妊娠期高血压疾病患者血浆线粒体偶联因子6的变化

             作者：张春莲, 赵亚娟, 吕跃峰, 梁江红, 陈双郧

【摘要】  目的:探讨血浆线粒体偶联因子6（mitochondrial coupling factor 6,CF6）与妊娠期高血压疾病的关系。方法:43例妊娠期高血压疾病孕晚期妇女,放免法测定血浆CF6和前列环素I2 (PGI2)的浓度，并与正常晚孕妇女及正常未孕育龄妇女相比较。结果:⑴妊娠期高血压疾病组产前血浆CF6浓度高于正常晚孕组（t＝9.25，P＜0.001），而PGI2的浓度（t＝4.23，P＜0.001）及PGI2/CF6（t＝5.66，P＜0.001）低于正常晚孕组，差异均有显著性。产后1周，两组产妇血浆CF6与PGI2水平均接近于正常未孕妇女，但妊娠期高血压疾病组PGI2/ CF6比值仍然低于正常晚孕组（t＝3.02，P＜0.05）。⑵分娩前血浆CF6浓度及PGI2呈负相关（r＝-0.59，t＝5.8，P＜0.001）。结论:CF6可能通过抑制PGI2合成，参与妊娠期高血压的发生。

【关键词】  妊娠期高血压疾病；线粒体偶联因子6；前列环素I2

    Abstract:Objective  To investigate the relationship between plasma mitochondrial coupling factor 6 and  hypertensive disorder complicating  pregnancy. Methods A case?control study was performed with 43 hypertensive disorder complicating  pregnancy and 21 normal pregnant women and 21 normal non?pregnant women.Plasma CF6 and PGI2 concentration were measured with radioimmunoassay. Results ⑴Plasma concentration of CF6 in hypertensive disorder complicating  pregnancy group was higher than that in normal pregnant group before delivery (t=9.25, P＜0.001), while the concentration of PGI2 (t=4.23,P＜0.001) and PGI2/CF6 (t=5.66,P＜0.001) was lower than normal pregnant women.Postpartum  a week, the concentration of CF6 and PGI2 in maternal plasma was closer to the normal non?pregnant women, but PGI2/ CF6 in hypertensive disorder complicating  pregnancy was still lower than normal pregnant women (t=3.02, P＜0.05). ⑵There was a  negatively correlated between CF6 and PGI2 level before delivery  (r=-0.59, t=5.8,P<0.001). Conclusions  CF6 may inhibit PGI2 sythesis,and participate in hypertensive disorder of pregnancy in patients with hypertension.

    Key Words: Hypertensive disorder complicating；Mitochondrial coupling factor 6;PGI2

　 妊娠期高血压疾病是妊娠期特有的疾病，严重危害孕产妇的健康，是导致母婴死亡的主要原因，其发生机制不明。前列环素I2 (PGI2) 具有强效扩血管和抑制血小板凝集作用, 其合成减少与妊娠期高血压疾病有关。线粒体偶联因子6（mitochondrial coupling factor 6,CF6）是新发现的缩血管活性肽，已经被证明与高血压的发生有关[1-2]。CF6能够抑制磷脂酶A2的活性，减少花生四烯酸的释放，从而减少PGI2的合成，是体内唯一的内源性PGI2合成抑制剂。本研究测定CF6在妊娠期高血压疾病患者血浆中的变化，以探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的意义。

    1  资料与方法

    1.1  对象

    妊娠期高血压疾病组：所有产妇均来自2005年9月-2006年3月我院产科住院病人(初产妇，既往无高血压、肾脏疾患病史)。根据第六版妇产科教材，确诊为妊娠期高血压疾病患者43 例，其中重度子痫前期患者10例，子痫3例，轻度子痫前期30例，年龄在22～36岁之间，平均24.52岁，孕周34～39周。正常晚孕组：同期正常晚期妊娠住院产妇21例，年龄22～35岁，平均24.6岁，孕周35～41周。正常未孕组：同期健康育龄妇女21例，年龄21～35岁，平均27.6岁。

