子宫内膜异位症患者血清与腹腔液SICAM-1水平变化
作者：樊冬梅 梁佳斌 姚世娟
【摘要】 目的探讨子宫内膜异位症(EM)患者血清与腹腔液中可溶性细胞间粘附分子?1(SICAM?1)表达及其水平变化与该病的关系。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法，测定35例EM患者(其中I～II期25例，III～Ⅳ期10例)和30例正常妇女的血清与腹腔液中SICAM?1水平。结果EM组血清SICAM?1水平明显高于对照组(P=0.0036)；两组腹腔液SICAM?1水平无显著差异(P=0.3120)；EM组中III～IV期血清SICAM?1水平明显高于I～II期(P=0.0031)，腹腔液水平无显著差异(P=0.9670)。结论EM患者血清SICAM?1水平明显升高，SICAM-1可能在EM发病机制中起一定作用。
【关键词】 子宫内膜异位症 细胞间粘附分子 酶联免疫吸附测定
子宫内膜异位症(endometriosis，EM)为妇女常见疾病，发生率约占育龄妇女的15％，主要引起不孕(50％以上)、痛经、慢性盆腔痛等，其发病率有逐年增长趋势。它严重影响患者的生活质量，是困扰妇科医生的难题之一。其发病机制尚不十分清楚，目前广泛接受的是Sampson提出的经血逆流的子宫内膜种植学说。但约90％妇女有经血逆流，并非每个行经的妇女均发生EM。经血逆流进腹腔的内膜细胞必须先和腹膜发生粘附，子宫内膜细胞之间需要粘附、聚集成团，才可能成功地种植生长。可溶性细胞间粘附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule?1，SICAM-1)参与了异位子宫内膜的种植定位、粘附和生长过程，其在EM的发生过程中可能起了不可忽视的作用。本研究选择我院妇科35例EM患者及正常盆腔者30例，检测血清和腹腔液中SICAM-1水平的变化，旨在探讨其与EM发病机制的关系。
1材料与方法
1.1对象选择2004年9月～2005年6月在我院妇科经腹腔镜检查确认为EM的患者35例，年龄25～45岁，平均(38.01±8.59)岁，半年内未接受性激素，采用修订的美国生育协会EM分期评分法(RAFS)对EM患者分期：I～II期25例，III～Ⅳ期10例。收集同期在我院生殖助孕中心因不孕症行腹腔镜检查证实为正常盆腔的妇女30例为对照组，年龄28～42岁，平均(35.89±6.90)岁，两组患者年龄及手术时月经天数无显著差异，均被证实无其他内、外科疾病，无感染灶及妇科良性疾病(子宫平滑肌瘤、排除巧克力囊肿以外的卵巢良性囊肿等)。
1.2方法两组患者均于手术前抽肘静脉血2 ml置于无菌离心管中，恒温水浴箱中静置30 min，3 000 r/min离心20 min，取血清-20℃贮存待测。术中先留取腹腔液5 ml，恒温水浴箱中静置30 min，3 000 r/min离心20 min，取上清液-20℃贮存待测。血液污染者弃去。EM组共留取血清标本35份，腹腔液标本30份；对照组留取血清标本30份，腹腔液标本24份，血清、腹腔液的SICAM?1测定采用ELISA定量检测，人SICAM?1 ELISA 96孔(48孔/条，2块/盒)试剂盒由美国圣地亚哥Gene?May公司生产，购自深圳晶美生物工程有限公司上海分公司，产品目录号GMK 201。操作方法：严格按照试剂盒说明进行。用美国Beckman公司产CASTEAX 2100型酶联免疫检测仪读取结果数据，根据预试结果，待测样本稀释l0倍，测得结果再乘10，标准曲线测定以空白→6.25→25→50→100(μg／L)倍比稀释，标准品与待测样本均同时双份测定，取平均值。
1.3统计学方法临床数据以±s表示。差异显著性检验采用t检验，由SPSS软件完成。
2结果
2.1标本检测所有检测标本在同一天一批完成。标准曲线系数R=0.993，呈线性分布。
2.2EM组与对照组血清及腹腔液SICAM?1检测结果EM组血清SICAM?1浓度明显高于对照组，差异具有显著性(P=0.0036)。两组腹腔液SICAM?1比较不存在显著差异(P=0.3120)。见表1。
表1EM组与对照组血清及腹腔液SICAM?1检测结果（略）
2.3早期与晚期EM患者血清及腹腔液SICAM?1检测结果早期EM(RAFS评分I～II期)与晚期EM(RAFS评分III～Ⅳ期)两组血清和腹腔液SICAM?1浓度比较，晚期患者血清SICAM?1含量高于早期患者，具有显著性差异(P=0.0031)。两组间腹腔液SICAM?1含量无显著性差异(P=0.9670)。见表2。
