痛舒胶囊抗炎镇痛作用的实验研究
【摘要】 目的 观察痛舒胶囊对动物炎症及疼痛的影响。方法 将受试动物（小鼠及家兔）随机分为盐水对照组、消炎痛组（或醋酸泼尼松组）、痛舒胶囊高中低剂量组。按方法造模，以此观察痛舒胶囊抗炎镇痛效果。结果 痛舒胶囊可减轻或消除由甲醛或蛋清诱发的长耳白兔、大白鼠踝关节炎或足跖部的肿胀，提高动物痛阈。结论 痛舒胶囊具有抗炎镇痛效果。 胡晓春（1974～），男，汉族，湖北籍，主治医师
【关键词】 痛舒胶囊 抗炎 镇痛
Abstract Objective To observe the anti-inflammatory and analgesic effects of Tongshu capsule in animal model. Methods The animals (mice and rabbits) were randomly divided into saline control group, Indomethacin (or prednisolone acetate) group, Tongshu Capsule group (further divided 3 subgroup as high, medium and low dose). Inflammation and pain animal model established according to the references, and the anti-inflammatory and analgesic effects of Tongshu Capsule were observed. Results Tongshu capsule can reduce the ankle arthritis, swelling of feet induced by formaldehyde or egg white and improve the animal pain threshold. Conclusion Tongshu capsule have anti-inflammatory and analgesic effect.
Key words Tongshu capsule Anti-inflammatory Analgesic
痛舒胶囊源于云南彝族民间验方，由重楼、珠子参、七叶莲、灯盏花、三七等中药组方而成，具有消肿镇痛、活血化瘀的功效，用于跌打损伤、肩周炎、痛风性关节炎的。本试验拟通过动物试验观察其抗炎镇痛效果，为临床使用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
痛舒胶囊，按组方自配，用CMC-Na分别配成高中低剂量混悬液。吲哚美辛肠溶片(消炎痛)，25 mg/片，山西临汾云鹏药业有限公司生产（国药准字 H14020771），批号：20050501；醋酸泼尼松龙片（5mg/片），上海信宜药业有限公司（国药准字H31020771），批号：20050112。受试动物：昆明种小鼠，7周龄，体重28～32 g，Ⅰ级动物，合格证书：医动字第19－024号；Wistar大鼠，6周龄，体重183～205 g，Ⅰ级动物，合格证书：医动字第19－022号；大耳白兔，体重2.4－3.1 kg，Ⅰ级动物，合格证书：医动字第19－025号。均由兰州大学医学院实验动物中心提供。饲养条件：室温20℃～25℃，相对湿度50%～60％。予固体饲料，自由饮水。
1.2 实验方法
1.2.1 痛舒胶囊对大耳白兔甲醛诱发踝关节炎的影响
大耳白兔随机分5组，每组8只。根据前期的预试验结果，本试验设计痛舒胶囊抗炎最大剂量为12g/kg，中剂量为6 g/kg，低剂量为3 g/kg；吲哚美辛肠溶片作阳性对照组用药，按照人与兔之间剂量换算［２］，为3.5mg/kg，每天给药一次，连续用药6天；阴性盐水组给予同体积的生理盐水（10ml/只），每天给药1次，连续用药6天。并于用药第2天在各兔左右踝关节各注射2.5％甲醛溶液0.5ml致肿，于注射后第1、2、3、4、5天分测踝关节周径1次，比较各兔致炎前后的测量值，并以两者的差值为肿胀度。
1.2.2 痛舒胶囊对大耳白兔毛细血管通透性的影响
长耳白兔随机分成痛舒胶囊、吲哚美辛肠溶片及生理盐水组，每组8只，分别以灌胃法给服痛舒胶囊药液(12g生药/kg)、吲哚美辛肠溶片（3.5mg/kg）及生理盐水（10ml/只）。连续给药两天，每天1次，并于实验前禁食12 h。第3天再给1次，1 h后，由兔耳静脉注射0.5％伊文思兰(1ml/kg)，同时用微量注射器在兔背（事先去毛）皮内注射0.1%组织胺0.1 ml使之形成皮丘。注射完毕即开始计时，观察皮丘出现蓝色斑的时间。30 min时，用无色透明纸盖于蓝色斑上，精确描出蓝色斑的形状大小，并复印于坐标纸上，蓝色斑的面积。
1.2.3 痛舒胶囊对大鼠蛋清性足跖肿胀的抑制作用
体重183～205 g雄性大白鼠按体重随机平均分为5组，即痛舒胶囊5、10、20 g生药量／kg 3个剂量组，吲哚美辛肠溶片组（6.75mg/kg）和生理盐水对照组(5ml/只)。给药前按容积法分别测定每鼠正常踝关节以下右后爪的排水容积，然后分别一次性经口灌胃给予各组药物。1 h后，于各鼠右后足跖皮下注射10％新鲜蛋清0.1 ml致炎，分别于致炎后30、60、120 min测定致炎后右后足爪的排水容积，以致炎后足容积减去致炎前足容积之差值作为肿胀度。并按下式计算抑制率：