    1.2  方法

    1.2.1  标本采集：妊娠期高血压疾病组在未前抽取静脉血2 mL，置10%EDTA-Na2 20 μL和抑肽酶8 μL的试管中，轻轻混匀后置于冰浴中，4 ℃条件下以3 500 r/min离心10 min，分离血浆，-70°保存。测定前，将样本置于冰浴中复溶，再次4 ℃3 000 r/min离心10 min，取上清液测定。正常晚期妊娠组及未孕组于清晨空腹抽取静脉血2 mL，按上述方法操作。人CF6放免试剂盒由美国Phoenix Pharmaceuti-cals Inc提供；由于PGI2的生物半衰期短（约3 min），难以测定，故以测定其代谢产物6-酮-前列腺素F1α作为判断PGI2浓度的指标。放免试剂盒由北京康肽生物科技有限公司提供。以上测定严格按试剂盒说明操作。

    1.2.2  统计学分析： 实验数据用x±s表示，用t检验及直线相关分析进行统计学分析。

    2  结果

    2.1  三组之间血浆PGI2及CF6水平变化

    妊娠期高血压疾病组产前血浆PGI2的浓度显著低于正常晚孕组（t＝4.23，P＜0.001），而CF6浓度显著高于正常晚孕组（t＝9.25，P＜0.001），血浆PGI2/CF6比值也显著低于正常晚孕组（t＝5.66，P＜0.001）。产后一周，两组产妇血浆CF6与PGI2水平均接近于正常未孕妇女，但妊娠期高血压疾病组PGI2/CF6比值仍然低于正常未孕组（t＝3.02，P＜0.05）,见表1 。表1  不同状态妇女血浆PGI2及CF6测定结果

    2.2  妊娠期高血压疾病组CF6与PGI2相关性分析

    对妊娠期高血压疾病组分娩前血浆CF6浓度及PGI2进行直线相关性分析发现，二者呈负相关（r＝-0.59），对相关系数进行t检验，t＝5.8，P＜0.001，血浆CF6与PGI2呈负相关。

    3  讨论

    血管活性因子失衡引起的全身小血管痉挛，是目前被广泛接受的妊娠高血压疾病发病机理。PGI2有强效的扩血管活性，主要在血管内皮合成。血栓素、凝血酶等多种因素激活磷脂酶A2，释放花生四烯酸，经过环氧化酶合成PGI2 。高血压大鼠体内PGI2合成减少及高血压患者血浆中PGI2浓度降低，提示PGI2的降低与血压升高有关[1-2]。本研究结果显示：正常妊娠晚期血浆PGI2浓度升高，而妊娠期高血压疾病患者此时血浆PGI2浓度降低，两组产妇产后一周血浆PGI2水平均接近于正常未孕妇女（妊娠期高血压疾病组产后一周血压降至正常），再次证实了血浆PGI2降低可使孕妇血压升高，从而导致妊娠期高血压疾病的一系列病理变化。

    CF6由76个氨基酸残基组成，是迄今已知的体内唯一的内源性PGI2合成抑制因子，主要分布于线粒体内及血管内皮细胞膜上。在线粒体内它是ATP合成酶的一个亚单位，主要参与能量物质的转换ATP生成。CF6通过抑制胞浆钙依赖磷脂酶A2的活性，减少内源性花生四烯酸释放，从而减少PGI2的生成。给大鼠静脉注射CF6可使PGI2合成减少、血压升高，而CF6抗体可使血浆前列环素浓度升高、血压降低[3]。血管内皮细胞受损时，CF6释放入血液循环，抑制PGI2合成，但CF6不影响TXA2的合成[4]，血浆CF6的异常会导致PGI2/TXA2失衡。本研究对妊娠期高血压疾病患者分娩前血浆CF6与PGI2进行直线相关性分析发现，二者呈显著负相关，即随着CF6浓度升高PGI2呈降低趋势，提示CF6可能通过抑制PGI2合成，参与妊娠期高血压的发生。

