藏药二十味沉香散抗慢性低氧的实验研究

            作者：李生花 王建新 靳国恩 

【摘要】  目的 探讨藏药二十味沉香散是否能够防治慢性低氧对机体造成的损伤。方法 将30只Wistar大鼠随机分为常氧对照组、高原对照组和给药组。常氧对照组（海拔2260m）就地测定Ppa、RV/（LV+S）、 Hb和Hct等指标；高原对照组和给药组是将大鼠从西宁（海拔2260m）运至花石峡（海拔4500m）分别用0.9%生理盐水和藏药二十味沉香散水剂灌胃，30天后，测定与常氧组相同的各项指标。结果 给药组平均Hb、Hct分别为（17.1±1.9）g/dl、（57.6±5.5）%，与高原对照组［（23.0±2.1）g/dl、（71.6±7.5）%］相比，有显著性差异(P<0.01)；平均Ppa和RV/（LV+S）分别为（26.8±6.6）mmHg、 0.45±0.05,显著低于高原对照组［（36.1±9.2）mmHg、0.56±0.07］，P<0.01；两低氧组与常氧组相比，上述各项指标均有显著性差异（P<0.05）。结论 二十味沉香散通过防止红细胞过度增生和肺动脉压升高，发挥预防慢性低氧对机体损伤的作用。

【关键词】  藏药 二十味沉香散 慢性低氧

    Abstract  Objective  To investigate the efficacy of Tibetan herbs, 20 Wei Chenxiang San, on preventing chronic hypoxic injury. Methods 30 Wistar rats were divided into 3 groups by randomly, then all parameters of one group were measured at 2260m (Xining) as normoxic control group; the other two groups were moved from 2260m to 4500m and feed for 30 days. Experiment group and the control group (hypoxia) were treated with 20 Wei Chen Xiang San and 0.9% Normal Saline, respectively, once a day. The Ppa, RV/（LV+S）, Hb, and Hct of rats were measured after 30 days at 4500m. Results  The Hb and Hct in 20 Wei Chen Xiang San group were （17.1±1.9）g/dl and （57.6±5.5）%,respectively, then compared them with hypoxia group the Hb and Hct were （23.0±2.1）g/dl and （71.6±7.5）%, respectively,they showed  remarkably reduced（P<0.01）. The Ppa and RV/（LV+S）of 20 Wei Chen Xiang San group were （26.8±6.6）mmHg  and 0.45±0.05 ,respectively,when compared them with hypoxia group the Ppa and RV/（LV+S） were （36.1±9.2）mmHg and 0.56±0.07, respectively, and showed significate diffience （P<0.01）,but they higher than the normoxic control group(P<0.05).  Conclusion 20 Wei Chen Xiang San has potential effect on preventing chronic mountain sickness.

    Key words  Tibetan herb  20 Wei  Chenxiang  San  Chronic hypoxia

    慢性高原病是青藏高原特有的常见病,其病理生理特征为有严重的低氧血症、红细胞过度增生和持续性肺动脉高压，如果不能及时给予，就会导致右心功能衰竭。藏药二十味沉香散是在原有八味沉香散基础上改良而来的组方，其除了对脑细胞有很好的激活作用外，还能改善心肌缺血，对缺氧性心肌劳损也有一定的防治作用。本文拟从其对慢性低氧对机体造成损伤的保护作用方面开展相关实验观察。

    1  材料与方法

    1.1  药物制备：将由沉香、丁香、木瓜、肉豆蔻、红花等20味藏药组成的二十味沉香散（藏药名：阿嘎尔尼秀日布），依据藏药书籍《验方集萃》等所述制剂方法制成混悬液备用［1,2］。以上藏药均由青海省金珠藏药厂提供。

    1.2  动物：Wistar大鼠，160～230g，雌雄各半，由青海省实验动物中心提供。

    1.3  方法：将30只Wistar大鼠随机分成给药组、高原对照组和常氧对照组。每组10只，雌雄分开。常氧对照组在西宁（海拔2260m）进行相关指标的测定，而给药组和高原对照组则运至花石峡（海拔4500m）饲养30天，期间给药组用二十味沉香散混悬液灌胃，每天1次，每周进行1次体重和血红蛋白测定，与此同时，高原对照组用同等剂量的0.9%生理盐水灌胃，指标测定同给药组。30天后，测定两组大鼠的体循环压(BP)、肺动脉压(Ppa)、右心室与左心室重量之比［(RV/（LV+S）］、血红蛋白(Hb)和红细胞压积(Hct)等值。血压测定：每只大鼠用25%乌拉坦麻醉（125mg/100g体重），麻醉平稳后，分离出右侧颈外静脉和左侧颈总动脉。用肝素化的弯头聚次亚乙烯管（ID 0.22 mm）沿右侧颈外静脉插入，直至肺动脉，另一根插入左颈总动脉，压力换能器终端连接LMS-2B二导生理记录仪（成都仪器厂）采集、分析Ppa和BP值。其余指标按常规方法测定。

    1.4  统计学处理：应用SPSS10.0软件包进行统计学处理，结果以x±S表示，显著性检验采用ANOVA分析，有统计学意义的组间差异用LSD检验比较， P<0.05者视为具有统计学意义。

    2  结果

    2.1  藏药二十味沉香散对大鼠Hb和Hct的影响（表1）

    表1藏药二十味沉香散对低氧环境大鼠Hb、Hct的影响( 注：给药组与两对照组相比，*P<0.01；两对照组相比，△P<0.01.