抑制率=阴性对照组足肿胀度-给药组足肿胀度阴性对照组足肿胀度×100%
1.2.4 对大鼠塑料环肉芽肿的影响
体重192～205 g大白鼠32只,按体重随机平均分为4组，即痛舒胶囊10、20 g生药量／kg 2个剂量组，醋酸泼尼松龙片(5.5mg/kg)组和生理盐水对照组(5ml/只)。醋酸泼尼松龙片是一种具有抗炎，抑制炎性肉芽增生作用的糖皮质激素。实验鼠按Rudes实验性肉芽肿改良法 ［１］，手术埋藏塑料环。术后当天开始灌胃用药，每日1次，连续10天。于术后第11天将实验鼠用脊椎脱臼法处死。剥离肉芽组织，把附在肉芽上的血块和筋膜分离干净，吸水纸吸干体液，扭力天平称重。
1.2.5 痛舒胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用
体重28～32 g昆明种小鼠50只，按体重随机平均分为5组，即痛舒胶囊40、20、10 g生药量/kg 3个剂量组，吲哚美辛肠溶片6.75 mg/kg阳性对照组和生理盐水阴性对照组。各组均于致炎前1 h经口灌胃给药。给药后1 h用吸满二甲苯的棉球涂于小鼠左耳前后两面3次致炎，右耳作为对照耳不涂二甲苯，4 h后将小鼠颈椎脱臼处死，沿耳廓基线剪下两耳，用直径8 mm的锋利打孔器于相同部位分别打下左、右耳片，分析天平称重，以两耳片重量之差作为肿胀度，计算各组肿胀度，并按下式计算抑制率：
抑制率=对照组平肿胀度-给药组平肿胀度对照组平均肿胀度×100%
1.2.6 对醋酸致小鼠扭体的影响
昆明小鼠50只，按体重随机平均分为5组，每组雌、雄各半。设痛舒胶囊20、40、60 g生药量/kg 3个剂量组，吲哚美辛肠溶片12.5 mg/kg阳性对照组和生理盐水对照组。各组均一次性经口灌胃给药。1 h后腹腔注射0.7％醋酸溶液0.1 mg/kg，5 min后，开始记录此后15 min内小鼠的扭体次数(扭体次数以腹部收缩、躯体扭曲、后肢伸展、蠕行等为判断标准)，并按下式计算抑制率：
抑制率=阴性对照组平均扭体次数-给药组平均扭体次阴性对照组平均扭体次×100%
1.2.7 对小鼠痛阈的影响
试验在室温18℃～22℃中进行。将小鼠置于（55±0.5）℃热板上，观察和记录小鼠开始放在热板上至添后足的时间作为痛反应潜伏期，选择痛反应潜伏期为10～25 s范围内的雌性小鼠50只，随机平均分为5组，分组和剂量同前，各组均一次性经口灌胃给药。分别于给药后l、1.5、2、2.5 h时将小鼠置于热板上，测定小鼠的痛反应潜伏期，超过60 s者以60 s算。按下式计算各组小鼠的痛阈提高率：
痛阈提高率=给药后痛反应潜伏期-给药前痛反应潜伏期给药前痛反应潜伏期×100%
1．3 统计学方法
各组数据以x±S表示，用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析，组间采用两两比较。
2 结果
2.1 痛舒胶囊对大耳白兔甲醛诱发踝关节炎的影响（见表1）表1痛舒胶囊对试验兔甲醛性关节炎的影响注射甲醛1天后，各组踝关节肿胀均达最高峰，但其程度以痛舒胶囊高、中剂量组为低。第2天以后各时相段的5组都开始消肿，其速度又以痛舒胶囊高剂量组最快。其中第3～5天各用药组与盐水组比较，有显著差异（P均<0.05）。说明痛舒胶囊与消炎痛对长耳白兔甲醛性关节炎有明显的抑制作用。
2.2 痛舒胶囊对大耳白兔毛细血管通透性的影响(见表2）表2痛舒胶囊对试验兔毛细血管通透性的影响痛舒胶囊组蓝色斑出现迟且面积小，而盐水对照组出现早且面积大，统计学处理显示差异显著（P<0.05）。说明痛舒胶囊能抑制组织胺对局部毛细血管通透性的影响，但作用不及消炎痛（P<0.05）。
2.3 痛舒胶囊对大鼠蛋清性足跖肿胀的影响（见表3～4） 表3痛舒胶囊对蛋清致大鼠足跖肿胀的影响（ml,x±S)
分组剂量n30min60min120min盐水对照组5ml/只80.250±0.0640.380±0.0560.560±0.131痛舒胶囊低剂量组10g/kg80.210±0.0560.280±0.082★0.205±0.037★痛舒胶囊中剂量组20 g/kg80.181±0.049★0.170±0.067★0.186±0.073★痛舒胶囊高剂量组30 g/kg80.173±0.043★0.165±0.060★0.148±0.073★消炎痛组6.75mg/kg80.120±0.047★0.150±0.026★0.133±0.045★ 注：与盐水组比较，★P<0.05. 表4痛舒胶囊对蛋清致大鼠足跖肿胀抑制率的影响痛舒胶囊高、中剂量组及消炎痛组皆从致炎后30 min开始对足跖肿胀有明显的抑制作用。与盐水对照组比较有显著性差异（P<0.05）；痛舒胶囊3个剂量组在致炎后第60～120 min间，与盐水组比较差异显著（P<0.05），并存在明显量效关系；但对蛋清性足跖肿胀的抑制作用不及消炎痛。
2.4 对大鼠塑料环肉芽肿的影响（见表5）
表5痛舒胶囊对大白鼠塑料环肉芽肿形成的影响 注：与盐水组比较，★P<0.05.
