高效液相色谱法测定鼻康宝胶囊中黄芩苷的含量

【摘要】  　　目的：用HPLC法测定鼻康宝胶囊中黄芩苷的含量。方法：采用Kromasil C18柱，以甲醇?水?磷酸（40∶60∶0.2）为流动相，检测波长280 nm。结果：黄芩苷在5.2～83.2 μg/mL范围内峰面积与浓度呈良好性线形关系，r=0.9998，平均回收率为97.8%。结论：该方法专属性强、简便、精密度好、结果准确可靠。

【关键词】  鼻康宝胶囊 黄芩苷 高效液相色谱法
   
　　［Abstract］ Objective:To establish a method for determination of baicalin in Bikangbao capsule by HPLC. Methods: HPLC was performed on Kromasil C18 column with methano1?water? phosphonic acid (40∶60∶0.2) as mobile phase. The UV detection wavelength was 280 nm. Results: The linear range of baicalin was sample size 5.2～83.2 μg/mL (r=0.9998), the average recovery was 97.8%. Conclusions: The method was simple, accurate and fast, and could be used for the determination of baicalin in Bikangbao capsule.

　　［Key words］ Bikangbao capsule; Baicalin; High performance liquid chromatography
   
　　鼻康宝胶囊是由黄芩、蜂房、辛夷、桔梗等提取研制而成的复方制剂，具有清热解毒、通窍等功效，临床上用于慢性鼻炎、过敏性鼻炎等。本复方制剂中黄芩为方中君药，而黄芩苷是黄芩的主要有效成份，具有明显的抗炎、抗变态反应的作用［1］，以此作为本品含量测定的指标，对保证药品质量具有实际意义。因此，本研究采用HPLC法对鼻康宝胶囊中黄芩苷进行了含量测定。

　　1  仪器和试药
  
　　Agilent 1100系列高效液相色谱仪；紫外检测器；HP Chemstation色谱工作站。黄芩苷对照品购自药品生物制品检定所，批号为110715?200514；甲醇为色谱纯，水为超纯水，其它化学试剂均为分析纯。鼻康宝胶囊为药剂科自制，批号为051116、051128、051210。

　　2  方法和结果

　　2.1  色谱条件
   
　　色谱柱：Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5.0 μm）；流动相：甲醇?水?磷酸（40∶60∶0.2）；流速：1.0 mL/min；检测波长：280 nm；柱温：25 ℃。在该色谱条件下，黄芩苷峰与其他成分有较好的分离，见图1。

　　A. 黄芩苷对照品            B. 鼻康宝胶囊            C. 阴性对照品

　　图1  HPLC色谱图(1?黄苓苷)（略）

　　2.2  对照品溶液的制备
   
　　精密称取黄芩苷对照品适量，用甲醇溶解制成每毫升含19.8 μg的溶液，即得。

　　2.3  供试品溶液的制备
   
　　精密称取胶囊内容物0.3 g，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇20 mL，称定重量，超声处理30 min，放至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　2.4  空白试验
   
　　按处方制备不含黄芩的阴性对照样品，并按供试品溶液的制备方法处理。经测定，阴性对照无干扰。

　　2.5  标准曲线的制备
   
　　精密量取浓度为104 μg/mL的对照品溶液0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mL置10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，摇匀。按上述色谱条件各进样10 μL，测定黄芩苷峰面积。以黄芩苷浓度X（μg/mL）对峰面积Y进行回归，得回归方程：Y=45.15X+3.418，r=0.9998。结果表明黄芩苷在5.2～83.2 μg/mL范围内线性关系良好。

　　2.6  精密度试验
   
　　取同一批样品（051116），分别配制6份，按上述色谱条件，于同一日内及不同日内分别测定含量，得到日内和日间精密度，结果RSD分别为1.29%和1.65%。

　　2.7  稳定性试验
   
　　精密吸取供试品溶液，每间隔2 h进样10 μL测定1次，。结果RSD为0.24%（n=4），表明溶液在室温下8 h内稳定。

　　2.8  回收率试验
   
　　取已知含量的样品6份，分别加入一定量的黄芩苷对照品溶液，按2.3项下处理后进样10 μL，依法测定，计算黄芩苷的回收率，结果见表1。

　　表1  回收率试验结果（略）

　　2.9  样品测定
   
　　取3个批号样品，分别按2.3项处理后，精密吸取供试品溶液和对照品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，依法测定，按外标法计算黄芩苷的含量，结果见表2。

　　表2  样品测定结果（略）

　　3  讨论
   
　　研究中发现，无论是黄芩苷对照品溶液，还是鼻康宝胶囊供试品溶液，液相色谱的进样量以10 μL为宜，黄芩苷峰的对称性和柱效良好，若进样20 μL，黄芩苷的峰形变差，呈前沿峰，柱效降低。用高效液相色谱法测定供试品中黄芩苷含量，以控制本品质量，具有准确、灵敏和重现性好等优点。

【】
  　　［1］ 张建春, 张 华, 施 瑛, 等. 黄芩苷的研究近况［J］. 时珍国医国药, 2005, 16(3): 247?249.