对HPLC法测定醋酸地塞米松片的含量研究

摘要： 目的  建立HPLC法测定醋酸地塞米松片的含量。方法  采用Diamond C18色谱柱（5μm，4.6×150mm），柱温为室温，流动相：甲醇-水（70：30），流速为1ml/min ，检测波长：240nm，以峰面积。结果  线性范围4～24μg/ml。平均加样回收率为（103.2±3.2）%（n＝15）。结论  本法简便、快捷、灵敏，可作为醋酸地塞米松片质量控制的有效方法。 

【关键词】  HPLC  醋酸地塞米松 

    【Abstract】  Objective  To establish a HPLC method for the determination of dexamethasone acetate tablets.Methods  Analytical column was Diamond C18（5μm，4.6×150mm），methanol-water（70：30）was used as the mobile phase at the flow rate of 1ml/min.The detection wave length was 240nm and the peak area was calculated.Results  The calibration curve was linear within the concentration range of 4～24μg/ml. The average recovery was （103.2±3.2）%(n=15).Conclusion  The method was proved to be simple，rapid and accurate. 

    【Key words】  HPLC  dexamethone acetate 

    醋酸地塞米松为肾上腺皮质激素类药，《药典》2000年版醋酸地塞米松片的含量测定方法为紫外分光光度法［1］，此法专属性不强，选择性较差，其结果可能受到片剂中其它辅料或添加剂的影响。本文采用HPLC法测定其含量，现报道如下。 

    1  仪器与试药 
    Waters高效液相色谱仪（515泵；996光电二极管矩阵检测器）；岛津UV-1601PC紫外分光光度计；醋酸地塞米松对照品（浙江仙琚制药股份有限公司提供，含量为99.30％，批号031008）；市售醋酸地塞米松片（规格：0.75mg/片， A厂批号：030403；B厂批号：030501(B1)； 030902（B2）； 030502（B3）；C厂批号：20021001（C1）； 20030601（C2））；甲醇(色谱纯，默克公司)，水为二次重蒸水。 

    2  方法与结果 
    2.1  色谱条件  色谱柱：Diamond C18（5μm，4.6×150mm），流动相：甲醇-水（70：30），流速：1ml/min，柱温：室温，检测波长：240nm，进样量：20μl。在该色谱条件下，醋酸地塞米松保留时间为4.95min，色谱图见图1。 

    2.2  溶液配制 

    2.2.1  对照品储备溶液的配制  精密称取醋酸地塞米松对照品约25mg，置于25ml容量瓶中，加入甲醇适量溶解，定容，摇匀，配成1mg/ml的对照品储备液。 

    2.2.2  标准曲线制备  分别精密吸取上述储备液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml，置于25ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，配成4、8、12、16、20、24μg/ml的标准溶液。取20μl进样，以醋酸地塞米松峰面积A对其浓度C进行线性回归，回归方程为C＝2.3×10－5A＋0.605697，r＝0.9997。试验结果表明，在4～24μg/ml范围内醋酸地塞米松峰面积和浓度呈良好的线性关系。 

2.2.3  供试品溶液的配制  分别取供试品20片，精密称定，研细。称取适量（相当于醋酸地塞米松3.75mg）置50ml容量瓶中，加入甲醇25ml，置50～60℃的水浴中保温10min，并不断振摇，放冷至室温，定容，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置50ml容量瓶，加甲醇至刻度即得。吸取20μl进样，以醋酸地塞米松峰面积A代入标准曲线供试品含量。 

2.3  回收率试验  精密称取已知含量的醋酸地塞米松供试品粉末适量（相当于醋酸地塞米松0.75mg），置于10ml容量瓶中，加储备液适量，加入甲醇5ml，置50～60℃的水浴中保温10min，并不断振摇，放冷至室温，定容，摇匀并过滤，精取续滤液0.8ml，置10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，用HPLC法进行测定，以实测值除以加入量计算加样回收率。平均加样回收率为（103.1±1.5）%（n＝15）。 

2.4  样品测定  各供试品的HPLC法测定结果见表2。参照《药典》2000版采用紫外分光光度法［1］测定各样品含量 

3  讨论 

    《中国药典》采用紫外分光光度法测定醋酸地塞米松片的含量［1］，美国药典则采用高效液相色谱法测定醋酸地塞米松片的含量。参照美国药典的方法，本实验采用HPLC法测定醋酸地塞米松片的含量，醋酸地塞米松与杂质分离良好，且平均加样回收率为(103.2±3.2)％，方法可靠。 

   供试品HPLC色谱图在地塞米松色谱峰前存在片剂辅料杂峰，说明辅料在240nm处存在紫外吸收，可干扰醋酸地塞米松片含量的测定，导致紫外分光光度法测得的含量偏高，与HPLC法相差达15%。用HPLC法测定三个厂家片剂含量均低于含量限度（90%～110%），而用药典方法测定的结果则均合格，由此可见，在药典方法下其含量检测合格的样品，仍有可能不合格。因此，我们认为，药典所用醋酸地塞米松片含量测定方法有待改进。本文所用HPLC法简便，快捷，灵敏，可作为醋酸地塞米松片质量控制的有效方法。 

    【】 

    1  中国药典编委会.中华人民共和国药典(二部)，北京：化学出版社