4组中以盐水组肉芽组织最重，醋酸泼尼松龙片组最轻，痛舒胶囊2个剂量组居中，与盐水组比较差异显著（P<0.05），表明痛舒胶囊对大鼠塑料环肉芽肿有显著的抑制作用，但强度稍逊于醋酸泼尼松龙片。
2.5 痛舒胶囊对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响（见表6）
表6痛舒胶囊对二甲苯致昆明种小鼠耳廓肿胀的影响（ml,x±S)
分组剂量n肿胀度 抑制率（％）盐水对照组3ml/只1024.320±1.095痛舒胶囊低剂量组10g/kg1022.749±1.31★6.5痛舒胶囊中剂量组20/kg1019.972±1.85★17.9痛舒胶囊高剂量组30g/kg1018.889±1.55★22.3消炎痛组6.75mg/kg1017.870±1.47★26.5 注：与盐水组比较,★P<0.05.
痛舒胶囊大、中、小剂量组能够显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀，其耳廓肿胀度与阴性对照组比较显著减轻，统计学上意义显著(P<0.05)，并存在明显的量效关系。
2.6 痛舒胶囊对醋酸致小鼠扭体反应的影响（见表7）
表7痛舒胶囊对醋酸致小鼠扭体反应的影响（x±S)
分组剂量n15min扭体次数抑制率（％）盐水对照组3ml/只1082.3±7.0痛舒胶囊低剂量组20g/kg1056.9±8.1★30.9痛舒胶囊中剂量组40g/kg1029.2±5.5★64.5痛舒胶囊高剂量组60g/kg1022.5±5.9★72.7消炎痛组12.5mg/kg1010.9±8.1★86.8 注：与盐水组比较，★P<0.05.
痛舒胶囊大、中剂量组较阴性盐水对照组小鼠扭体次数明显减少，统计学上存在明显差异。抑制率随痛舒胶囊剂量增加而增大。而且痛舒胶囊2个剂量组小鼠扭体反应程度较轻，其中30g／kg剂量组小鼠躯体扭曲，后肢呈伸展状态；60g/kg剂量组小鼠仅为腹部轻微收缩。
2.7 痛舒胶囊对雌小鼠热板法痛反应潜伏期的影响（见表8～9）
表8痛舒胶囊对雌小鼠热板法痛反应潜伏期的影响（x±S)
分组剂量给药前给药后1h给药后1.5h给药后2h给药后2.5h盐水对照组3ml/只15.8±2.4916.8±4.3417.1±3.2815.9±3.0316.3±3.40痛舒胶囊低剂量组20g/kg15.8±2.1020.2±3.7919.5±4.9721.3±4.8519.3±3.43痛舒胶囊中剂量组40g/kg15.4±3.1023.8±5.83★24.4±3.69★25.6±5.23★22.7±4.32痛舒胶囊高剂量组60g/kg16.2±2.6229.7±7.04★28.1±11.7★35.1±11.7★38.6±10.4★消炎痛组12.5mg/kg15.6±2.4137.6±12.0★38.3±9.79★49.0±11.2★49.2±12.0★ 注：与盐水组比较，★P<0.05.
表9痛舒胶囊对小鼠热板法痛阈提高率的影响给药后1、1.5、2 h, 痛舒胶囊高、中剂量组小鼠对热板刺激的痛反应潜伏期较阴性对照组明显延长，痛阈提高，且呈现明显量效关系。痛舒胶囊高剂量组镇痛作用一直持续到药后2.5 h。但是，作用不及消炎痛组。
3 讨论
本实验结果显示，痛舒胶囊对急性渗出性炎症有明显的对抗作用，可减轻或消除长耳白兔、大白鼠由甲醛或蛋清诱发的踝关节炎或足跖部的肿胀。痛舒胶囊能显著抑制组织胺对局部毛细血管通透性的影响。这即说明，该药可能通过对抗某些炎性介质的渗透作用，从而减轻和缓解炎性渗出物对局部组织和末梢神经的刺激，达到“消肿止痛”的目的。
痛舒胶囊对以肉芽组织增生为主的慢性炎症有一定的抑制作用，其有利于减少损伤局部组织粘连及机化的程度和范围，加速损伤组织功能的恢复。
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