损毁大鼠弓状核对红细胞免疫功能的影响及其机制的研究

                                       作者：郑贵浪 钟汝核 刘浩宇 刘锡仪  

   【关键词】  红细胞,免疫功能,生长素,性激素,甲状腺素

     【摘要】 目的  研究弓状核对红细胞（RBC）免疫功能的调控及其途径和机制。 方法  建立损毁弓状核的实验动物模型，并观察生长素、雌二醇、左旋甲状腺素、丙酸睾酮对大鼠免疫功能的影响。测定红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）和红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICRR）。 结果  损毁弓状核后RBC免疫功能显著下降;生长素可提高其RBC免疫功能，且有量―效关系;雌二醇、左旋甲状腺素可提高其RBC免疫功能，但剂量过高效果反而不明显。丙酸睾酮可抑制其RBC免疫功能，剂量越高，抑制作用越明显。 结论  下丘脑弓状核参与红细胞免疫功能的调控，生长素、雌二醇、左旋甲状腺素、丙酸睾酮等保持在一定水平上的平衡调节，是弓状核参与红细胞免疫功能调控的重要途径。

     关键词  红细胞 免疫功能 生长素 性激素 甲状腺素.

    【Abstract】 Objective To investigate the effect of hypothalamic arcuate neucleus（ARC）destroy on RBC im-munological function and the mechanism.Methods Established the model of experimemal animal whose ARC was de-stroyed.The effects of growth hormone（GH），estradiol（E 2 ），thyroxine（T 4 ），and testosterone（T）were observed.The RBC-C3b receptor rosette ratio（RBC-C3bRR）and RBC immune complex rosette ratio（RBC-ICRR）were mea-sured.Results RBC immunological function reduced obviously after ARC was destroyed.GH increases RBC immuno-logical function.E 2 and T 4 can improve RBC immunological function，but T holdback RBC immunological function.Conclusion ARC participated in the regulation of RBC immunological function.Proper proportion of GH，E 2 ，T 4 and T is play important role in the regulaion of RBC immunological function.

    Key words red blood cell immunological function growth hormone sexual hormones thyroid

       对谷氨酸单钠神经毒作用研究的不断深入，推动了神经解剖学、神经内分泌学和神经病的。新生期大鼠注射谷氨酸单钠（MSG）可选择性损毁下丘脑弓状核神经元。大鼠出生后第1、3、5、7、9天，皮下注射10%MSG4g/kg，存活至第5周，弓状核神经细胞消亡80%，存活至第10周，弓状核残存的神经细胞不到10%。MSG对新生期大鼠弓状核神经元有特异的损毁作用，可用作复制损毁弓状核的动物模型 ［1］ 。国内外许多学者用此模型进行弓状核功能的研究。

    红细胞是血液循环中很重要的天然免疫细胞，具有识别、黏附抗原、清除循环免疫复合物的能力，参与机体免疫反应及其调控，是机体免疫系统的一个子系统。

    神经免疫调节是当前研究的热门课题，神经系统通过广泛的外周神经突触及其分泌的神经递质和众多的内分泌激素、细胞因子调控免疫系统的功能。关于神经系统对白细胞免疫系统的调控已进行了广泛深入的研究。但是，神经系统对红细胞免疫功能的调控研究，报道尚少。

    本文研究损毁下丘脑弓状核后红细胞免疫功能的改变，并人工改变内分泌激素（生长素、性激素、甲状腺素）的水平，观察其对红细胞免疫功能的影响。了解中枢神经系

     * 基金项目:广东医学院学生科研基金资助项目
   
     统对红细胞免疫功能的调控作用及其机制。

     1 材料与方法

     1.1 动物分组及实验安排 新生Sprague-Dawley（SD）大鼠（广东医学院实验动物中心提供）76只，随机分为MSG组（59只）和对照组（17只），分别做好标记。MSG组大鼠于出生后第2、4、6、8、10天皮下注射10%MSG（上海化学试剂公司）4g/kg，对照组用相同方法皮下注射等体积的生理盐水（NS组）。每次注射后，MSG组和NS组大鼠均放回原窝，仍由原母鼠哺乳，饲养30天，雌雄分笼，在照明、通风、温度、湿度完全相同的条件下饲养。

