血塞通滴丸中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1含量的高效液相色谱测定

来源:岁月联盟 作者:毛建新 时间:2010-07-12

【关键词】  血塞通滴丸 高效液相色谱法 人参皂苷Rg1 三七皂苷R1

   血塞通滴丸为血塞通的新剂型,其主要成分为人参皂苷Rg1,三七皂苷R1。本实验采用高效液相色谱法测定血塞通滴丸中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。

  1  仪器与试药

  SSI公司PC-3000高效液相色谱仪,热电300紫外分光光度计,人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品(药品生物制品检定所),血塞通滴丸(批号:20080409,20080401,20080402)本所自制。甲醇为色谱纯,水为纯化水。

  2 方法与结果

  2.1 检测波长确定称取人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品适量,用甲醇配制成20μg·ml-1的溶液,在200~300 nm波长处扫描,结果人参皂苷Rg1,三七皂苷R1均在203 nm波长处有最大吸收。

  2.2 色谱条件色谱柱为岛津KromasilC18(4.6 mm×25 cm);流动相为甲醇-水(58∶42);流速为1.0ml·min-1,检测波长为203 nm;理论板数按人参皂苷Rg1,三七皂苷R1峰不低于10 000,分离度大于2.0。

  2.3 含量测定

  2.3.1 标准曲线的绘制
   
  人参皂苷Rg1:精密称定人参皂苷Rg1对照品约60mg,置50ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取1.0,3.0,5.0,7.0,9.0,10.0 ml分别置10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10 μl注入色谱仪,测定。结果表明人参皂苷Rg1在浓度0.116~1.160 mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,其回归方程Y=-99 466+3 257 868X,r=0.999 2。
   
  三七皂苷R1:精密称定三七皂苷R1对照品约60mg,置50mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密量取2.0,3.0,4.0,5.0,6.0,7.0 ml分别置10 ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10 μl注入色谱仪,测定。结果表明三七皂苷R1在浓度0.232~0.812 mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,其回归方程Y=11 772+2 495 523X ,r=0.998 7。

  2.3.2 重复性与稳定性试验取标准曲线测定中心浓度点连续进样6次,量取峰面积RSD分别为人参皂苷Rg1 1.11%,三七皂苷R11.09%,重现性良好,可准确用于含量测定。该溶液放置6 h后重复进样,峰面积基本不变,RSD分别为1.05%和0.99%。

  2.3.3  精密度测定取样品6份,精密称定,按样品含量测定方法测定RSD为2.5%。

  2.3.4  加样回收率测定取血塞通滴丸10粒,精密称定,置25 ml量瓶中,加甲醇适量,超声10 min使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密量取5.0 ml置10 ml量瓶中,精密加入人参皂苷Rg1,三七皂苷R1对照品适量,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。测定结果见表1。表1  加样回收率测定结果(略)

  2.3.5 样品测定取血塞通滴丸10粒,精密称定,置25 ml量瓶中,加甲醇适量,超声10 min使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。测定结果见表2。表2  血塞通滴丸测定结果(略)

  2.3.6 血塞通原料测定精密称取血塞通原料约100 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇适量,超声10 min使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。按上述色谱条件分别取10μl注入色谱仪,测定。测定结果见表3。表3  血塞通原料测定结果(略)

  3 讨论
   
  血塞通滴丸的辅料为聚乙二醇6 000。经测试聚乙二醇6 000的甲醇溶液无紫外吸收峰,对样品的测定无干扰。本方法简便、准确,可作为控制血塞通滴丸中人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量测定方法。