表2早期EM与晚期EM患者血清及腹腔液SICAM?1检测结果（略）
3讨论
细胞间粘附分子?1(ICAM?1)是一种单链糖蛋白，含有505个氨基酸，属于免疫球蛋白超家族成员。其在细胞表面表达量增加，在多种疾病中已有报道，并被认为是免疫反应的一个早期可靠指标［1，2］。ICAM?1除可表达于细胞表面外，因其缺少跨膜片段和胞浆区域，容易从细胞膜上脱落，尚可以循环形式存在于机体血清和其他体液中，即SICAM?1。细胞间粘附分子广泛存在于各种细胞表面和细胞外基质中，可介导细胞-细胞、细胞-细胞外基质之间的粘附，并传递细胞间信号，对细胞的生长与分化、伸展与移动及众多免疫反应起着重要的调节作用［3］。先前的结果研究表明，正常人子宫内膜细胞可持续分泌SICAM?1［4］。有研究报道EM患者血清及腹腔液中SICAM?1水平比对照组升高，推测可能是腹腔液中局部高浓度的SICAM?1抑制了NK细胞的活性，影响NK细胞对异位细胞的粘附、杀伤功能，削弱了NK细胞在免疫监视中所起的主要作用［5，6］。本研究发现，EM患者血清SICAM?1水平明显升高，且升高的水平随EM期别的增加而升高，并与RAFS评分呈正相关，说明随病情加重，血清SICAM?1水平明显上升，这与De Placido等［7］报道一致，提示SICAM?1在EM的发生中起一定的作用。Somigliana等［8］在研究中证明EM患者NK细胞活性和功能下降，且与EM进程有关，EM越严重，NK细胞活性下降越明显。可能是因为SICAM?1阻断了淋巴细胞功能相关抗原?1的作用，从而干扰了杀伤细胞及T细胞在靶组织的粘附作用及进一步对异位内膜的吞噬作用，是异位内膜细胞逃避免疫监视的机制之一，使倒流至盆腔的内膜不能被人体免疫细胞所清除，并在异位种植生长，最终发生EM［7］。因而SICAM?1存在与异位的内膜细胞逃避免疫监视，继而发生种植机制有一定的联系，它与EM的发生、发展和转归密切相关。
【】
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3Witkowka AM.Soluble ICAM?l：a marker of vascular inflammation and lifestyle.Cytokine，2005，31(2)：127?134.
4Steff AM，Gagne D，Page M，et al.Concentration of soluble intercellular adhesion molecule?1 in serum samples from patients with endometriosis collected during the luteal phase of the menstrual cycle.Hum Reprod，2004，19(1)：172?178.
5Danial Y，Gera E，Amit A，et al.Do soluble cell adhesion molecules play a role in endometriosis? Am J Reprod Immunol，2000，43(3)：160?166.
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7De Placido G，Alviggi C，Di Palma G，et al.Serum concentrations of soluble human leukocyte class I antigens and of the soluble intercellular adhesion molecule?1 in endometriosis: relationship with stage and non?pigmented peritoneal lesions. Hum Reprod,1998，13(11)：3206?3210.
8Somigliana E，Vigarno P，Candiani M，et al.Use of serum?soluble intercellular adhesion molecule?1 as a new marker of endometriosis.Fertil Steril，2002，77(5)：1028?1031.