    MSG大鼠在分笼时随机分为9组:（1）MSG对照组;（2）生长素低剂量组（GH 1 ）（每次0.15μg/kg）;（3）生长素高剂量组（GH 2 ）（每次1μg/kg）;（4）雌激素低剂量组（E 1 ）（每次20μg/kg）;（5）雌激素高剂量组（E 2 ）（每次30μg/kg）;（6）丙酸睾酮低剂量组（T 1 ）（每次100μg/kg）;（7）丙酸睾酮高剂量组（T 2 ）（每次200μg/kg）;（8）左旋甲状腺素低剂量组（Ty 1 ）（每次2.5μg/200g）;（9）左旋甲状腺素高剂量组（Ty 2 ）（每次5.0μg/200g）。

    基因重组人生长素（γ-hGH，深圳科兴生物工程股份有限公司），苯甲酸雌二醇（上海通用股份有限公司），丙酸睾酮（广州明兴制药厂），从SD大鼠出生后第11天起，均皮下注射，隔天1次，共45次。左旋甲状腺素（默克柏药业有限公司）灌胃，隔天1次，共45次。于出生后第101天取静脉血做红细胞免疫功能测定。

    1.2 红细胞免疫功能测定 红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）和红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICRR）检测方法参照 ［2］ 。致敏与未致敏酵母多糖由本研究室提供。1.3 统计学方法 统计分析用组间t检验。数据用SPSS11.0统计软件处理。结果用均数±标准差（ˉx±s）表示。差异显著性以P<0.05和P<0.01表示。P<0.05表示差异有显著性，P<0.01表示差异有非常显著性。

     2 结果

     2.1 损毁大鼠下丘脑弓状核对红细胞RBC-C3bRR和RBC-ICRR的影响 结果见表1。

     表1 损毁大鼠下丘脑弓状核对红细胞RBC-C3bRR和RBC-ICRR的影响 （略）
   
     注:与NS组比较， * P<0.05

     从表1可见，MSG组大鼠RBC-C3bRR（%）显著降低，RBC-ICRR（%）显著升高。说明损毁大鼠下丘脑弓状核后红细胞免疫功能显著降低。

     2.2 生长素对MSG大鼠红细胞免疫功能的影响 结果见表2。

     表2 生长素对MSG大鼠红细胞免疫功能的影响（略）    
   
     注:与MSG组比较， * P<0.05

     从表2可见，低剂量（0.15μg/kg・次）生长素可使MSG组显著降低了的RBC-C3bRR（%）显著回升（P<0.05），但升高了的RBC-ICRR（%）虽有回降趋势，但未见显著回降（P>0.05）;高剂量（1μg/kg・次）生长素使MSG组显著降低了的PBC-C3bRR（%）显著回升（P<0.05），升高了的RBC-ICRR（%）显著回降（P<0.05）。说明生长素可提高MSG大鼠的红细胞免疫功能。

    2.3 性激素对MSG大鼠红细胞免疫功能的影响

    2.3.1 雌激素对雌性MSG大鼠红细胞免疫功能的影响 结果见表3。

     表3 雌激素对雌性MSG大鼠红细胞免疫功能的影响 （略）
   
       注:与MSG组比较， * P<0.05
     从表3可见，低剂量（20μg/kg・次）E 2 使MSG大鼠显著 降低了的RBC-C3bRR（%）显著回升（P<0.05），升高了的RBC-ICRR（%）显著回降（P<0.05），红细胞免疫功能回升。高剂量（30μg/kg・次）E 2 的作用反而较低剂量的作用差。

    2.3.2 雄激素对雄性MSG鼠红细胞免疫功能的影响 结果见表4。

     表4 雄激素对雄性MSG大鼠红细胞免疫功能的影响 （略）
   
       注:与MSG组比较， * P<0.05

     从表4可见，高剂量（200μg/kg・次）丙酸睾酮可使MSG大鼠RBC-C3bRR（%）进一步降低（P<0.05），对RBC-I-CRR（%）无明显影响。低剂量（100μg/kg・次）丙酸睾酮对MSG大鼠RBC免疫功能无明显作用。