    通过对3个组大鼠的Hb和Hct进行比较，发现给药组的Hb和Hct较常氧对照组有所增高（P<0.01），但明显低于高原对照组（P<0.01），雌雄间无差异。

    表2两组Hb水平在高原不同时段的变化(x±S)

    Table 2.  Change of Hb level in two groups at different period(x±S)  组别2260m4500m第一周第二周第三周第四周高原对照组14.7±1.215.3±0.417.8±0.620.4±1.323.0±2.1给药组14.7±1.215.8±1.016.2±0.9*16.7±0.9*17.1±1.9*    注：给药组组与高原对照组在不同时段Hb水平比较，*P<0.01.

    同时，对给药组和高原对照组大鼠在高原饲养30天中的Hb动态变化进行了观测（表2和图1）。发现给药组暴露在低氧环境中，其Hb变化率较低，30天仅升高2.4 g,平均每周升高0.6g，而高原对照组30天内升高了7.7 g，平均每周升高1.9 g，两组间结果差异具有显著性（P<0.01）。

    图1  二十味沉香散和高原对照Hb动态变化趋势比较

    Fig1. Hb level comparie between 20 vci chenxiang and high altitude control group

    2.2  藏药二十味沉香散对大鼠血液动力学的影响（图2）

    图2显示，给药组的平均Ppa为（26.8±6.6）mmHg，与高原对照组［（36.1±9.2）mmHg］相比，两组结果间有显著的统计学意义（P<0.01），但与常氧对照组［（22.7±6.9）mmHg］相比，两组结果间无显著性差异（P>0.05）。

    2.3  藏药二十味沉香散对大鼠RV/（LV+S）比值的影响(图3)

    图3显示，高原对照组为 0.56±0.07,给药组为0.45±0.05，两者有显著性差异（P<0.01），均高于常氧对照组（0.34 ±0.04），P<0.05。

    图2  不同组Ppa水平比较

    Fig 2. Conpare of Ppa level in three groups

    图3  不同组RV/LV比较

    Fig 3. Conpare of RV/(LV+S)in three groups

    3  讨论

    本实验发现给药组大鼠Hb、Hct显著低于高原对照组（P<0.01）。另外，1个月时间内对Hb的动态监测显示，给药组Hb升高速度也明显低于高原对照组，提示该药可能在慢性低氧环境下具有防止红细胞过度增生的作用。在高原环境下适当提高Hb浓度，有利于组织供氧，减轻低氧对机体的损害，但异常升高又会使血液粘滞度增加，致血液流速变慢加重组织缺氧。本研究提示，该药在慢性低氧环境下，具有防止Hb浓度增高的作用，这一研究结果正好与该药剂具有调和气血、活血化瘀的临床功效一致。

    持续性肺动脉高压是引起高原心脏病的主要因素，它的持续存在可增加右心室后负荷，最终导致右心室肥厚或右心功能不全。本研究发现给药组Ppa值和RV/（LV+S）比值显著低于高原对照组，而接近常氧对照组，提示二十味沉香散具有防止肺动脉压升高，减轻右心室后负荷，预防右心室增厚的作用。低氧性肺动脉高压的形成机制十分复杂［３，４］，但目前较公认的看法［5］是：低氧一方面直接刺激肺组织释放与收缩相关的化学介质，另一方面抑制血管扩张剂的活性，双重作用使平滑肌细胞内的Ca2+浓度升高，引起肺动脉平滑肌收缩致压力上升。二十味沉香散是否通过抑制肺血管平滑肌的收缩或舒张血管平滑肌而达到预防肺动脉高压的效果，其机理有待于进一步研究。总之，通过对此药抗低氧作用的研究，提示藏药二十味沉香散具有防治慢性高原病的作用。

【】
  ［1］ 靳国恩，张伟，杨应忠，等. 十五味沉香散等5种藏药抗慢性缺氧的实验研究 ［J］.中草药，2007，38（1）：95-97

［2］ 刘震东，宋淼，达番琼，等. 藏药二十味沉香丸的质量标准研究［J］. 华西药学杂志，2003，18（6）：462-464

［3］ McLoughlin P, Hyvelin JM,Howell K，et al. Pulmonary Hypertension［J］. NEJM, 2005, 352:418-419

［4］ Carmelle V. Remillard, Jason XJ, et al. High Altitude Pulmonary Hypertension: Role of K+ and Ca2+ Channels［J］.High Alt Med Biol， 2005, 6(2):133-146

［5］ Wei-Min Zhang, Kay-Pong Yip, Mo-Jun Lin. ET-1 activates Ca2+ sparks in PASMC:local Ca2+ signaling between inositol trisphosphate and ryanodine receptors［J］. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol, 2003,22(5): 680-690