川芎为伞形科多年生草本植物Cnidlum offcinale Makino的干燥根茎，原产于日本、韩国及朝鲜，吉林省延边地区有栽培.本实验利用Wistar大鼠，采用由Longua及Nagasawa的线栓法［1］改进的方法［2,3］制作可逆性局灶性脑缺血再灌注动物模型，观察了东川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.
1 材料与方法
1.1 材料 实验动物取Wistar大鼠，体重为270～320g，雌雄不限，由延边大学医学部实验动物科提供.东川芎由延边地区栽培，由延边大学药学院药剂学教研室提取.提取工艺：称取东川芎500g,加10倍量的800mL/L乙醇,浸泡24h,回流2h,过滤,滤渣加8倍量的800mL/L乙醇,回流90min,过滤,合并滤液,减压蒸出溶剂至净膏.SXP?1B型手术显微镜由上海医用光学仪器厂生产.
1.2 方法
1.2.1 神经行为状态的标准及判定 取50只Wistar大鼠，随机分为5个组，即假手术组、模型组、东川芎小剂量组（8.1g/kg）、东川芎大剂量组（16.2g/kg）及丹参对照组（13.5g/kg），每组各为10只，连续灌胃给药7d，第7日给药后1h手术插线栓，缺血2h后拔除线栓，再灌注24h后观察大鼠的神经行为状态并进行神经行为评分.参照Zealonga等［4］的标准进行神经行为学评分，1～3分作为成功模型.Zealonga标准：0分为无神经损伤体征，1分为不能充分伸展对侧前爪，2分为向对侧转圈，3分为向对侧倾斜，4分为不能自主行走，意识丧失.
1.2.2 脑组织中含水量的检测 另取50只Wistar大鼠，分组、给药及制作模型方法与1.2.1项下方法相同，第7日给药1h后手术插线栓，缺血2h后拔除线栓，再灌注24h，处死大鼠，按照Gotoh等［5］方法剖取脑组织，立即用冷生理盐水冲洗，吸干表面水分，称取湿质量，干燥后称取干质量，测定脑组织含水量，公式如下：脑组织含水质量=湿质量-干质量.
1.2.3 统计学方法 所有数据采用均数±标准偏差（±SD）表示，采用SPSS11.0统计软件进行单因素方差分析.
2 结果
2.1 东川芎对脑缺血再灌注大鼠神经行为评分的影响 由表1可见，假手术组大鼠神经行为评分与模型组比较具有显著性差异（P＜0.01）；东川芎大剂量组大鼠神经行为评分与模型组比较具有显著性差异（P＜0.01）；东川芎小剂量组大鼠神经行为评分与模型组比较无显著性差异；丹参对照组大鼠神经行为评分与模型组比较具有显著性差异（P＜0.01）.结果提示，大剂量东川芎可改善脑缺血再灌注大鼠的神经行为状态. 表1 东川芎对脑缺血再灌注大鼠神经行为评分的影响
2.2 东川芎对脑缺血再灌注大鼠脑组织含水量的影响 假手术组、模型组、东川芎小剂量组、东川芎大剂量组及丹参对照组脑缺血再灌注大鼠脑组织含水质量（mg）分别为（762.4±13.6），（789.1±8.5），（778.3±7.5），（769.5±6.4），（765.7±6.7）.假手术组大鼠脑组织含水量与模型组比较具有显著性差异（P＜0.01）；东川芎小剂量组和大剂量组大鼠脑组织含水量与模型组比较均具有显著性差异（P＜0.05，P＜0.01）；丹参对照组大鼠脑组织含水量与模型组比较具有显著性差异（P＜0.01）.结果提示，东川芎具有稳定细胞膜，减轻脑水肿，增加脑组织对缺血再灌注损伤的耐受性的作用.
3 讨论
本实验采用局灶性大脑中动脉闭塞大鼠模型作为主要实验对象，大脑中动脉为人类血栓好发部位，故模拟人类局灶性脑缺血的动物模型最好选择阻断大脑中动脉［6，7］.实验结果表明，东川芎大剂量组大鼠缺血再灌注后神经行为评分明显优于模型组，脑组织含水量明显少于模型组，提示大剂量的东川芎可改善缺血再灌注大鼠神经功能稳定，减轻脑水肿，增强脑组织对缺血再灌注损伤的耐受性，对脑组织有一定的保护作用.
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