    2.4 甲状腺素对雄性MSG大鼠红细胞免疫功能影响 结果见表5。

    表5 甲状腺素对雄性MSG大鼠红细胞免疫功能影响 （略）
        
    注:与MSG组比较， * P<0.05

    从表5可见，低剂量（12.5μg/kg・次）左旋甲状腺素可使MSG大鼠RBC-C3bRR（%）回升和RBC-ICRR（%）回降（P<0.05），高剂量（25.0μg/kg・次）左旋甲状腺素可使MSG大鼠RBC-C3bRR（%）回升（P<0.05），但对RBC-I-CRR（%）无显著影响。

     3 讨论

     参照 ［1］ 损毁SD大鼠下丘脑弓状核，观察RBC免疫功能的改变，在此基础上，分别观察生长素、雌二醇、丙酸睾酮、左旋甲状腺素的作用，了解弓状核对RBC免疫功能的调控及其机制。

    结果发现，损毁弓状核导致RBC免疫功能显著降低（表1）。0.15μg/kg・次的生长素使降低了的RBC-C3bRR（%）回升，但未能使升高了的RBC-ICRR（%）回降。1μg/kg・次的生长素使MSG大鼠RBC-C3bRR（%）回升外，还使升高了的RBC-ICRR（%）回降。说明生长素可提高MSG大鼠的红细胞免疫功能，且有量-效依从关系。20μg/kg・次的雌二醇使MSG大鼠RBC免疫功能回升，30μg/kg・次的雌二醇使MSG大鼠降低了的RBC-C3bRR（%）显著回升，但不能使RBC-ICRR（%）显著回降。丙酸睾酮使MSG大鼠RBC-C3bRR（%）进一步降低，剂量越高，作用越明显。12.5μg/kg・次的左旋甲状腺素使RBC免疫功能回升，但25.0μg/kg・次的左旋甲状腺素只能使RBC-C3bRR（%）回升，对RBC-ICRR（%）无明显影响。

    MSG大鼠下丘脑弓状核神经细胞损毁80%～90% ［1］ ，血液中GH含量显著降低 ［3］ ，血清中雌二醇（E 2 ）、睾酮（T）水平明显降低 ［4，5］ ，甲状腺素水平降低。本研究表明，MSG大鼠RBC-C3bRR（%）显著降低，RBC-ICRR（%）显著升高，说明MSG大鼠红细胞免疫功能降低。

    上述结果表明，损毁弓状核导致RBC免疫功能显著降低，此时伴有血液中生长素、雌激素、雄激素、甲状腺素水平显著降低，在此基础上，人工给予外源性生长素可使RBC免疫功能显著回升。适量的雌激素、甲状腺素可使RBC免疫功能回升，但雄激素对RBC免疫功能有抑制作用。

    本实验结果提示，下丘脑弓状核参与RBC免疫功能的调控。生长素、性激素、甲状腺素可能是弓状核调控RBC免疫功能的重要途径，这些激素保持一定的水平是维持RBC免疫功能的重要机制。

      文献

     1 吴开云，李耀斌.谷氨酸单钠对新生期大鼠弓状核神经元损毁的实验研究.解剖学杂志，1999，2（4）:273-275.

    2 郭峰.红细胞免疫及其调节功能测定方法.免疫学杂志，1990，6 （1）:60.

    3 Terry LC.Monosodium glutamate:acute and chronic effects on rhythmic growth hormone and prolactin secretion，and somatostatin in the undis-turbed male rta.Brain Res，1981，217:129.

    4 Nemeroff CB，Lamartiniere CA，Mason GA，et al.Marked reduction in gonadal steroid hormone levels in rats treated neonatally with monosodi-um L-gluttamate:further evidence for disruption of hypothalamic-pi-tuitary-gonadal axis regulation.Neruoendocrinology，1981，33（5）:265-267.

    5 Bakke JL，Lawrence N，Bennett J，et al.Late endocrine effects of admin-istering monosodium glutamate to neonatal rats.Neruoendocrinology，1978，26（4）:220-228.