    CF6在细菌到哺乳动物中具有同一性，大鼠的CF6前体有78％的氨基酸序列与人类相同。CF6在原发高血压大鼠中的基因表达和血浆浓度比血压正常大鼠高[3]，高血压患者血中CF6的水平显著高于血压正常的人[5-6]，提示CF6与人类和动物的血压升高有关。本研究结果显示，正常妊娠晚期，血浆PGI2与CF6浓度与未孕妇女比较无显著差异，但PGI2/CF6比值升高了将近1倍，这有利于维持较高的PGI2/TXA2比例，维持有利于妊娠的血管舒缩平衡。妊娠期高血压疾病患者，血浆CF6明显升高而PGI2水平显著降低，且PGI2/CF6比值也显著低于其他两组，提示CF6浓度增加与妊娠期高血压疾病发生有关，这可能是由于血浆中高浓度的CF6引起PGI2/TXA2降低，导致血管收缩所致。产后一周左右，几乎所有的妊娠期高血压疾病患者血压降至正常。监测产后一周时血浆PGI2与CF6浓度发现，妊娠期高血压疾病组血浆CF6水平回落、PGI2浓度回升，而在正常妊娠组，二者浓度均有所回落，两组血浆PGI2 与CF6浓度及PGI2/CF6此时均接近于正常未孕妇女。这一现象提示PGI2/CF6回升与血压恢复有关。

    高血压患者及妊娠期高血压疾病患者血浆CF6水平升高的机制尚不清楚。有研究认为，血管内皮在切应力作用下，可释放CF6，且释放量与切应力强度及作用时间呈正相关，但给WKY大鼠持续注射去甲肾上腺素升高血压后，血浆中的CF6并无显著变化，推测CF6是导致高血压发病的原因，而非高血压继发的血流动力学改变的结果[3]。研究发现，急性心肌梗死患者发病早期血浆CF6水平较对照组显著增高[5-7]，提示组织损伤（如心肌缺血和血管内皮损伤等）导致细胞坏死和凋亡时可释放CF6进入血循环。血管内皮损伤导致CF6释放可能是妊娠期高血压疾病患者血压升高的原因，这有待于进一步研究证实。

    本研究提示：CF6可能通过抑制PGI2合成，参与妊娠期高血压疾病患者高血压的发生。围产期动态检测血浆CF6及PGI2水平，进行大样本前瞻性队列研究，有助于进一步确认CF6及PGI2在不同妊娠期及产后的变化，期望从中获取妊娠期高血压疾病患者血浆CF6浓度的阈值。

【】
  [1]Osanai T,Okada S,Sirato K,et al.Mitochondrial coupling factor 6 is present on the surface of human vascular endothelial cells and is released by shear stress[J].Circulation,2001,104（25）:3 132-3 136.[2]蒋宏峰，范英鲜，丁文惠,等.心血管疾病患者血浆CF6的含量变化[J].放射免疫学杂志,2003,16（3）：131-134.[3]Osanai T,Tanaka M,Kamada T,et al.Mitochondrial coupling factor 6 as a potent endogenous vasoconstrictor[J].J Clin Invest,2001，108(7):1 023-1 030.[4]Osanai T,Kamada T,Fujiwara N,et al.A novel inhibitory effect on prostacyclin synthesis of coupling factor 6 extracted from the heart of spontaneously hypertensive rats[J].J Biol Chem,1998，273(48):31 778-31 783. [5]Osanai T,Nakamura M,Sasaki S，et al.Plasma concentration of coupling factor 6 and cardiovascular events in patients with end-stage renal disease[J].Kidney Int,2003，64(6):2 291?2 297.[6]褚松筠,丁文惠, 蒋宏峰,等.急性心肌梗死患者血浆线粒体偶联因子6的动态变化及其意义探讨[J].中华心血管病杂志,2004,32(5):435-437.[7]任永生,蒋宏峰,蒋 维,等.高血压病人血浆线粒体偶联因子6的变化[J],高血压杂志,2003,11(1):19-20.